抗生素产生菌基因克隆的新进展

在商业上抗生素具有重要意义,它是由多种生物产生的,其中包括许多放线菌(Actinomycets)[如链霉菌Streptomyces马杜拉放线菌(Actinomadura)。游动放线菌(Actinoplanes),小单孢菌(Micromonospora)和诺卡氏菌(Nocardia)],芽孢杆菌(Bacilli)和真菌(Fungi)[如头孢霉菌(Cephalosporium)和青霉菌(Penicillium)]。通过微生物发酵、化学或酶法加工并提纯后的抗生素可作为商品或用于基础研究。基因克隆技术在抗生素产生菌中比诸如大肠杆菌、芽孢杆菌和酵母菌等广泛研究的生物发展得慢一些。然而,最近已有这方面基因克隆的例子,它们能导致产生有用的新成份或提高现有成份的产量。在本综述中,我将着重谈谈近来有关抗生素产生菌基因克隆技术的进展,将这些进展同过去研究工作之观点结合起来看,谈一下未来的展望。     

恶性肿瘤中溶骨因子的分离鉴定

某些源自外胚层的骨外实体瘤,它们并未浸润至骨组织,但可引起血钙显著增高,提示这些肿瘤可能分泌体液因子作用于骨导致溶骨。我们从人膀胱癌、大鼠乳腺癌(Walker 256)及7.12-Dimethyl Benz[α]anthracene诱发的小鼠鳞癌的提取液中初步分离鉴定了一种溶骨因子。肿瘤提取液经ultrogel层析,发观仅有一溶骨活性峰(~(45)Ca自乳鼠顶骨培养中的释出率),相当于表观分子量15,000道尔顿。此溶骨活性峰与PGE2生成的活性峰相平行,两者均能被Indomethacin及煮沸所抑制。在膀胱癌及鳞癌中,溶骨活性峰还与刺激大鼠成骨肉瘤细胞腺苷酸环化酶的活性相平行。实验结果表明此溶骨因子不同于其它已知能引起溶骨的因子。     

检测马铃薯S、X和Y病毒的灵敏度及其改进技术

用5.3M的NaOH:乙醇(EtOH)予处理新的聚苯乙烯微皿,以酶联免疫吸附法在病毒的特异吸光率(A405)处测定马铃薯S、X及Y病毒,其平均数增加14.8%,与对照PBS—T相比,在磷酸盐缓冲液中(PBS—T)加入0.01M二乙基二硫代氨基甲酸酯钠则增加了对PVY的特异吸光率37.3%。用0.2M二乙醇胺pH10.5和6～12%亚硫酸钠对PVX进行碱性降解后,比单用PBS—T增加了特异的对PVX的吸光率约2.06%。从logA405和log汁液的稀度之间的相关回归分析得出进一步增强灵敏度的特性。由回归方程来予测病毒的稀释限点,用未稀释的被侵染汁液测定相应增加的病毒特异光吸收值。一个改进的双抗体夹心酶联免疫吸附测定法,提高检测PVS稀释终点约达30～32%,这一数值比曾在其它植物病毒上报道过的要少。血清学测定在植物病理学上的一个主要应用方面,是对马铃薯病毒的大量测定。即检疫证明和抗病育种的鉴定两个方面。酶联免疫吸附测定(ELISA)是测定病毒最灵敏有效的方法之一,它可能对某些植物病毒的检测效率达1μg/ml。本研究的目的是测定和评价改进马铃薯S、X及Y病毒的ELISA灵敏性方法的效果。这些改进方法包括,用於清洗聚苯乙烯微皿以便用作ELISA的洗剂,病毒提取缓冲液的添加剂,以及一个双抗体夹心ELISA(DASELISA)的改进方法。     

