利用卵胞浆精子注射（ICSI）技术生产转基因小鼠

在掌握小鼠ICSI技术的基础上,进行了ICSI技术生产转基因小鼠的研究。来自成年KM小鼠附睾尾的精子,使用未加抗冻剂的HEPES-CZB溶液,在液氮中冻融1次后,用于本实验。解冻精子与DNA混匀1min后,精子头被显微注射到B6D2F1小鼠成熟卵母细胞质中。精子头与pEGFP-N1环状DNA共注射生产的ICSI受精卵,在CZB溶液中培养至囊胚期时,39.1%(9/23)的囊胚表达GFP基因。精子注射后6h,直接移植ICSI受精卵后,7只妊娠受体一共产仔30只,效率为23.8%(30/126)。Southernblot分析其中16只小鼠发现,3只(18.8%)转基因小鼠同时整合了GFP和Neomycin基因,它们全部来自精子和线性DNA混合的实验组(阳性效率为33.3%,3/9),相反,精子与环状质粒DNA共注射生产的7只ICSI后代中,没有检测到外源基因。转基因小鼠整合的外源基因能够传递给它们后代。结果说明,利用ICSI技术可以高效地生产转基因小鼠,宿主基因组可能更容易整合线性化的外源基因。     

山羊基因组研究进展

山羊基因组是山羊品种资源保护和利用的研究依据,对培育和改良山羊品种具有重要意义。目前,随着山羊参考基因组的不断完善,在山羊起源、进化和适应性等方面的研究取得了诸多重要成果。本文详细综述了山羊基因组研究进展,主要包括山羊基因组结构、山羊基因组图谱(遗传图谱、物理图谱和比较图谱)、山羊高通量测序和山羊SNP芯片的开发及利用,以期为开展山羊基因组选择(genome selection, GS)奠定理论基础。     

大肠杆菌pheA基因在黄色短杆菌中的克隆与表达

在大肠杆菌中,影响苯丙氨酸生物合成的关键酶基因之一是ｐｈｅＡ基因。利用大肠杆菌棒状杆菌穿梭表达载体Ｐｌｃｘ３６克隆了一个对反馈抑制不敏感的大肠杆菌基因ｐｈｅＡ,组建成质粒Ｐｌｃｘ３７。Ｐｌｃｘ３７以接合转移方法转移到抗氟代苯丙氨酸的黄色短杆菌３６２１等菌株中,获得若干基因工程菌株。经发酵测定,编号为３６２１０９的黄色短杆菌的苯丙氨酸产量比出发菌３６２１高出１倍。最高达２６.２６ｍｇ／ｍｌ。     

苹果园植被多样化在果树害虫持续治理中的作用

1992-1995年对四个不同类型苹果园进行了系统调查,结果表明引入夏至草、泥胡菜等有益杂草并与树行间种植的紫花苜蓿搭配的生草园,捕食性天敌发生量大,种群稳定,发生高峰期较免耕园、清耕园提前7d左右;害虫发生量低,种群数量变化平稳,无突增现象,生草园在未施用任何杀虫、杀螨剂的情况下,树冠上蚜虫、叶螨和潜叶蛾的平均虫口密度均低于免耕园、清耕稀植园和密植园。生草园寄生性天敌的数量亦明显增加,金纹细蛾的寄生率高达62.7%,分别是免耕园、清耕稀植和密植园的1.34倍、16.9倍和17.9倍。果园植被多样化可使地面植被上的天敌数量逐年成倍提高,生草第3年捕食性天敌的数量是生草当年的12.5倍,树冠上天敌量亦明显增加,益害比大大提高,生草第2年树冠上最大蝽螨比为1∶14.4,与原先油菜与紫花苜蓿搭配生草5年的效果相近。除当年生草果园(1992年)早期施用1次杀螨剂—螨克外,1993、1994年均未施用任何杀虫、杀螨剂,通过天敌的自然控制作用,有效地控制果树害螨、蚜虫和金纹细蛾等次生性害虫的为害。     

