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1.
筛选出滞育状态下以及不同虫态下亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guenée)的实时荧光定量PCR(RT-qPCR)最稳定内参基因,本结果为研究不同虫态及滞育1个月,滞育2个月,滞育3个月和滞育4个月的亚洲玉米螟目的基因表达水平提供参考依据。本文以不同虫态及滞育状态下的亚洲玉米螟为试验材料,应用RT-qPCR技术检测β-actin,18S rRNA,EF1-α和RPS3共4个候选内参基因的表达稳定性水平,结合ge Norm,Normfinder,Best Keeper和Ref Finder软件分析各候选内参基因在不同处理下的表达稳定性。结果表明,在亚洲玉米螟不同虫态中,4个候选内参基因的稳定性大小排序为18S rRNAEF1-αβ-actinRPS3;滞育1个月,滞育2个月,滞育3个月和滞育4个月的亚洲玉米螟,稳定性大小排序为β-actinEF1-α18S rRNARPS3。18S rRNA和β-actin可分别作为不同虫态和滞育状态下的亚洲玉米螟基因表达水平分析试验中的内参基因。 相似文献
2.
spindlin1为作者所在研究组克隆并命名的肿瘤相关新基因,之前研究表明spindlin1蛋白定位于细胞核,并有可能通过对TCF-4通路的调节参与对肿瘤细胞生长和周期的调控.为进一步探索spindlin1的作用机制,明确spindlin1结构与功能的关系,在生物信息学分析及晶体结构解析的基础上,构建系列突变表达载体,首先以spindlin1蛋白亚细胞定位为指标,观察野生型及系列突变体spindlin1蛋白的亚细胞定位,并进一步检测野生型及突变体spindlin1对TCF-4荧光素酶报告基因转录活性的调控作用,以明确spindlin1定位与功能的关键位点.结果表明:Ser14+Ser84、Ser84+Ser99、Ser14+Ser84+Ser99位点Ser到Ala的联合突变能使野生型融合蛋白在细胞核内集中分布的特性消失,成为全细胞弥散分布,而Ser14、Ser84、Ser99各位点的单独突变或Ser14+Ser99联合突变对spindlin1蛋白的细胞核内分布没有影响.与此同时,对TCF-4荧光素酶报告基因活性的分析表明,Ser14+Ser84、Ser84+Ser99、Ser14+Ser84+Ser99的联合突变使spindlin1对其活性的激活作用消失或降低.上述结果表明,Ser84是spindlin1细胞定位与功能发挥的关键位点,其作用发挥需要Ser14与Ser99的协助. 相似文献
3.
本研究通过PCR扩增和六种限制性内切酶(AluⅠ、HinfⅠ、MboⅠ、RsaⅠ、HaeⅢ和PvuⅡ)酶切,对国内害虫防治上常用的几种昆虫病原线虫,包括斯氏属S.carpocapsae、S.feltiae和S.glaseri以及异小杆属H.bacteriophora、H.zealandica、H.indicus和H.megulis等8个品系rDNA-ITS进行分析,建立起可以区分各线虫种的标准RFLP图谱.该方法快速简便、稳定可靠,需要的样品量少,可以用于新鲜的、或冻存的样品,甚至分析单条的线虫.不仅可进行昆虫病原线虫的快速分类鉴定,而且进一步可以应用于线虫田间释放的辅助监测,实际田间感染率的测定和线虫毒力的比较. 相似文献
4.
测定了两种植物源杀虫剂印楝素、藜芦碱和对照杀虫剂高效氯氟氰菊酯在不同使用量下处理Heterorhabditis indica LN2,H.indica 212-2,Steinernema carpocapsae All和S.pakistanense 94-1等4个昆虫病原线虫品系2 d、1 w、2 w、3 w和4 w后对线虫存活和感染力的影响。3种杀虫剂对H.indica LN2和S.pakistanense 94-1存活的影响最小,藜芦碱和高效氯氟氰菊酯对H.indica 212-2存活的影响小于对S.carpocapsae All存活的影响,印楝素则对S.carpocapsae All存活的影响小于对H.indica 212-2存活的影响。藜芦碱和高效氯氟氰菊酯处理后线虫死亡率低于10%,对存活线虫对大蜡螟的感染力没有显著影响。印楝素在高使用量(8.10 g/ha)下对线虫的致死作用明显,且处理时间在3 w以上时显著提高线虫的死亡率,但是在田间推荐使用量(4.05 g/ha)及稀释使用量下对线虫的存活及感染力没有显著影响。结果表明,印楝素和藜芦碱以及对照药剂均可与4个品系的线虫共同施用于田间用于农业害虫的综合防控。 相似文献
5.
6.
7.
8.
非线虫共生细菌 (Bacillussubtilis ,B .thuringiensis,Pseudomonasfluorescens ,Micromonosporapur purea,Rhizopusdelemar ,Pseudomonasaeruginosa ,Streptomycesvenezuelae ,Streptomycesantibioticus ,Penicilliumcitrnum ,Ganodermalucidum ,Agaricusbisporus,Pleurotusostreatus,Rhizobiumlegumi unosarum和Photobacteriumphosphoreum)的培养液以及其上清液、斜纹夜蛾 (Spodopteralitura)昆虫细胞系用于引诱无菌SteinernemacarpocapsaeA2 4和HeterorhabditisbacteriophoraH0 6发育。上述培养物均未能诱导H .bacteriophoraH0 6发育。虽然P .phosphoreum菌液可致死A2 4线虫 ,但是其上清液可诱导线虫发育。无菌S .carpocapsaeA2 4线虫可利用斜纹夜蛾昆虫细胞繁殖 ,产生下一代感染期线虫。结果进一步说明 ,引诱H .bacteriophoraH0 6发育的化学信息物质比S .carpocapsaeA2 4的专一。 相似文献
9.
10.
【目的】初生型Photorhabdus luminescens细菌产生两种胞内晶体蛋白CipA和CipB,为其共生的昆虫病原异小杆线虫提供营养。探索非共生的斯氏线虫对Cip蛋白的营养利用情况。【方法】在已构建重组Cip蛋白大肠杆菌表达体系的基础上,建立重组菌细胞与无菌斯氏SY-5线虫共培养系统,检测线虫的生长发育情况。【结果】Cip蛋白对目标线虫生长有显著支持作用:发育为成虫的比例达到65%-82%,雌虫的怀卵率为80%-95%,平均怀卵量为30-50粒,并显著降低各虫态的死亡率。【结论】Cip蛋白不仅为共生的异小杆线虫提供营养,亦能为斯氏线虫所利用。 相似文献