坚强芽孢杆菌——鳞翅目害虫新的病原菌

Ailanthus tryphysa是一种软木树,它生长在印度南部的人造林中,这种树上有两种主要害虫:臭椿皮蛾(EIigma narcissus鳞翅目,夜蛾科)。和乔椿巢蛾(Atteva fabriciella鳞翅目,巢蛾科)1983年9—12月间,当这个地区的害虫大。量集聚时,发现有许多E.narcissus死幼虫挂在树叶上,感染幼虫的肠溶物和分泌物中都有一种杆状菌。我们怀疑这些幼虫是受该菌寄生而死,为了证实这种可能     

工业用菌种筛选的现代战略

序言青霉素工业生产的初始发展阶段,自采用突变和随机选择方法以来,对工业用菌株的选育,已经取得了实质性进展,但仍然存在着经验手段。以基因的应用和生物化学理论指导为基础的各种技术和方     

两种测定HBeAg标记ELISA的比较

<正> 乙型肝炎e抗原(HBeAg)是乙型肝炎病毒存在的一个重要的血清学标志,首先被Magniue等人所描述(1972)。他们和其他工作人员用凝胶扩散法检查HBeAg和其抗体(抗-HBe),以后又有了更敏感的方法如血凝试验法,放射免疫测定法及酶联免疫吸附试验( ELISA)相继出现。 通常,HBeAg可在乙肝病毒急性传染早期血清样品中查出,然而偶而在一次血样诊断试验时不一定能发现。在病毒血症多年的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)慢性携带者体内也同样可能发现。抗-HBe是在乙型肝炎病毒传染恢复期病人中出现和在能够通过循环清除HBeAg的HBeAg携带者中出现。HBeAg和抗-HBe状况的血样检测,     

多克隆和单克隆抗体鉴定有肾综合征出血热病毒的四种血清型

<正> 前言 有肾综合征出血热(HFRS)病毒广泛地分布于欧亚大陆、日本、美洲和非洲。斯堪的纳维亚、苏联、中国和朝鲜是人类HF-RS疾病的地方性流行疫区。朝鲜出血热(KHF)的病因汉坦(Hantaan)病毒76-118株是由Lee等人于1978年从黑线姬鼠(A-podemus agrarius)分离到。1975年以来,日本从一些HFRS病例联想到与实验室大鼠     

利用广霍香叶片繁殖小苗

栽培在热带地区的广藿香可生产香料工业广泛应用的藿香油。广藿香的栽培品种一般不开花,故不能进行杂交。由于自然突变率很低,若要改变基因型,可采用诱变育种的方法。但经辐射插条或匍匐茎会遇到嵌合体形成和二倍体选择的问题,取得突变型不多。为克服这个问题,Broertjes等(1968)建议采用不定芽技术,即通过叶片活体繁殖产生不定芽而形成小苗。该技术在营养繁殖作物的诱变育种上已得到应用,小苗主要从单个表皮细胞发育而成。     

对氨基苯甲酸乙酯衍生法测定IgM中的糖链结构

糖蛋白中痕量的完整寡糖链结构可用现代质谱方法测定。对寡糖的对氨基苯甲酸乙酯衍生物的液态二次离子质谱进行了研究,测定了基质效应,比较了正、负离子谱,使得麦芽七糖衍生物的最小检测量达到4p mol。应用氘标记类似物及高分辨质谱数据解释了IgM中N-连接的寡糖链分子结构。     

高稳定人胰岛素的晶体学研究:Ⅲ,A21-Asp突变体的结晶和初步晶体学分析

研究一系列有明确意义改性胰岛素的结构将有益于新型胰岛素分子的设计。经蛋白质工程制备的AspA21—人胰岛素(ADHI)基本保持了生物活力,而在酸性溶夜(pH3—4)中的稳定性比天然胰岛素在中性溶液中高5—10倍。本文报道ADHI的结晶、初步晶体学研究及中等分辨率衍射数据的收集。ADHI晶体属R3空间群:a_H=b_H=82.72埃,c_H=34.02埃。