单增李斯特菌毒力因子溶血素关键氨基酸位点在感染过程中的作用研究

【目的】探究单增李斯特菌溶血素O (listeriolysin O, LLO)中D3区域β8折叠片上第253位氨基酸(谷氨酰胺,Q)和第254位氨基酸(异亮氨酸,I)对单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)感染生物学功能的影响。【方法】构建LLO_Q253A和LLO_I254A突变蛋白的原核表达菌株,以及利用同源重组方法构建hly_Q253A和hly_I254A突变株;通过表达纯化突变蛋白,测定溶血活性;比较LLO第253位Q和第254位I均突变成丙氨酸(A)后,对细菌体外生长能力、黏附侵袭、胞内迁移和增殖能力的影响。【结果】相应位点突变后,LLO蛋白均能够正常表达。在pH 6.5条件下,所有突变蛋白和突变株的溶血活性丧失。然而,在pH 5.5条件下,LLO_I254A和hly_I254A恢复了溶血活性。与野生株相比,突变株的体外生长、黏附能力和胞内增殖能力均无明显差异;突变株的侵袭能力和胞间迁移能力显著低于野生株。【结论】本研究证实第253位Q和第254位I均突变成A后,单增李斯特菌在pH 6.5条件下丧失溶血活性,并降低了感染宿主细胞的能力,但具体机制还有待进一步探索。本研究为深入探究LLO结构对单增李斯特菌生物学功能的影响奠定基础,对单增李斯特菌点突变株的构建具有一定参考意义。     

驯化栽培与加工 黄花菜野生引为家种及采集加工

黄花菜,又名金针花,有些地方称为萱草,是多年生宿根草本植物。它是黄花菜的花朵,经过蒸制加工成干菜食品。其含有多种维生素和糖分营,养价值很高,一向被誉为是干菜中的尚品。通常用作各种菜肴或面点的佐料,滋味清甜,且有特殊香味。我国民间常把黄花菜作为哺乳妇女的发奶特效药膳。黄花菜的根,含有冬门素、秋水仙碱和萱草根素等,具有清热、镇痛、利尿、消肿等作用;其叶和箭秆,还可作为引火燃料,几乎全身是宝。     

天然C20二萜生物碱

本文概述了C_(20)。二萜生物碱的化学结构类型,在植物界的分布和它们的光谱特征,并将迄今已知的这类生物碱及其植物来源列表于后。     

确定性筛选设计优化双特异性抗体细胞培养工艺

[目的]旨在快速优化双特异性抗体细胞培养工艺参数,提高蛋白表达量,改善产品关键质量属性.[方法]应用确定性筛选实验设计研究工艺参数(接种密度、培养温度和流加策略)对细胞生长、蛋白表达及关键质量属性(电荷异质性、聚体和高甘露糖型)的影响,利用一步法找出最佳工艺条件,然后放大至2L生物反应器进行工艺验证.[结果]应用JMP...     

一个新的葡萄糖淀粉酶基因在大肠杆菌中的分泌表达

从天然的少根根霉的基因组中,克隆出一个新的葡萄糖淀粉酶基因。对其进行分子进化的研究,在大肠杆菌中表达,从而给实验带来很大方便。设计引物将其(Gene Bank登录号:DQ903853)克隆到pET-22b( )载体上,转化大肠杆菌BL-21(DE3)表达。检测培养液的上清有较高的葡萄糖淀粉酶活性,在淀粉板上有明显的晕圈显现。     

延髓腹外侧区在降压反射中的作用

在各种心血管反射中,降压反射是最主要的,延髓腹外侧区在降压反射中起重要作用。目前认为降压反射中枢通路中至少有四种成分是最基本的：（１）孤束核中的神经元;（２）延髓腹外侧头端的交感前运动细胞;（３）延髓腹外侧尾端;（４）疑核或和迷走神经背运动核。此外,兴奋性与抑制性氨基酸受体和抑制性神经元也是中枢通路的关键成分。下丘脑视上核与室旁核的升压素分泌细胞也有一定作用     

成都动物园

成都动物园是1953年新建的一个以饲养动物为主要内容的公园。它的位置在成都新四门外的百花潭侧,园的北面紧靠着岷江,一座具有独特风格的木船浮桥通进了该园的正门(图1)。景物佳致引人入胜,特别是在夏末秋初雨季之中,江内波浪起伏,岸上丛竹婆娑,当人们进入园内听到宏亮的兽吼和悦耳的鸟鸣时使人会感到大自然的格外优美。在成都动物园内可以看到我们祖国     

土施L-蛋氨酸、L-苯基丙氨酸、L-色氨酸对玉米生长和养分吸收的影响

通过盆栽试验,研究了3种植物生长调节剂前体物质对玉米生长发育和养分吸收的影响,并确定了其适宜用量.结果表明,土施L蛋氨酸(L-MET)、L-苯基丙氨酸(L-PHE)和L-色氨酸(L-TRP)能不同程度地增加玉米株高、地上部和地下部干重,提高玉米根系活力、体内硝酸还原酶和过氧化氢酶的活性,促进玉米对氮、磷、钾、锌养分的吸收.在所有供试浓度中,以土施L-MET0.0185～0.185mg·kg^-1、L-PHE0.2mg·kg^-1和L-TRP0.03～0.3mg·kg^-1效果最佳,而且L-PHE和L-TRP对玉米生长的促进作用和提高养分的吸收能力均优于L-MET.     

柑橘全爪螨酚氧化酶原激活酶基因cDNA克隆及生物信息学分析

酚氧化酶原激活酶(prophenoloxidase activating enzyme,PPAE)是酚氧化酶激活系统(prophenoloxidase activating system,PPO-AS)的组成部分,是无脊椎动物抵御入侵微生物的关键酶。本研究利用RACE技术从柑橘全爪螨Panonychus citri(McGergor)体内获得一条PPAE基因全长cDNA,命名为PcPPAE(GenBank:KC136292),属于丝氨酸蛋白酶家族。该基因cDNA全长1 676 bp,开放阅读框1 377 bp,编码458个氨基酸。该基因编码蛋白预测分子量为49.9 ku,理论等电点(pI值)为5.68,分子式为C2201H3467N607O678S22,不稳定系数为41.51,总亲水性系数为-0.268。经序列比对发现该基因具有发夹结构域,丝氨酸蛋白酶结构域,以及丝氨酸蛋白酶结构域中保守的催化三联体。系统发育分析表明该基因与二斑叶螨发夹结构丝氨酸蛋白酶基因的亲缘关系最近。本研究首次从柑橘全爪螨体内克隆获得酚氧化酶原激活酶,为后期进行柑橘全爪螨抵御微生物侵染机制研究奠定了基础。     

诺如病毒感染模型的研究进展

诺如病毒(noroviruses, NoVs)为单股正链RNA病毒,属于杯状病毒科(Caliciviridae)诺如病毒属(Norovirus),是引起人类非细菌性急性胃肠炎的主要病原体。每年约有1亿人由于NoVs感染而发病,儿童、老年人以及免疫功能异常者均为易感人群,可导致患者产生腹泻、呕吐等症状,严重者甚至死亡。由于NoVs的快速变异,无法在体外培养人诺如病毒及缺乏用于口腔感染的小动物模型,这就限制了对NoVs生物学特性的进一步研究。现就NoVs的病原学、病毒受体、细胞模型、动物模型等的研究作一概述。