微生物多样性的研究方法概况

介绍了进行微生物多样性研究多种方法,将其简要划分为三大部分：1．经典纯培养技术的改进方法;2．现代分子生物学技术;3．上述两种方法的联合使用;并重点阐述了这些方法的优缺点,展望了微生物多样性研究方法的发展前景。     

用改进的差别显示法克隆R6大鼠细胞的癌相关基因

为了识别参与细胞癌变的基因,本文选择p53135-val-过表达正常细胞系R6#13-8及其自发转化癌变细胞系T2作为研究材料,在克隆差异表达基因的同时,建立了一种简单、快速的差异表达基因分离的方法,并已克隆到2个与细胞癌变相关的候选新基因。本文所得的实验结果表明这种方法实验步骤简单,避免使用同位素,RT-PCR扩增带的重复性好,能克隆到大于500bp的差异表达cDNA片段,差异表达的PCRcDNA片段假阳性率低,并可广泛适用于在两个或两个以上相对应真核细胞RNA群体中分离和克隆特异表达基因。研究结果还提示在R6#13-8自发转化为T2的过程中涉及多个基因的激活与失活,这两个细胞系之间存在明显的基因表达差异。     

阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征与代谢综合征组分关系探讨

目的：探讨阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）与代谢综合征（MS）组分关系。方法：对我院2003年1月至2010年7月39例诊断为0SAHS住院患者进行回顾性调查,30例同期住院病人为对照组,均记录年龄、性别,测量身高、体重、血压,检测空腹血糖、血脂,分析OSAHS患者合并MS组分情况。结果：1．OSAHS组与对照组比较,体重指数（BMI）、血压、血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白Al升高,高密度脂蛋白胆固醇降低（P〈0．05）;2．OSAHS组与对照组相比较,无MS组分比例低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;3．OSAHS组与对照组相比较,OSAHS组合并MS组分,包括BMI〉25Kg／m2,血脂紊乱的比例,均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：OSAHS患者易合并代谢综合征组分。     

运用激光扫描共聚焦显微技术研究大草履虫口胞器与消化胞器

本文利用激光扫描共聚焦显微技术(Laserscanningconfocalmicroscopy,LSCM)对大草履虫(Parameciumcaudatum)口胞器及消化胞器进行了再观察,通过连续断层扫描和三维重建技术,清晰地显示出草履虫口胞器中前庭、口腔、内口膜、四分膜、背咽膜、腹咽膜等结构,它们的位置和形态与前人的工作结果基本一致,并给出口胞器结构的三维立体构象。观察了虫体内的食物泡及其形成过程。看到胞咽在摄食并形成食物泡时其直径变大的现象,表明Allen(1974)有关消化后期食物泡产生的微小泡回到胞咽处与胞咽膜融合的时间应该是在胞咽直径扩大时,此时微小泡参与到胞咽膜上,进而再参与到新食物泡膜的形成过程中,由此完成膜的循环再利用。在样品制备中采用KMnO4替代了免疫荧光技术中传统的固定剂,固定效果很好,清楚地显示了胞咽膜、纤毛以及食物泡膜的结构     

肿瘤干细胞起源及其生物学特性

肿瘤干细胞与正常成体干细胞在自我更新与增殖分化能力、表型标记和强耐药性等诸多方面存在着相类似的生物学特征,所以肿瘤干细胞被推测为肿瘤发生的细胞起源。基于肿瘤干细胞与正常干细胞之间的相似性质和肿瘤发生的分子机制,科学家建立了一系列从肿瘤组织或肿瘤细胞系分离肿瘤干细胞的实验方法和研究肿瘤干细胞起源的动物实验模型。现就目前在肿瘤干细胞起源和生物学特性领域的研究作概括阐述。     

