基于体外组装核糖核蛋白形式的CRISPR/Cas9基因编辑方法研究进展 *

CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)/Cas(CRISPR-associated)系统是近年来发展起来的新型的基因编辑技术,在生物医学领域得到广泛应用。CRISPR/Cas9系统需要在gRNA存在的条件下通过Cas9蛋白实现对基因组的定点编辑,通常情况下以慢病毒感染或质粒转染等方式提供Cas9和gRNA。但是,这些方式容易引起免疫反应及基因片段不可控插入,存在一定的风险,限制了CRISPR/Cas9技术在机体的应用。近年来发展起来的基于体外组装的核糖核蛋白(ribonucleoprotein, RNP)转导入胞的策略由于快捷安全、编辑的脱靶率低等优势引起广泛关注。对Cas9 RNP的转导方式及其应用进行了总结,并就其目前存在的问题进行探讨,以期为CRISPR/Cas9技术的进一步发展提供依据,为拓展其应用奠定基础。     

低氧条件下失血性休克家兔血液流变性和红细胞免疫功能的变化

有关高原失血性休克的发病规律和特点是当前尚未得到解决的问题。本研究旨在通过给家兔吸低氧造成急性低氧后放血,复制高原失血性休克模型,观察休克后早期血液流变性和红细胞免疫功能的改变,以进一步探讨高原失血性休克的特点及发病规律。1 材料和方法1.1 动物 实验用雄性健康青紫兰家兔45只,体重1.7～2.5kg,实验前12h禁食禁水。1.2 方法 实验动物随机分为3组:①对照组(n=10),颈部手术下左颈总动脉插管并描记血压,但不放血。气管插管吸入室内新鲜空气,术后稳定30min后取动脉血     

中国动物学会贝类学会成立

中国动物学会贝类学会成立大会及学术讨论会于1981年9月11—15日在广州召开,参加会议的代表来自全国15个省市、自治区的50个单位,共80多人。     

国家公园的内涵与基本特征

国家公园建设已成为当前我国推进生态文明、建设"美丽中国"的重要内容和有力抓手.国家公园的理论研究和实践探索是近年全国上下主抓的重点工作之一.在调查分析和研读文献的基础上,对国家公园的内涵与基本特征进行了探讨,认为:(1)国内学术界最早提出"国家公园"一词,是在1980年;国外(美国)提出"国家公园"概念是在1832年....     

水稻涝害生理及其与水稻生产的关系

概述了水稻涝害生理、影响水稻涝害的因素以及涝害与水稻生产的关系,提出了减轻涝害的途径与灾后的补救措施。     

草鱼出血病病毒的血清学鉴定

草鱼出血病病毒(GcHV)具有弱的凝集人“O”型红血球的能力。其抗体与呼肠孤病毒、轮状病毒不发生免疫反应,说明此病毒与上述病毒无共同的抗原关系。     

重组人胰岛新生相关蛋白的表达、纯化及免疫活性研究

摘要 目的：对胰岛新生相关蛋白（Islet neogenesis associated protein ,INGAP）进行表达、纯化,并检测其免疫活性。方法： INGAP基因片段插入表达载体pET22b(+),在E.coli BL21(DE3)中表达。包涵体经洗涤并用8M尿素溶解,Heparin Agrose亲合柱层析为第一步纯化,Superdex75凝胶过滤层析作为第二步精细纯化,HPLC测定INGAP蛋白的浓度,将纯化的INGAP蛋白经注射途径免疫家兔,制备兔抗INGAP血清,采用免疫双扩、ELISA及Western Blot分析INGAP的免疫活性。结果INGAP以包涵体形式表达,表达产量高达总菌体蛋白的40%左右,经Heparin Agrose亲合柱层析和凝胶过滤层析二步组合纯化目的蛋白,经HPLC测定目的蛋白的最终纯度为98.81%,表达及纯化的INGAP具有良好的免疫活性。     

稀有植物云南金钱槭生长群落特征与保护对策

稀有植物云南金钱槭（Dipteronia dyeriana）分布在云南文山老君山,该山在地理位置上处于亚热带南部。但云南金钱槭仅生长在山体的中上部,海拔1800～2200m,生长地因海拔高,具有温凉、湿润的气候特点。云南金钱槭喜光,不适应森林内部环境。老君山云南金钱槭的大多数个体是以单优灌木群落形式存在,少量生长在灌丛中和森林边缘。单优灌木群落是干扰的产物,也由于干扰的延续而存在。分布区森林乔小被砍伐不会导致云南金钱槭消失,原生森林植被完全恢复反而会减少个体数量。对云南金钱槭生存最大的威胁是农地扩大。要维持较高个体数量,适当的干扰是必需的。