重组尿激酶原的纯化和性质研究

CHO工程细胞11G持续表达的pro-UK分泌在细胞培养液的上清中,培养液上清经过微孔玻璃(MPG)吸附色谱,羧甲基阳离子交换色谱,高压液相凝胶色谱三步纯化,纯化倍数可达700倍以上,总回收率为46％．再经过Benzamidine-Sepharose 6B亲和层析去掉少量的双链尿激酶,得到纯化尿激酶原．终产物经SDS-PAGE银染分析,纯度达90％以上,分子量为52 ku,其比活性为51 220 U/mg．抗体中和、二异丙基氟磷酸(DFP)抑制等实验证明重组pro-UK的性质和天然pro-UK的性质相一致．     

缺氧对肺动脉内皮细胞环氧合酶,血栓素合成酶基因表达的影响

应用分子杂交技术和放射免疫检测方法研究了缺氧对猪肺动脉内皮细胞的环氧合酶（ＣＯＸ）和血栓素合成酶（ＴＸＳ）基因表达及其条件培养基中６ｋｅｔｏＰＧＦ１α和ＴＸＢ２含量的动态变化。发现：６,１２,２４和４８ｈ缺氧组分别与常氧组比,ＣＯＸ１和ＣＯＸ２基因表达增加,并且ＣＯＸ２ｍＲＮＡ在缺氧６和１２ｈ就明显表达增加。在前述的不同缺氧时间组内皮细胞条件培养基中６ｋｅｔｏＰＧＦ１α含量也均显著高于相应常氧对照组（Ｐ＜０．０５）;但ＴＸＳ的ｍＲＮＡ水平及ＴＸＢ２含量在缺氧４８ｈ才有明显增加（Ｐ＜０．０５）。结果表明：（１）缺氧可诱导肺动脉内皮ＣＯＸ基因表达和ＰＧＩ２生成增加,在早期以ＣＯＸ２基因表达增加更为明显,提示可能在肺血管缺氧反应中起调节作用。（２）４８ｈ的缺氧可使内皮细胞ＴＸＳ基因表达及ＴＸＡ２生成增加,它可能在慢性缺氧肺血管反应中起介导作用。     

核酸酶保护试验在黄瓜花叶病毒株系鉴定中的初步应用

采用黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）亚组Ⅰ株系Ｆｎｙ－ＣＭＶＲＮＡ＿２的１２０９～１６２６核苷酸片段和亚组Ⅱ株系Ｌｓ－ＣＭＶＲＮＡ＿２的２００２～２４３３核苷酸片段的ｃＤＮＡ克隆,体外转录,同时掺入￣（３２）Ｐ获得负链ＲＮＡ探针,与纯化的番茄和甜椒上的ＣＭＶ中国分离物的ＲＮＡ杂交,结果表明：ＣＭＶ番茄和甜椒中国分离物与Ｆｎｙ－ＣＭＶ的核苷酸有高度同源性,隶属于Ｆｎｙ－ＣＭＶ为代表的亚组Ⅰ株系。并利用Ｋ－ＣＭＶ株系（亚组Ⅰ,源于中国）的ＲＮＡ＿２全长ｃＤＮＡ克隆的两个ＥｃｏＲＩ位点间的核苷酸序列（１６５７～２１２５ｎｔ）作探针,与上述两种ＣＭＶ中国分离物的ＲＮＡ杂交,进一步比较分析了这两个分离物和Ｋ－ＣＭＶ株系的关系。讨论了核酸酶保护法在ＣＭＶ株系鉴定中的作用。     

枯草杆菌JSIM—1018糖代谢突变株积累D—核糖研究

从收集的Bacillus,Brevibacterum,Corynebacterium,Pseudomonas,Arthrobacter等属菌种中进行D-核糖产生菌的筛选,对其中BacillusSM-18菌株用紫外线和甲基磺酸乙酯诱变,选育到莽草酸营养缺陷型突变株JSIM-1018．发酵产物经物理、化学鉴定为D-核糖．某些有机氮源如酵母粉、玉米浆、牛肉膏、蛋白陈以及某些芳香族氨基酸对突变株积累D-核糖有促进作用。在以葡萄糖为碳源的培养液中,摇瓶发酵D-核糖最高可达929／L,3000L发酵罐中试D-核糖最高可达81．759／L,平均在64g／L以上,葡萄糖基本耗尽。     

SINDBIS病毒对宿主细胞基因表达的影响

Sindbis病毒(SBV)的感染能迅速地抑制宿主细胞的基因表达(mRNA合成与蛋白质合成),但细胞rRNA的合成水平与正常细胞接近.同时SBV还诱导产生一种细胞特异的核基质结合蛋白P105.用放线菌素D处理细胞,导致感染细胞中病毒结构蛋白的合成量及有感染力的子代病毒产量明显下降.实验结果不仅显示了SBV对宿主细胞基因表达的复杂调控关系,而且还表明SBV的非结构蛋白nsP2和衣壳蛋白C可能直接参与这一过程.     

钙对渗透胁迫下玉米幼苗内源激素和多胺含量的影响(简报)

渗透胁迫下,玉米幼苗叶片中内源ABA含量增加,乙烯在较短时间内出现峰值,叶中腐胺（Put）、亚精胺（Spd）和精胺（Spm）先降后升。喷施CaCl2水溶液后叶中ABA增加的起始时间延迟,乙烯释放量减少,Put、Spd、Spm含量均增高。     

大蒜有丝分裂不同时期蛋白质的变化

将细胞的显微分离、微量蛋白电泳和超敏感银染有机结合起来,对显微分离的大蒜根端分生组织间期、前期、中期、后期和末期各１００个细胞进行了蛋白电泳。发现在不同时期,含量较高的蛋白谱带有７条,其中４５ｋＤ和６５ｋＤ的蛋白在间期、前期、中期、后期和末期呈周期性变化     

假丝酵母C-5的不对称生物还原作用研究

生命与手性密切相关,凡涉及到生命现象和生理活性物质几乎都离不开有关分子的空间立体构型问题,不同构型的手性分子具有不同的生理活性。利用酶反应的立体专一性,用生物转化法取代部分传统的化学方法,可以很方便地制备具有所需手性中心的化合物。因此,近年来生物转化...