乙型脑炎病毒NS2A-C60A位点突变对其生物学特性影响研究*

目的:旨在探索Ⅰ型日本乙型脑炎病毒传代致弱后基因组突变NS2A-C60A对乙脑病毒生物学特性的影响。方法:首先通过对传代致弱及原始乙脑毒株基因组序列进行测序比对、结构预测分析并利用Western blotting(WB)确定了目标研究位点NS2A-C60A;然后使用反向遗传定点突变技术构建拯救了包含NS2A-C60A单点突变的病毒株;最后利用噬斑形态观察、生长曲线、双萤光素酶分析,WB以及炎性因子检测和动物实验研究了该单点突变对于乙脑病毒生物学特性的影响。结果:首次研究发现Ⅰ型乙脑病毒传代致弱会导致NS1'蛋白表达的显著下降以及可能的相关位点NS2A-C60A,并成功拯救获得了NS2A-C60A单点突变毒株rJEV-C60A,研究发现NS2A-C60A突变对乙脑病毒的生长特性及噬斑形成没有显著影响,但是能够显著降低乙脑病毒NS1'蛋白的表达,并且该位点突变能够轻微阻碍乙脑病毒对细胞炎性因子表达的抑制,动物实验结果显示NS2A-C60A点突变病毒与原毒株具有相似的神经毒力,说明该位点突变不是影响乙脑病毒毒力致弱的关键位点。结论:新发现的NS2A-C60A位点突变能够显著减少乙脑病毒NS1'蛋白的表达,但是对其增殖、诱导炎症及神经毒力等生物学特性没有显著影响。     

一种固定化酶的新载体——对氨基苯砜乙基(ABSE-)交联琼脂

1.8%琼脂经环氧氯丙烷交联后,在碱性条件下与对β-硫酸酯乙砜基苯胺(SESA)反应制得了对氨基苯磺酰乙基-(ABSE)-交联琼脂。醚化反应最适pH是10。控制SESA加入量制得含有107～1216微克分子苯胺基/克干重琼脂载体。2.ABSE-交联琼脂经重氮化后可在pH6.4～8.0偶联核酸酶P_1,每克琼脂可结合105～120毫克核酸酶P_1,固定化酶活力为4280单位/克干重固定化酶。活力回收可达18～35%。3.偶联时硫酸铵的存在可稍微提高固定化核酸酶P_1的活力,但其稳定性却比对照的差。4.载体上苯胺基含量过多会不利于所固定化的酶显示活力,用α-萘酚封闭残留的苯胺基,可以明显增加固定化酶的稳定性。     

放射对流免疫电泳自显影术测定血清甲种胎儿蛋白

本文介绍放射对流免疫电泳自显影术测定甲种胎儿蛋白(简称AFP)。此方法具有快速、敏感、简易等特点,是一种比较适合农村的放射免疫测定方法。它的检测范围在25毫微克-25微克/毫升之间, ~(131)I-AFP的有效使用期限较长。用此方法进行普查得到了较为满意的结果。对偶尔发生的非特异性反应,可用放射免疫双向扩散自显影术鉴别。近年来,放射免疫测定血清甲种胎儿蛋白已在临床上广泛应用。饱和分析和放射对流免疫电泳定量法,虽可精确定量10毫微克/毫升左右,但操作过程较长,需要计数仪。为了更好地落实毛主席“把医疗卫生工作的重点放到农村去”的伟大号召,简化放射免疫测定是必要的。标记抗原参人火箭电泳自显影法(简称放射火箭自显影)的建立和应用,为普及放射免疫测定AFP开创了新的途径,但建立多种敏感度高、特异性强、并适合于普查用的放射免疫测定法,仍是临床和研究的需要。本文介绍的放射对流免疫电泳自显影术(简称放射对流自显影),可能成为简单、易行,便于普及的放射免疫测定方法之一。     

