伴刀豆蛋白A与活细胞膜作用的图像分析和多元统计

用图像分析与多元统计研究伴刀豆蛋白A(ConA)与活巨噬细胞膜受体结合时膜变形性随作用时间和ConA浓度的定量变化。结果表明膜面积增大,增大速率与ConA速度呈正相关。ConA浓度加大,膜园形系数减小,变形性增加,此等变化反应了细胞的活化。     

伴刀豆蛋白A与巨噬细胞膜上受体结合后对微丝组装的影响

本文采用流式细胞术(FCM)和荧光显微术研究ConA与巨噬细胞膜上受体结合后细胞骨架微丝组装的变化,实验证明ConA与膜受体结合后巨噬细胞内微丝含量增多,并且与ConA的浓度有关。荧光显微镜下还可见细胞面积增大。本实验成功地用流式细胞术定量研究活细胞内细胞骨架的变化情况。     

定量研究细胞表面蛋白质分子与其配位体(抗体)之间的动态结合

以定量方法确定细胞表面蛋白质分子的动态行为,可深入了介细胞的生命活动。 本文研究FITC—11—4—1Fab和11—4—1Fab同时与细胞表面糖蛋白分子进行竞争性抑制结合,测定一定时间内FITC—11—4—1Fab与Clld细胞表面糖蛋白分子的专一性结合的机率,这有助于了介细胞表面糖蛋白分子的结构和运动。 用荧光分光光度计定量的测量FITC—11—4—1Fab和11—4—1Fab对Clld细胞表面糖蛋白分子进行竞争性抑制结合后所发出的相对荧光强度,再经过计算得知每一Clld细胞表面所能确切结合的FITC—11—4—1Fab分子的真正数目。 实验结果证明FITC—11—4—1Fab的浓度增大,则每一Clld细胞表面糖蛋白分子真正能结合的FITC—11—4—1Fab数目也增多。     

小角中子散射研究铯对溶液中tRNA~(Phe)构象的影响

用小角中子散射技术研究生物大分子的构象,图样清晰,可同时获得结构参数和热力学参数。 tRNA~(phe)在pH7.0的CsCl-TMA溶液中会形成Cs-tRNA~(phe),由于溶液中的电荷颗粒的作用使tRNA~(phe)的构象可能发生变化,本文研究不同浓度CsCl-TMA溶液中Cs对tRNA~(phe)在溶液中构象有无变化。 制备各浓度的CsCl-TMA—D_2O-tRNA~(phe)和以H_2O代D_2O的上述溶液样品。在小角中子散射装置D_(11)上测定Cs-tRNA~(qhe)的结构参数和热力学参数。 实验结果是不同浓度的CsCl-TMA-D_2O溶液中的Cs-tRNA~(phe)迥旋半径Rg的数值无大变化,中子散射密度增量(ds/dc)~2即I(o)/C的数值大致相同,颗粒的微分体积V_2值随盐浓度增加稍有加大,体积参数φ(?)的绝对值随盐浓度稍加.从以上结构参数Rg和热力学参数dρ/dc,V_2和φ′s等值分析发现Cs-tRNA~(phe)在Cs的作用下在溶液中构象无大变化。##原图像不清晰     

血清抑癌多肽作用机制的初步探讨——对癌细胞膜及其骨架的影响

本文研究血清抑癌多肽(SCSP)对癌细胞表面的效应和其表面蛋白质分子的侧向扩散及其内的F-actin的变化.扫描电镜观察结果是SCSP作用后,艾氏腹水癌细胞表面的微绒毛变为平坦而光滑的结构.从荧光漂白恢复技术测得的结果是上述癌细胞表面蛋白质分子的侧向扩散系数(?)降低.用Rhodamine—Pha-lloidin标记上述癌细胞得知其内的F—actin增加.从上述结果推测,在SCSP杀伤艾氏腹水癌细胞过程中,使F—actin在癌细胞内重组,有更多的F—actin与癌细胞质膜内大分子紧密相连,使癌细胞表面分子的活动性降低,故在癌细胞表面的结构变平,其蛋白质分子的扩散受限制而变慢.     

扫描隧道显微术研究脂双层表面结构

扫描隧道显微术可用于研究生命物质表面结构,为人类认识生物物质的微观世界打开一条新途径.本文探讨国产扫描隧道显微镜直接观测脂双层膜表面分子的排布,以线扫描像和灰度扫描像显示出脂双层膜上磷脂头部的排列.     

层粘连蛋白与膜受体结合下膜受体构象与膜脂有序性的研究

配体蛋白与细胞膜受体蛋白结合后,可引起膜受体的构象与膜脂的有序性变化.本文研究外源性层粘连蛋白与腹水肝癌细胞膜受体结合后膜热量变化,膜序参数改变和膜电荷及细胞迁移率的变更.就膜蛋白构象与膜脂有序性以及膜电荷等方面改变的生理意义与层粘连蛋白抗癌细胞脱落转移寻找理论关系.本文应用微量量热法、顺磁共振和细胞电泳等技术,得知层粘连蛋白与癌细胞膜作用后细胞膜有放热效应,膜流动性增大,细胞电泳动变慢.癌细胞膜的这些变化对于限制癌的恶性生长与脱落均起重要作用.     

伴刀豆球蛋白A和层粘连蛋白与膜受体结合下膜分子运动及微丝组装变化的比较

研究伴刀豆球蛋白A和层粘连蛋白分别与小鼠腹腔巨噬细胞膜受体结合下引起细胞膜分子运动的变化和对微丝组装的影响.结果表明,伴刀豆球蛋白A和层粘连蛋白作用下均导致膜表面蛋白分子的侧向扩散速率减慢,膜脂流动性降低,加快膜内微丝组装并使微丝含量增加.两配体作用下引起细胞上述反应有相似性.     

不同配体与同一膜受体结合的初步探讨

研究了伴刀豆球蛋白A(ConA)和层粘连蛋白(LN)与巨噬细胞膜受体竞争结合,初步推测两个配体与同一膜受体结合的可能性.结果表明,LN可以竞争抑制FTTC-ConA与巨噬细胞膜受体的结合,说明ConA和LN两种配体各自的巨噬细胞膜受体中有部分可能是共同的,而加入ConA反而增加巨噬细胞膜上结合的FITC-LN量,这可能是因为ConA和LN的分子特性导致的.     

显微红外研究巨噬细胞膜电融合后膜蛋白二级结构的变化

首次尝试了将显微傅里叶变换红外光谱术应用于研究电融合后细胞膜蛋白质二级结构的变化,发现脉冲电场作用于细胞具有穿透效应,施加电脉冲后,整个细胞的蛋白质体系能量增加,表明电泳冲对蛋白的二结构影响很大;同时,还发现用唾液酸苷酶和蛋白酶Ｐｒｏｎａｓｅ分析处理巨噬细胞膜表面后,膜上蛋白质二级结构无序化程度增加,用酶适度处理的细胞将更易发生电融合。