癌胚抗原蛋白芯片的研发及其在肝癌检测中的评价

目的:研究建立一种简便、快速、特异性高、低成本的检测血清中癌胚抗原(CEA)浓度的蛋白芯片,并通过检测肝细胞肝癌(HCC)对其进行评价。方法:采用双抗体夹心法,制备能够形成捕获抗体-抗原-检测抗体的"三明治"结构的蛋白芯片检测血清中CEA浓度。通过用该蛋白芯片检测50例CEA阳性HCC患者血清和56例健康人血清,对其进行盲法验证。结果:以CEA5 ng/m L为阳性判定标准,得出CEA蛋白芯片的灵敏度为92%(46/50),特异度为100%(56/56)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示该蛋白芯片检测出血清CEA的ROC曲线下面积(AUC)为0.960,与0.5相比差异有统计学意义(P0.001),其判定CEA阳性的准确性较高。结论:成功建立检测血清中CEA浓度的蛋白芯片,为下一步研发多种标志物联合检测HCC的蛋白芯片提供候选血清标志物。     

ICE方案治疗复发难治性非霍奇金弥漫大B细胞淋巴瘤临床观察

目的:观察ICE方案(异环磷酰胺IFO,卡铂CBP,依托泊苷VP-16)治疗复发/难治性非霍奇金弥漫大B细胞淋巴瘤(Non-hodgkin's lymphoma,NHL)的疗效及安全性。方法:20例经系统化疗后复发或进展的非霍奇金弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者,采用ICE方案化疗至少2周期,IFO 5 g/m2,第2天,持续24小时静脉输注,CBP按AUC=5,max 800 mg,第2天,静脉输注,VP-16.100 mg/m2,第1-3天,静脉输注。结果:完全缓解(complete response,CR)5例,部分缓解(partial response,PR)8例,疾病稳定(stable disease,SD)4例,疾病进展(progress disease,PD)3例,总有效率(overall response rate,ORR,CR+PR)65%,化疗副作用主要为骨髓抑制(Ⅰ、Ⅱ度6例,Ⅲ、Ⅳ度14例),其他不良反应包括胃肠道反应、粘膜损伤、肝肾毒性及脱发等均可耐受。结论:ICE方案可用于非霍奇金弥漫大B细胞淋巴瘤的二线化疗方案。     

药用植物长春花WRKY转录因子的鉴定及表达谱分析

WRKY是调控植物生长发育和逆境胁迫反应等生命活动的一个转录因子大家族.然而,有关药用植物长春花CrWRKY转录因子的种类和功能却知之甚少.从26 009个长春花蛋白中鉴定出47个CrWRKY转录因子.依据WRKY结构域和系统进化,将CrWRKY分为G1、G2和G3三大类群.表达谱数据分析表明,长春花CrWRKY基因的表达具有器官特异性.47个CrWRKY基因的表达谱可分为3种表达模式:第1类型主要在花、甲基茉莉酸甲酯(MeJA)或酵母提取物(YE)处理的原生质体中高表达;第2类型主要在茎和毛状根中高表达;第3类型在根、茎、叶、幼苗和MeJA处理的毛状根中高表达.进一步用实时定量PCR检测了16个代表性CrWRKY基因在不同器官、MeJA处理原生质体和毛状根中的表达模式,检测结果与上述数字基因表达谱数据基本一致.约1/3以上CrWRKY基因的表达受MeJA和YE的调控,暗示它们可能参与萜类吲哚生物碱的合成和逆境胁迫反应.为进一步解析长春花WRKY转录因子的功能和萜类吲哚生物碱合成调控的网络奠定了基础.     

软鳍新光唇鱼(Neolissochilus benasi)的人工繁殖与胚胎发育

2009—2011年,使用促黄体素释放激素类似物(LHRH-A2)及马来酸地欧酮(DOM)混合催产剂共催产软鳍新光唇鱼(Neolissochilus benasi)雌鱼60尾及雄鱼100尾,其中,雌鱼成功47尾(78.3%),雄鱼成功92尾(92.0%)。雌鱼产卵量为1 986~5 854粒/尾,卵径为2.2~2.8 mm,平均核偏位率为73.2%。精子密度为(16.32±2.89)×109个/ml,鲜精平均活力为(60.6±3.2)%,平均寿命为(70.2±5.3)s。胚胎发育过程需120 h,分为受精卵期、分裂期、囊胚期、原肠胚期、体节期和孵化期等6个阶段,平均孵化率为32.4%,45日龄仔鱼存活率为86.5%。胚胎发育过程中,畸形部位主要为口部、胸腔、脊索和眼部,且以脊索畸形较为常见,卵黄蘘吸收异常及双头亦为畸形表现形式。在上述数据的基础上,分析了软鳍新光唇鱼畸形的原因,并提出在亲鱼培育过程中应尽量提供适合的养殖条件,最大限度降低捕获诱发的压力,以提高繁殖效率。     

