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RRM RNA 结合蛋白在基因的转录后调控中起着重要作用.人GRY-RBP 是我们实验室最近克隆的一个新的全长cDNA,编码一个RRM RNA 结合蛋白.GRY-RBP 的全编码区用PCR扩增后,克隆到pET30a+ 表达载体中,在E.coli中获得了高效表达,表达的GRY-RBP重组蛋白占细菌总蛋白的21% .利用融合在GRY-RBPN 端的His.Tag,采取亲和层析的方法纯化了表达的重组蛋白.为了检测GRY-RBP的RNA 结合活性及其所结合的RNA 性质,将表达的蛋白与poly(A)-Sepharose 4B结合,发现GRY-RBP能与polyA (A)结合,结合活性能被可溶性的poly(A)、poly(C)减弱.改变NaCl浓度和加入不同浓度的酵母tRNA竞争物后,poly(A)结合活性不变. 相似文献
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本文简要介绍了人类基因组计划的研究目标、内容、策略和人类基因组计划研究的新进展,如遗传图谱、转录图谱的构建、序列分析、疾病基因的鉴定等。同时还介绍了可能力。快基因组全序列分析的新策略和基因组后研究的几种方法。 相似文献
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为了抑制Tat蛋白的反式激活作用,在细胞内大量表达外源TARRNA使其与Tat蛋白结合,从而竞争性抑制其与HIV-1LTR的TARRNA元件结合.构建了以HIV-1LTRYL158(-158~+180)为启动子,分别含有4,8和15个拷贝的TAR-CoreRNA诱饵(decoy)表达质粒;以荧光酶基因为报告基因,检测了瞬时共转染体系中含不同拷贝数的TAR-CoreDNA转录产物对Tat蛋白反式激活作用的影响.结果证明,TAR-CoreRNA诱饵对Tat蛋白活性具有很强的抑制作用,其抑制程度与TAR-CoreDNA串联体的拷贝数有关. 相似文献
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RRM RNA结合蛋白的结构与功能 总被引:4,自引:0,他引:4
RRM RNA结合蛋白是一类含一个或数个RRM结构域及附属结构域的RNA结合蛋白,参与RNA前体的剪接、RNA的细胞定位、RNA的稳定性等多种转录后调控过程.在RRM基序中含有许多保守的氨基酸以保证对RNA的结合活性,但是这一家族的不同蛋白质却能特异地结合各种不同的RNA分子.RRM RNA结合蛋白与某些人类遗传性疾病及肿瘤相关. 相似文献
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