桑椹挥发性成分的分析研究

对广东桑桑椹石油醚和乙酸乙酯提取物中的化学成分进行GC-MS分析。与WILEY谱库的标样质谱图进行比较,鉴定出21种化学成分。     

南京灵谷寺森林动态变化的研究

利用1951、1981和1991年的定点样带资料,对南京灵谷寺森林植物区系、物种多样性、显著度和年龄结构的动态变化进行了研究。40年来,种数由75种骤减到50种,复又增加到56种,个体数由5097株骤增到20585株,复又下降到3344株。而其Simpson指数和Shannon-Wiener指数的变化很小。显著度的分布均为对数级数型,优势种的作用非常明显,前6个种的显著度分别占了群落总显著度的75.4％、96.2％和84.4%。先锋树种马尾松(Pinus massoniana Lamb.)因幼苗的成活率低,显现衰退迹象,而黄连木(Pistcia chinensis Bge.)的年龄结构则表示该种群有再次占据优势的可能。群落中增长型常绿树种种群的出现,既反映了群落环境的改善,又意味着群落向地带性植被发育的可能性。     

In vivo self-assembled small RNAs as a new generation of RNAi therapeutics

RNAi therapy has undergone two stages of development, direct injection of synthetic siRNAs and delivery with artificial vehicles or conjugated ligands; both have not solved the problem of efficient in vivo siRNA delivery. Here, we present a proof-of-principle strategy that reprogrammes host liver with genetic circuits to direct the synthesis and self-assembly of siRNAs into secretory exosomes and facilitate the in vivo delivery of siRNAs through circulating exosomes. By combination of different genetic circuit modules, in vivo assembled siRNAs are systematically distributed to multiple tissues or targeted to specific tissues (e.g., brain), inducing potent target gene silencing in these tissues. The therapeutic value of our strategy is demonstrated by programmed silencing of critical targets associated with various diseases, including EGFR/KRAS in lung cancer, EGFR/TNC in glioblastoma and PTP1B in obesity. Overall, our strategy represents a next generation RNAi therapeutics, which makes RNAi therapy feasible.Subject terms: RNAi, siRNAs     

Purinergic signaling in myocardial ischemia–reperfusion injury

Purines and their derivatives, extensively distributed in the body, act as a class of extracellular signaling molecules via a rich array of receptors, also known as purinoceptors (P1, P2X, and P2Y). They mediate multiple intracellular signal transduction pathways and participate in various physiological and pathological cell behaviors. Since the function in myocardial ischemia–reperfusion injury (MIRI), this review summarized the involvement of purinergic signal transduction in diversified pathological processes, including energy metabolism disorder, oxidative stress injury, calcium overload, inflammatory immune response, platelet aggregation, coronary vascular dysfunction, and cell necrosis and apoptosis. Moreover, increasing evidence suggests that purinergic signaling also mediates the prevention and treatment of MIRI, such as ischemic conditioning, pharmacological intervention, and some other therapies. In conclusion, this review exhibited that purinergic signaling mediates the complex processes of MIRI which shows its promising application and prospecting in the future.     

TaqMan探针荧光PCR检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7方法的建立

肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagie Escherichia coli,EHEC)O157∶H7是一种重要的传染病病原菌,以EHEC O157∶H7标准菌株rfbE保守区设计一对特异引物和一条探针,建立了检测EHEC O157∶H7核酸的荧光定量PCR检测方法.实验结果表明荧光定量PCR检测方法特异性好,最低检测限为20 cfu/mL,线性范围是102～108 cfu/mL.稳定性试验表明批内变异系数和批间变异系数分别为2.06％和2.45％.     