菌物在森林生态系统中的功能和作用研究进展

 综述了菌物在森林生态系统中的功能和作用方面的研究进展,表明菌物是森林生态系统中不可忽视的重要组成部分,对森林生态系统的建立、演替、稳定、物质循环和能量流动等都具有重要的影响。菌物与植物的共生是植物起源和森林形成的基础,而且是森林健康发展的关键;菌物在森林中的分解作用和对土壤母岩的风化作用是生物地球化学循环的重要环节,且菌体本身是森林中的主要碳、氮汇成员;菌物多样性是森林物种多样性和生态稳定的决定因素之一,其多样性的丧失可以直接影响森林的生态系统乃至加剧地球的大气温室效应。菌物在我国森林保护和可持续发展以及生态环境建设上具有重要的位置。     

红系细胞中Cre重组酶介导的位点特异性片段交换

Cre介导的片段交换技术利用重组酶Cre的位点特异性重组特性 ,在基因组的特定位点进行靶片段与目的片段的交换。运用互为反向的Lox位点 ,在鼠红白血病MEL细胞中进行靶载体的整合和交换载体的交换 ,探讨在特定的染色质环境下红系特异性顺式作用元件的功能。电穿孔转染MEL细胞后从含有潮霉素 (hygromycin)的选择性半固体培养基中挑取MEL细胞单克隆 ,通过PCR和Southern杂交鉴定整合完整性和拷贝数 ,获得三种整合有靶载体p1L HyTk L1 β EGFP neo的细胞株A ,B和D。交换载体pL1 HS2 1L(含有 732 bp的人β 珠蛋白基因簇 5′DNaseI高敏位点 2核心片段 )和Cre表达载体pBS185共转染细胞株A ,9 (1,3 二羟 2丙氧甲基 )鸟嘌呤 (gancyclovir)负筛选后挑取单细胞克隆A HS。PCR检测显示HS2片段以反方向进行了交换。流式细胞仪分析显示平均的荧光细胞百分比 (2 .4 2 % )低于未交换的细胞株A (35 .94 % )。A HS中EGFP的低表达可能是处于非容许方向的HS2片段出现方向依赖性基因沉默所致。     

染料生物降解及其基因工程菌研究进展

染料降解基因工程菌的构建是染料生物降解研究的重要任务之一,它可以高效地除去废水中的常规生物难降解染料。文中综述了构建染料降解基因工程菌的基础研究进展,主要包括:染料降解菌的筛选、降解特性及酶系的研究、降解性质粒特性及基因定位的研究等等。     

一种新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究——Ⅱ.病原菌的鉴定

对从狐狸流产胎儿和阴道分泌物中分离得到的16株菌进行了细胞形态、细胞壁显微结构的观察和生化、对人血红细胞具溶血性、DNA的G+C含量等测定。根据它们细胞呈革兰氏阳性到可变,形态从球杆到杆状的多形态性,接触酶和氧化酶均阴性,葡萄糖的O/F测定为发酵产酸,主要产物有乙酸和乳酸等主要产物,归为阴道加德纳氏菌,但由于它们对营养要求不苛求,生长速度快和对氧要求低等,又不同于人体来源的加德纳氏菌。因此,将这群菌另定为一个亚种——阴道加德纳氏菌狐狸亚种(Gardnerella vaginalis subsp.fox)。模式株为U80。     

四川淫羊藿属一新种

四川淫羊藿属一新种严克俭（广西中医药研究所,南宁５３００２２）关键词少花淫羊藿ＡＮＥＷＳＰＥＣＩＥＳＯＦＥＰＩＭＥＤＩＵＭＦＲＯＭＳＩＣＨＵＡＮ￥ＹｅｎＫｅｃｈｉｅｎ（ＧｕａｎｇｘｉＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＭｅｄｉｃａｌ＆Ｐｈａｒ...