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木糖醇脱氢酶(xylitol dehydrogenase, XDH)可以氧化木糖醇生成木酮糖,处于木糖代谢的节点位置。利用PCR方法克隆得到了休哈塔假丝酵母(Candida shehatae) 20335的木糖醇脱氢酶基因、质粒pKT0150的ADH1终止子序列和G418抗性基因(KanR),以及酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) W5特定的2.2 kb的rDNA片段。以酿酒酵母整合载体p406ADH1为骨架,利用基因工程手段构建一个多拷贝整合表达载体pLX-AGRX。将重组载体pLX-AGRX线性化转入到酿酒酵母W5后,通过高浓度G418筛选和PCR双重鉴定,证实重组载体pLX-AGRX已整合到酿酒酵母W5基因组上,测定木糖醇脱氢酶酶活可达65.957 4 U/mg。 相似文献
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根据木糖醇脱氢酶基因序列相似的特点,根据树干毕赤酵母(Pichia.sfipitis),热带假丝酵母(Candidatropicalis)设计1对简并引物获得C.shehatae HDYXHT-01木糖醇脱氢酶基因的序列,此片段长为1095bp。利用生物信息学软件对此序列进行了同源性分析、氨基酸组成分析、疏水性分析、磷酸化位点预测、CDS分析、二级结构预测。结果表明,该克隆片段为C.shehataeHDYXHT-01木糖醇脱氢酶基因的序列。 相似文献
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