恒河猴(Macaca mulatta)卵细胞采集及体外受精的研究

对13头成年母猴,用黄体酮 前列腺索(PGF_(2a))处理,诱发月经周期,并用三种不同的处理方案,注射外激性促性腺激素诱发等超数排卵。对171个大滤泡(直径≥4mm)实行外科手术采卵,滤泡穿刺吸卵共获147个卵细胞,平均每头猴采卵11.31±6.47个,卵细胞回收率为85.96％。精液用直肠电刺激法采集,精子经TALP培养基洗涤二次,并在含10％灭活猴血清的TALP液中,加入1mM CAMP和lmM咖啡因,预孵育6～3h。卵细胞在含10％灭活猴血清的TALP或Ham'sF-10培养基中作体外成熟的培养,经约4～12h孵育,卵细胞体外成热率为28.57％。成熟的卵细胞(n=42,中期Ⅱ)和已预孵育的精子一起12～24h,并有部分在前次输精后5～12h再次输精,在42～56h后有9个受精卵继续发育至2细胞期和桑椹期阶段,体外受精率为35.71％(15/42)。     

柱前衍生-RP-HPLC法测定青蒿中青蒿素的含量

采用柱前衍生-RP-HPLC法测定10个不同产地的青蒿药材中青蒿素的含量.采用Lichrospher 100 RP-18e(250 mm×4.6 mm,5μm,Merck KgaA,Germany)色谱柱,甲醇-0.01 mol/L醋酸钠-醋酸缓冲液(pH 5.8)(体积比62:38)为流动相;检测波长:260 nm;流速:0.5 mL/min;柱温:25℃.结果表明该法准确重现性好,可以为青蒿质量标准的制订提供科学依据.     

红树植物秋茄叶片双向电泳技术体系的建立及优化

对适用于秋茄(Kandelia candel)叶片蛋白质组学研究的双向电泳技术体系进行了优化.结果表明,采用酚抽提法提取的蛋白质浓度较低,约1.7 μg μL-1,SDS-PAGE电泳后几乎无条带;而采用改良TCA -丙酮沉淀法可显著提高提取液中蛋白质的含量,可达12.4 μgμL-1.秋茄叶片蛋白质主要分布在pH4～...     

经皮穴位电刺激联合常规镇痛对无痛人流术后宫缩痛镇痛效果及机制研究

摘要 目的：探讨经皮穴位电刺激联合常规镇痛对无痛人流术后宫缩痛镇痛效果及机制。方法：选择来我院行无痛人流患者100例。根据随机数字表法分为两组。对照组行术后常规镇痛治疗,同时在内关、合谷、三阴交最酸胀处黏贴电极但是不进行穴位刺激。观察组在术后常规镇痛基础上行经皮穴位电刺激治疗。对比不同时间点两组患者的机体一般情况、不同时间点两组患者的宫缩痛疼痛情况、T3时正性负性情绪量表评分、T3时血清P物质、前列腺素、5-羟色胺、β-内啡肽、强啡肽水平、T4点时的心理状态评分及满意度评分。结果：对照组T1、T2点时的BP、HR、RR、SpO₂明显较同组T0点低,对照组T3点与观察组T1、T2、T3点时BP、HR、RR、SpO₂与同组T0点对比无统计学意义（P>0.05）;对照组T1、T2点时的BP、HR、RR、SpO₂明显较观察组同时间点低（P<0.05）。T0点,两组VAS评分对比无统计学意义（P>0.05）;T1、T2、T3点时间,观察组的VAS评分明显较对照组低（P<0.05）;对照组T1、T2点的VAS评分明显较同组T0点高,观察组T1、T2、T3点的VAS评分明显较T0点低（P<0.05）。观察组的正性情绪明显较对照组高,负性情绪明显较对照组低（P<0.05）。观察组的血清P物质、前列腺素、5-羟色胺、β-内啡肽、强啡肽水平明显较对照组低（P<0.05）。观察组的心理状态评分明显较对照组低,满意度评分明显较对照组高（P<0.05）。结论：经皮穴位电刺激联合常规镇痛可明显改善无痛人流术后宫缩痛镇痛效果、患者心理状态及满意度,可能与其可降低血清P物质、前列腺素、5-羟色胺、β-内啡肽、强啡肽水平有关。     

盐酸米诺环素软膏辅助龈下刮治术及根面平整术对慢性牙周炎患者龈下牙周致病菌和龈沟液炎性因子的影响

目的:探讨盐酸米诺环素软膏辅助龈下刮治术及根面平整术(FM-SRP)对慢性牙周炎(CP)患者龈下牙周致病菌和龈沟液炎性因子的影响。方法:选择2015年10月到2019年10月期间我院收治的82例CP患者,根据随机数字表法分为对照组(n=41)和观察组(n=41),对照组给予FM-SRP,观察组在对照组基础上联合盐酸米诺环素软膏辅助治疗,比较两组疗效、牙周指标、龈下牙周致病菌和龈沟液炎性因子情况,统计两组不良反应情况。结果:与对照组总有效率70.73%(29/41)相比,观察组治疗后的总有效率90.24%(37/41)更高(P<0.05)。治疗后,两组龈沟出血指数(SBI)、附着水平(AL)、菌斑指数(PLI)、牙周袋深度(PD)均下降,且观察组低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组转化生长因子-β(TGF-β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)均下降,且观察组低于对照组(P<0.05)。对比两组不良反应无差异(P>0.05)。治疗后,两组伴防线杆菌、牙龈卟啉单胞菌比例均下降,且观察组低于对照组(P<0.05)。结论:盐酸米诺环素软膏辅助FM-SRP治疗CP患者,可有效消除致病菌,缓解炎性反应,恢复牙周生态平衡,且不增加不良反应发生率,疗效确切。     