琼脂糖的制备、鉴定及应用——对流免疫电泳检测肝炎相关抗原和甲胎蛋白灵敏度的观察

琼脂糖是由D-半乳糖和3,6-脱水-L-半乳糖相间结合的链状多糖,存在于多种海藻的琼脂胶质中,应不含硫和灰分,可作为电泳支持物和亲和层析载体。琼脂中另一主要组成成分是果胶,含硫和羧基。如琼脂糖中含有较多的果胶,作电泳支持物使用时,电渗较大;用于亲和层析,非特异性吸附蛋白质能力较强,均影响分离效果。1971年S.Hjerten曾将每克琼脂干粉以150毫升pH6.8,0.03M磷酸缓冲液抽提,每天更换一次缓冲液,共抽四天,可得到含硫量0.25％的产物。进一步用DEAE-Sephadex A-50(每克     

陆地棉丰产性状的遗传力和遗传进度的估测

早熟、丰产、优质、抗病是当前我国棉花育种的主要目标。为了加速我国棉花育种工作的发展,多快好省地培育棉花新品种,必需以阶级斗争为纲,坚持党的基本路线,在华主席和党中央的统一领导下,充分发动群众,研究棉花的早熟、丰产、优质、抗病等项经济性状的遗传规律,把育种工作置于更有科学预见性的基础之上。关于陆地棉的纤维长度、早熟性的遗传力,我们曾做过一些初步估计,本文拟对陆地棉丰产性状的遗传力和遗传进度再进行一些初步估测。     

日本青萍6746的光周期诱导试验

目前,植物生理学关于成花生理这一章,大多数的教科书或实验指导中,光周期诱导实验多采用菊花或苍耳作材料。但是由于这些植物植株大,占地面积大,培养需要的时间长,在管理上存在一定的困难。很多学校由于人力、物力及时间的限制,放弃了这个实验,造成了这部分教学实验中的空白。为此,我们从日本引进了一种短日照植物——青萍6746(Lemna paucicostata 6746),又名微浮萍     

牙齿的结构、发育和卫生

牙齿不但是重要的咀嚼器官,而且与发音、语言以及保持面部正常形态都有密切关系。人一生中有两副牙齿,乳牙和恒牙。在面部的正中作一垂线,此中线正好把牙齿分成左右对称各半。乳牙共20个,上下颌上,中线左右各5个(图1)。恒牙共32个,上下颌左右各8个(图2),但不少人会发生第三磨牙的先天性缺失。牙齿都生长在上下颌的牙槽骨内,连续排列成弓形,称牙弓或牙列。     

红玉色素及其产生菌的研究I．红玉色链霉菌新种

自我国云南省景洪镇附近的土壤中,分离出一株产生红玉色素的链霉菌JH-2710。该菌株为好气中温菌,28℃生长良好,35℃生长差,37℃不生长。孢子丝柔曲至不规则松敞螺旋形,孢子椭圆,表面光滑或略粗糙。菌丝时常膨大,有较密的横隔,以致形成直径1．2--3．2μm的结肠状或水葫芦状节段,但不断裂。细胞壁含LL一二氨基庚二酸、甘氨酸和天门冬氨酸。全细胞水解物含半乳糖、葡萄糖、甘露糖、马杜拉糖、核糖、鼠李糖,以及少量的阿拉伯糖、木糖。     

商陆细胞培养生产甜菜苷的研究——高含量细胞株的细胞团块筛选法

商陆(Phytolacca acinosa)体内特别是果实中含有紫红色色素——甜菜苷,可用于食物着色和制造化妆品。利用培养细胞生产天然色素已成为细胞工程领域一项重要的研究内容。在一般情况下,培养细胞内的目的产物比原植物中的含量低。本文主要报道商陆培养细胞中甜菜苷色素合成的诱导和高含量细胞株的细胞团块筛选法。经培养基筛选试验,建立了适合于商陆细胞生长与甜菜苷色素合成的二步培养系统。采用 MS 基本培养基添加 1mg/L的 NAA,1mg/L 的2,4-D 和0.1mg/L 的 BA 可诱导质地疏松