淡紫拟青霉所致皮肤及皮下感染:临床和实验研究

目的 报道国内首见淡紫拟青霉所致皮肤及皮下感染患者1例。方法 取患者皮损标本多次直接镜检,真菌培养,根据真菌培养的菌落特点和镜下形态、扫描电镜及DNA序列测定鉴定致病菌种,并对分离的致病菌进行体外药敏试验。结果 患者为6个月患儿,出生12d时面部出现粟粒大暗红丘疹,脓疱,并缓慢扩大。刮取脓疱直接镜检见无色细长分支菌丝。多次培养见灰紫色羊毛状菌落生长,光镜及电镜下可见无色细长分支、分隔菌丝、直立的分生孢子梗、顶端单轮生帚状支及大量柱状或分散柱状排列椭圆形、近球形小分生孢子。根据其菌落颜色及瓶梗形态等形态学特征鉴定为淡紫拟青霉,其rRNA基因DNA测序分析证实其表型分类。动物实验证实该菌的致病性,组织相中胶质性损害为其主要病理特征。体外药敏试验提示其对特比萘芬、酮康唑较敏感,对伊曲康唑、氟康唑敏感陛较差。结论 该病例被确定为淡紫拟青霉所致的皮肤及皮下感染,为国内首例。     

错误信念推理的时间过程与源定位

理解他人心理并进行人际互动是人类交往的认知基础,人所持有的信念直接决定着个体的心理活动．为了研究推测他人信念的认知神经机制,记录并分析了14名健康成人执行“欺骗外表”任务时的32导脑电数据．错误信念与正确信念问题呈现后,均在头皮中前部诱发了N100,P200和晚期负成分（LNC）．LNC从400ms左右开始,一直持续到1200ms结束．在400～800ms,错误信念LNC显著低于正确信念．对错误信念减正确信念所得差异波进行源分析,发现偶极子定位于扣带回中部皮层．这些发现表明,错误信念推理中可能包含了抑制加工．     

利用代谢工程构建D-甘露醇生产菌株

D-甘露醇广泛应用于食品、制药、化学品工业等领域。从野生型大肠杆菌出发,将来自假肠膜明串珠菌Leuconostoc pseudomesenteroides ATCC 12291菌株的甘露醇脱氢酶与果糖转运蛋白编码基因整合到大肠杆菌ATCC 8739的染色体中,并失活其他的发酵途径 (丙酮酸甲酸裂解酶、乳酸脱氢酶、富马酸还原酶、乙醇脱氢酶、甲基乙二醛合成酶和丙酮酸氧化酶) ,构建了一株遗传稳定的D-甘露醇生产菌株。使用无机盐培养基和葡萄糖果糖作为混合碳源,厌氧发酵6 d,D-甘露醇产量达1.2 mmol/L。基于细胞生长和D-甘露醇合成的偶联,进一步通过代谢进化技术提高细胞合成D-甘露醇的生产能力。经过80代的驯化,D-甘露醇产量提高了2.6倍,甘露醇脱氢酶的活性提高了2.8倍。构建获得的遗传稳定的工程菌能直接发酵糖生产D-甘露醇,不需添加抗生素、诱导剂和甲酸,在工业化生产时有一定优势。     

冷应激小鼠十二指肠5-羟色胺免疫活性细胞的免疫组织化学研究(英文)

采用ABC(avidin-biotin-peroxidase complex)免疫组织化学方法,观察冷应激小鼠十二指肠内5-羟色胺免疫反应阳性(5-HTIR)细胞的形态、分布位置及数量。结果显示:冷应激小鼠十二指肠内5-HTIR细胞主要分布于肠上皮细胞间,细胞形态多样,除圆形和锥形外,还具有条形和梭形。冷应激小鼠十二指肠内5-HTIR细胞数量(3.83±1.29)与对照组小鼠十二指肠内5-HTIR细胞数量(2.37±1.10)有显著差异(P=0.000)。分析表明,冷应激对小鼠十二指肠5-HTIR细胞的分布具有一定影响。