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人血管能抑素基因的克隆、表达及其表达产物的纯化和生物活性测定 总被引:5,自引:0,他引:5
以人胎盘脐带组织为材料,提取组织总RNA,用netRTPCR方法合成人血管能抑素cDNA基因,将该cDNA克隆进pSP72载体获得重组质粒pSP72C, DNA序列分析结果与预期序列一致。用BamHⅠ和NdeⅠ双酶切,切下pSP72C上的血管能抑素cDNA,插入pET3c载体的相应位点获得重组表达质粒pETC, 转化E. coli BL21(DE3), SDSPAGE分析显示:在IPTG诱导下,血管能抑素基因获得了高效表达,表达量约占菌体总蛋白的 27.9 %,主要以包涵体形式存在。包涵体经过洗涤、裂解、蛋白复性以及Sephadex G75凝胶过滤层析等步骤后,获得了纯度达91.4 %的人血管能抑素。CAM实验证明10 μg纯化蛋白就能显著抑制鸡胚新生血管生成。 相似文献
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类胡萝卜素合成的相关基因及其基因工程 总被引:43,自引:0,他引:43
类胡萝卜素具有多种生物功能,尤其在保护人类健康方面起着重要的作用,如它们是合成维生素A的前体,能够增强人体免疫力和具有防癌抗癌的功效。人体自身不能合成类胡萝卜素,必须通过外界摄入;但类胡萝卜素在许多植物中含量较低,并且很难用化学方法合成。随着类胡萝卜素生物合成途径的阐明及其相关基因的克隆,运用基因工程手段调控类胡萝卜素的生物合成已成为可能。本文综述了微生物和高等植物类胡萝卜素生物合成途径中相关基因的克隆,以及运用这些基因通过异源微生物生产类胡萝卜素和提高作物类胡萝卜素含量的基因工程研究进展。 相似文献
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人血管能抑素基因N端片段的表达、纯化及其生物活性测定 总被引:9,自引:0,他引:9
以中国人胎盘脐带组织为材料 ,提取组织总RNA ,用RT PCR方法合成人血管能抑素cDNA ,将该cD NA克隆进 pSP72载体获得重组质粒 pSP72C。以pSP72C为模板 ,PCR方法合成编码血管能抑素N端 189aa的基因片段 ,将其克隆进pET 3c载体获得重组表达质粒 pET CN ,转化E .coliBL2 1(DE3) ,SDS PAGE分析显示 ,在IPTG诱导下 ,人血管能抑素N端基因片段获得了有效表达 ,表达量约占菌体总蛋白质的 35 .3% ,主要以包涵体形式存在。包涵体经过洗涤、裂解、蛋白质复性以及SephadexG 10 0凝胶过滤层析等步骤纯化后 ,获得了纯度约92 .6 %的人血管能抑素N端片段 ,CAM实验证明具有显著抑制鸡胚新生血管生成活性。 相似文献
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桃果实絮败与果胶质变化和细胞壁结构的关系 总被引:28,自引:0,他引:28
“白凤”桃果实在0℃下贮藏20d以后出现肉质发棉和干化的絮败现象。冷藏第10天在18℃下加温38h能有效减缓絮败的发生。连续冷藏10d以后,原果胶含量开始增多,水溶性果胶含量变化不大。中途加温的果实原果胶含量变化不多,但水溶性果胶却不断增加。絮败果的果胶质粘度明显高于正常果。果肉出汁率是测定果实絮败程度的理想指标,絮败果肉细胞壁的明显特征是:伴随胞间层的分解和胞间隙的扩大,出现大量凝胶状物质的沉积 相似文献
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植物类胡萝卜素的生物合成及其调控1 总被引:22,自引:0,他引:22
阐述植物类胡萝卜素的生物合成途径和影响植物类胡萝卜素生物合成的因素,重点介绍该途径中的主要酶及其基因研究的进展。 相似文献
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随着人生步入老年 头发逐渐白了 脸上皱纹增加了 眼花了 耳聋了 谁都会说 这就是衰老了。可是要给衰老下一个确切的定义 却不是那么容易。 日前看到D.Harman在一次国际学术会议上做的"衰老:现象和理论"的报告中 讲述了衰老的定义 今引述于下 供参考。 衰老是使死亡危险增加的各种各样的不良变化的累积。这些衰老变化导致两种情况:一是随着生命早期后年龄增长普遍见到的连续性变化;二是与此关连的疾病与死亡机率的进行性增加。衰老变化可以归因于发育遗传缺陷环境病症 以及生而有之的因素即衰老过 《生命的化学》2000,20(6):282
随着人生步入老年,头发逐渐白了,脸上皱纹增加了,眼花了,耳聋了,谁都会说,这就是衰老了。可是要给衰老下一个确切的定义,却不是那么容易。 日前看到D.Harman在一次国际学术会议上做的"衰老:现象和理论"的报告中,讲述了衰老的定义,今引述于下,供参考。 衰老是使死亡危险增加的各种各样的不良变化的累积。这些衰老变化导致两种情况:一是随着生命早期后年龄增长普遍见到的连续性变化;二是与此关连的疾病与死亡机率的进行性增加。衰老变化可以归因于发育、遗传缺陷、环境、病症,以及生而有之的因素即衰老过程,这些方面可能不是互不相关的。 很容易从生命统计数据中得到群体某一年龄个体的死亡机率,可量度该年龄(指生理年龄)人群衰老变化的累积平均数。同时该年龄死亡机率随时间而变化的速度也可量度衰老的平均速度。 群体的死亡机率决定了出生时的平均预期寿命(average life expectancy at birth,ALE-B)。ALE-B是健康、有作为生命时段,即功能性生命时段的粗略量度。 (雨京) 相似文献
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