中华蜜蜂气味受体基因AcerOR58的序列与时空表达分析

[目的]通过分析中华蜜蜂Apis cerana cerana气味受体基因AcerOR58编码蛋白的理化性质、结构特征,明确AcerOR58时空表达特性,为该基因后续的功能研究奠定基础.[方法]利用多种生物信息学软件预测分析AcerOR58序列及其编码蛋白的结构特性,采用邻接法构建系统进化树.利用实时荧光定量PCR技术分析AcerOR58在不同发育阶段工蜂触角及采集蜂不同组织的表达差异.[结果]AcerOR58基因的开放阅读框(ORF)长1 230 bp,编码409个氨基酸,成熟蛋白分子量为47.147 ku,理论等电点8.46,无信号肽,含有6个跨膜结构且N端位于胞内,31个潜在的磷酸化位点,在第80-405位氨基酸之间存在一个昆虫气味受体家族7tm_6 superfamily保守结构域.AcerOR58与西方蜜蜂Apis mellifera的AmelOR58亲缘关系最近,核苷酸序列一致性高达96.67％,氨基酸序列一致性高达97.31％.AcerOR58在采集蜂(15-25日龄)阶段的表达量较高,且在触角中的表达量极显著高于其他组织(P＜0.01).[结论]AcerOR58具有昆虫气味受体的结构特征,该基因特异性高表达于中华蜜蜂采集蜂触角中,推测其功能与识别外界蜜粉源的花香气味物质有关.     

中华蜜蜂气味结合蛋白AcerOBP14的表达及配体结合特性分析

[目的]气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)在昆虫寄主定位、产卵地选择等行为中发挥着重要作用,明确中华蜜蜂Apis cerana cerana AcerOBP14与配体的结合特性有助于阐明中华蜜蜂嗅觉识别的分子机制.[方法]通过qRT-PCR测定OBP14在20日龄中华蜜蜂成年工蜂...     

HIV-1 Tat蛋白对人类疱疹病毒8型复制的影响

用HindⅢ将HIV-1Tat101蛋白编码基因从pEV质粒中切出,BamHI、NotⅠ将绿色荧光蛋白(GFP)编码基因从表达质粒pcDNA3．1 ／GFP中切出,分别插入到质粒LZRSpBMN-Z中,构建成重组反转录病毒表达质粒LZRS—Tat101和LZRS—GFP。采用磷酸钙转染法将两重组质粒转染到含反转录病毒env,gal和pol编码基因的包装细胞Phoenix(φNX)中,嘌呤霉素筛选获得稳定细胞系。分别收集稳定细胞系分泌的病毒上清,并感染体外培养的原发性渗出性淋巴瘤(PEL)BC2BL-1细胞。收集LZRS—GFP重组病毒感染的BCBL-1细胞进行流式细胞计数,检测GFP表达水平。收集LZRS—Tat101重组病毒感染的BCBL-1细胞,提取蛋白作Western blot,检测Tat蛋白表达状况;取细胞总RNA作Northem blot和定量PCR,检查HHV-8次要衣壳蛋白ORF26 mRNA转录水平。重组LZRS—Tat101病毒进一步感染HL3T1细胞(HeLa细胞包含HIV-1-LTR／CAT报告基因),收集感染细胞提取蛋白,检测CAT活性,评价Tat生物学功能。PCR扩增HHV-8复制和转录激活蛋白Rta启动子区上游序列,并克隆至pGL-3载体中,构建Rta启动子 虫荧光素酶(Luciferase)报告基因重组质粒。此重组质粒进一步电转染预先感染了LZRS—Tat101病毒的BC-3细胞,TPA刺激后收集细胞,检测Luciferase活性。结果显示：①重组反转录病毒感染BCBL-1细胞,一次感染效率达56％;②重组LZRS—Tat101毒能够在其感染的BCBL-1细胞中表达Tat蛋白,且表达蛋白具有转录激活功能;③Tat蛋白不能有效上调HHV-8Rta启动子活性;④细胞内HIV-1Tat蛋白诱导HHV-8可溶性周期复制的能力较弱。提示,单纯HIV-1Tat蛋白并不能激活潜伏感染的HHV-8。     

海草生物活性成分的研究进展

本文综述了海草中生物活性成分的研究进展,其化学成分类型主要是苯酚类、黄酮类和二萜类化合物,生物活性主要包括抗菌、抗氧化、抗病毒、细胞毒性、抑制海藻生长和抗污损等.     

四川省蚋属纺蚋亚属一新种记述(双翅目,蚋科)

泸定纺蚋,新种Simulium(Nevermannia)ludingense sp.nov.(Figs.1-17)根据雄虫尾器和蛹呼吸丝特征,新种应隶属于纺蚋亚属的宽足蚋组uernum-group.新种的主要特征是幼虫后腹节具附骨,这一特征在该组见于报告者仅有5种,即产自我国台湾的S.(N.)yushangense、湖南的S.(N.)zhangjiajiense和贵州的S.(N.)qinshuiense、菲律宾的S.(N.)aberrans以及马来西亚的S.(N.)caudisclerum.但新种蛹茧无前背突可与S.(N.)yushangense、S.(N.)qingshuiense、S.(N.)zhangjiajiense和S.(N.)caudisclerum相区别;其雄性生殖腹板呈半圆形以及幼虫上颚缘齿无附齿列可与S.(N.)caudisclerum相区别.正模♀,副模7♀♀,5♂♂,12蛹,5幼虫,2003-09-19,采自泸定县药王庙小溪水草.模式标本存放于贵阳医学院生物学教研室.