里氏木霉纤维二糖酶bg1Ⅱ基因的cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达

将里氏木霉总RNA反转录得到cDNA第一链，并以之为模板进行RT－PCR合成约1．4kb的纤维二糖酶基因cDNA,将所得的cDNA经测序后克隆到温度敏感型载体pJW2中，经PCR和双酶切鉴定筛出阳性重组子，温度诱导后，经酶活测定，bg1Ⅱ基因在大肠杆菌中得到了表达，酶活为0．75IU／mL。     

水稻细菌性条斑病和抗性育种研究进展

水稻细菌性条斑病(简称细条病)是由Xanthom onas oryzae pv. oryzicola侵染引起的全球性病害,对水稻生产构成严重威胁。发掘和利用新抗源、定位克隆抗性基因及深入了解病原菌—水稻之间的相互作用机理等对于水稻抗细条病研究有重要意义。本文主要介绍了细条病的抗性鉴定与抗源筛选、抗性基因遗传分析与分子标记定位、抗性基因的克隆、抗性育种的研究现状,提出了加快抗细条病育种研究进程的建议。     

西藏鳞姚亚属二新种记述（弹尾目，鳞姚科）

记述采自西藏地区的弹尾目Collembola鳞姚科Tomoceridae鳞姚亚属Tomocerus（Tomocerus）2新种：黑带鳞姚Tomocerus（Tomocerus）nigrofasciatus sp．nov．（西藏：洛扎生格）和背崩鳞姚Tomocerus（Tomocerus）baibungensis sp．nov．（西藏：墨脱背崩）,给出鉴别特征图以及在西藏地区的种检索表。新种模式标本保存在中国科学院动物研究所。     

纳米金标记核酸探针检测小反刍兽疫 病毒核酸的研究

试验旨在探讨利用纳米金标记寡核苷酸探针快速检测小反刍兽疫病毒核酸的方法。针对小反刍兽疫病毒N基因的高度保守区设计两条特异寡核苷酸探针,一条探针5’端修饰生物素,另一条探针3’端修饰巯基。巯基化的探针通过Au-S键连接到纳米金颗粒上。靶核酸两端分别与两条探针结合,形成"生物素化探针-靶核酸-纳米金探针"复合物,该复合物通过生物素-亲和素系统,固定在固相载体上,最后银染放大信号。通过肉眼观察法、光镜观察法、分光光度法分析银染灰度,从而间接测定靶核酸的量。初步检测PPRV核酸最低浓度达10fmol/L,所需时间约为1.5h。该方法灵敏度高、操作简单,为临床检测小反刍兽疫病毒核酸提供实验数据和技术支持。     

评价清醒大鼠内脏痛觉敏感性的方法

目的：寻找一种有效而客观的评价清醒大鼠内脏痛觉敏感性的方法。方法：分别通过腹壁撤退反射评分测定,非埋电极和预埋电极法测腹外斜肌对结直肠扩张刺激的放电反应,来评价清醒雌、雄模型大鼠对不同压力的结直肠扩张刺激的反应差别。结果：腹壁撤退反射评分与非埋电极方法测腹外斜肌放电,模型组雌鼠的反应高于雄鼠,但差异无显著性意义。预埋电极方法测得模型组雌鼠腹外斜肌放电高于模型组雄鼠。结论：预埋电极测腹肌放电是一种评价清醒大鼠内脏痛觉敏化的较好方法。     

贝飞达对原发性胆汁性肝硬化患者细胞因子的影响

目的探讨微生态调节剂对原发性胆汁性肝硬化（PBC）的影响。方法34例PBC患者为我院住院患者,均有肝功能异常,随机分为2组,一组为常规治疗组,给予糖皮质激素类、熊去氧胆酸及其他免疫抑制／增强剂药物治疗,另一组为贝飞达治疗组,在常规治疗基础上加用贝飞达。经过1个月的治疗,采血检测细胞因子及肝功能,对结果进行统计学处理。结果贝飞达治疗组同常规治疗组进行比较,在降低细胞因子水平改善肝功能方面差异有显著性。结论贝飞达通过调整肠道菌群,控制内毒素血症,可以调整原发性胆汁性肝硬化患者的免疫功能,改善肝功能。