不同硝酸钙和氯化钠浓度处理土壤对番茄植株养分吸收的影响

试验以Ca(NO3)2和NaCl按5：1的比例均匀混合设计0、0．1％、0．3％、0．5％、0．7％的盐浓度5个处理,模拟宁夏不同日光温室的土壤含盐量,以番茄为试验材料,研究了不同浓度盐分对番茄养分吸收的影响。结果表明,在同一生育期内,随着盐分浓度的增大,番茄植株对养分吸收明显减少。在不同的生育期内,对照处理对氮磷钾钙镁的吸收在结果初期达到最大值;0．1％盐分处理对氮磷钾的吸收在结果初期达到最大值,而对钙镁的吸收在收获末期达到最大值;在高盐处理(0．3％以上)中,番茄植株对氮磷钾钙镁的吸收在收获末期达到最大值。     

东兴金花茶表型变异研究

对东兴金花茶(Camellia tunghinensis Chang)5个自然居群的表型变异特征进行研究。结果表明：东兴金花茶多数表型指标居群间变异大于居群内变异;20项表型指标中,果柄粗(FHT)、果实横径(FD)、果实纵径(FT)和果实重量(FM)等13项指标在居群间的差异达到了极显著水平(P<0.01),其中,种子重量百分比(SMPF/FM)的变异程度最大,而种宽(SB)的变异程度最小;表型总体在居群间的差异未达到显著水平;按变异系数均值大小,5个居群的排列顺序为SFSH1 (0.272)＞MJG (0.217)＞SFSH (0.207)＞SHL (0.190)＞DGL (0.170);平均株高、植株基径与各表型性状间的相关性不显著;不同表型性状间存在一定的相关性。     

结核分枝杆菌H37Rv 色氨酸合成酶α亚基编码基因的克隆、表达及酶学性质分析

目的 克隆表达色氨酸合成酶α亚基编码基因并对其进行功能分析。方法 以结核分枝杆菌( 简称结核杆菌)H37Rv 基因组为模板, 扩增trpA 基因, 构建pET30a-trpA 重组质粒; 转化重组质粒到大肠埃希菌DH5α并在BL21( DE3) 诱导表达, 纯化可溶性的结核杆菌重组色氨酸合成酶α亚基( His-rMtTrpA) 。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE) 和质谱分析测定相对分子质量( Mr) 后, 用圆二色光谱( CD) 分析和同源模建方法检测二级和三级结构。研究不同浓度HisrMtTrpA对β亚基酶活反应的影响。结果 成功克隆了813 bp 的目的基因trpA, 并获得了高纯度的His-rMtTrpA 蛋白。重组蛋白Mr 为33. 151 ×10³ ( 含载体蛋白) 。25 ℃时His-rMtTrpA 的二级结构包括31. 8% α 螺旋、31. 8% β 折叠、8. 4% β转角和27. 9%无规则卷曲, 它的三维模型显示为( β/ α) 8 桶状结构。酶学性质研究表明, 在His-rMtTrpA 与MtTrpB 的摩尔比为2. 2时, 色氨酸合成酶α亚基可以最大限度促进β亚基酶活反应。结论 成功得到高纯度的重组目的蛋白His-rMtTrpA, 其功能分析为针对色氨酸合成酶的药物筛选设计提供理论基础。     

大鼠脂肪干细胞向雪旺细胞诱导分化能力的研究

目的：研究脂肪干细胞（ADSCs）向雪旺细胞的诱导分化,为神经组织工程提供新的种子细胞。方法：取SD大鼠项背处的皮下脂肪,分离出脂肪干细胞并培养传代,流式细胞仪检测细胞表面特异标记CD29,CD34,CD44,CD45,CD90,以评价干细胞的生物学特性;采用b-FGF和forskolin等诱导脂肪干细胞向雪旺细胞分化,光镜观察诱导后细胞形态的变化;免疫荧光染色鉴定雪旺细胞特异性标记物S100、P75和GFAP的表达;PCR检测诱导前后雪旺细胞特异性标记物S100、P75的表达。结果：分离培养的鼠脂肪干细胞CD29、CB90表达呈阳性,而CD34、CD44和CD45表达呈阴性,具有脂肪干细胞的生物学特性;脂肪干细胞经过胶质细胞生长因子的作用,光镜下发现诱导的细胞形态与雪旺细胞相似;免疫荧光染色S100、P75和GFAP阳性;RT-PCR结果显示诱导的雪旺细胞标记物S100和P75表达上调。结论：脂肪干细胞可诱导分化成雪旺细胞,其表型和分子特征与雪旺细胞相似,诱导分化的脂肪干细胞是一种理想的神经组织工程的种子细胞。