基于高通量测序的精神分裂症患者肠道菌群多样性

目的 探讨精神分裂症患者肠道菌群多样性变化。方法 收集16例精神分裂症患者（schizophrenia,Sch）与18例健康者（healthy donor,HD）的粪便样本,提取肠道菌群基因组,扩增16S rRNA基因,运用Illumina平台进行测序。对测序结果进行多样性和物种组成差异分析。结果 精神分裂症患者组肠道菌群在门、纲、目、科、属、种、分类操作单元（operational taxonomic units,OTUs）水平的群落种类数目少于健康对照组。Alpha多样性指标中患者组的Ace指数（226.58±31.67）、Chao1指数（222.29±34.45）和Shannon指数（2.66±0.69）明显低于健康对照组（293.63±56.07、302.2±57.99、3.59±0.36）,差异均有统计学意义（Ps<0.001）,而Simpson指数（0.20±0.17）明显高于健康对照组（0.07±0.03）,差异有统计学意义（P<0.01）;Beta多样性分析显示两组研究对象肠道菌群样本可被鉴别区分。精神分裂症患者组与健康对照组样本在门和属水平上肠道菌群组成和含量有差异,其中患者组拟杆菌门和软壁菌门占比明显低于健康组,差异有统计学意义（21.76% vs.27.05%,P=0.008;0.00% vs. 0.20%,P=0.033）,而放线菌门明显高于健康组（13.52% vs. 2.88%,P=0.020）,差异有统计学意义;患者组拟杆菌属和柔嫩梭菌属占比明显低于健康组（9.15% vs. 20.60%,P=0.031;3.29% vs. 9.58%,P=0.005）,差异有统计学意义,而双歧杆菌属、普雷沃菌属和巨单胞菌属明显高于健康组（10.89% vs.1.78%,P=0.025;10.88% vs.1.98%,P=0.046;10.78% vs.2.69%,P=0.026）,差异有统计学意义。结论 基于16S rRNA的高通量测序有助于分析精神分裂症患者肠道菌群多样性变化,为研究肠道菌群与精神分裂症的关系提供新的思路和理论依据。     

加味甘麦大枣汤对气血两虚型产后抑郁症患者肠道菌群和血清5-HT的影响

观察加味甘麦大枣汤对气血两虚型产后抑郁症（PPD）患者肠道菌群和血清5-羟色胺（5-HT）水平的影响。

选取2022年10月至2023年8月就诊于甘州区妇幼保健院且符合纳入标准的气血亏虚型产后抑郁症患者60例作为研究对象,按其就诊顺序随机分为观察组、对照组,每组各30例。对照组给予西医常规治疗,观察组在西医常规治疗基础上联合加味甘麦大枣汤治疗,疗程4周。分别于治疗前和治疗后采用中医证候积分和汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评价治疗疗效。通过高通量测序法检测两组患者治疗前后粪便中的菌群多样性和各分类学水平分布。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测两组患者血清5-HT水平。

与本组治疗前比较,治疗后两组患者中医证候积分和HAMD评分均明显下降,差异具有统计学意义（P＜0.05）。治疗后,与对照组比较,观察组的中医证候积分和HAMD评分显著下降（P＜0.05）。观察组临床有效率为96.7%,高于对照组的76.7%（χ²=8.967,P=0.030）。观察组肠道菌群在治疗后的Simpson指数和Shannon指数较治疗前升高（P＜0.05）,拟杆菌门（Bacteroidetes）、瘤胃菌科（Ruminococcaceae）、拟杆菌属（Bacteroides）和双歧杆菌属（Bifidobacterium）相对丰度显著高于对照组（P＜0.05）,变形菌门（Proteobacteria）、肠杆菌科（Enterobacteriaceae）、粪球菌属（Coprococcus）和志贺菌属（Shigella）相对丰度显著低于对照组（P＜0.05）。两组患者血清5-HT水平治疗后均明显升高（P＜0.05）,观察组5-HT水平升高的更明显（P=0.010）。

加味甘麦大枣汤可辅助临床治疗改善PPD患者的临床症状,调节患者肠道菌群,提高血清5-HT水平。

     

蛹虫草菌生物合成虫草素的研究进展

蛹虫草Cordyceps militaris是我国传统的药用真菌,虫草素是蛹虫草的主要活性成分,具有抗癌、抗肿瘤、抗病毒等多种生理功能。蛹虫草菌液体发酵是最有希望实现高效生产虫草素的途径,但现阶段生产强度低,亟需应用发酵工程及代谢工程手段提高虫草素产量。文中对液体发酵体系中培养基组分(碳/氮源、前体物质、金属离子等)和培养条件(pH、溶氧量、光照等)对虫草素产量的影响进行了总结,并对虫草素的分离纯化、生物合成基因簇及合成代谢途径进行了阐述,最后探讨了实现虫草素高效生产的关键环节。     

从贵州白纹伊蚊体内分离到一株2型登革病毒

从贵州省独山县麻尾镇白纹伊蚊标本中分离到一株病毒,用抗DEN 14型单克隆抗体经间接免疫荧光法和RTPCR产物酶切分型鉴定为DEN2,并对其 NS1和E基因RTPCR产物进行部分基因序列测定,与DEN2 NGC株比较,麻尾株的NS1基因区有7个碱基发生点突变,E基因区有1个碱基的插入,两个序列被GenBank收录,编号分别为AY277402、AY278226;麻尾分离株与其他9株DEN2型病毒进行系统发育关系的分析,结果显示与D243株系统进化关系最近;证明贵州省存在DEN感染的自然循环。     

进一步证实李始美防治白蚁的科学技术成就

广东白蚁专家李始美同志在京期间,我有机会和他有不少接触,对他的研究成绩深为钦佩。又有机会陪同他去上海,亲自参加了现场灭蚁的活动,从而对他的造诣得到更进一步的认识。同时,我认为上海之行,也可以说是对他的研究工作的一个群众性的“论文答辩”或鉴定。所谓群众性不仅有行政工作干部、灭蚁队的工人,而且还有江苏、安徽、浙江、山东和上海     

利用酵母双杂交技术筛选鉴定与番茄环纹斑点病毒NSs蛋白互作的西花蓟马蛋白

【目的】筛选鉴定西花蓟马Franiklinella ocicdentalis体内与番茄环纹斑点病毒(tomato zonate spot virus, TZSV)NSs蛋白互作的介体因子。【方法】利用酵母双杂交技术筛选与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白;进行序列分析鉴定后,将捕获的蛋白与NSs基因回转到酵母细胞,利用营养缺陷型培养基鉴定蛋白互作情况。再利用GST Pull-down技术验证TZSV NSs与鉴定出的西花蓟马蛋白的体外互作关系。【结果】构建了TZSV NSs的酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7-NSs,确定了诱饵质粒对酵母AH109细胞无毒性,并且无自激活活性。序列分析发现与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白为类电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion-selective channel-like, VDAC)。酵母回转实验显示TZSV NSs与西花蓟马VDAC在酵母细胞内存在特异性互作。GST Pull-down结果表明TZSV NSs与西花蓟马VDAC在体外存在相互作用。【结论】通过酵母双杂交和GST Pull-down技术,分别在酵母细胞内...     

伤寒Vi多糖菌苗多糖含量及分子大小测定试验

伤寒Ｖｉ多糖菌苗是我国新近研制成功的一种多糖菌苗。为了严格控制该制品的质量,经反复试验,建立了多糖含量和分子大小的测定方法。本文报导了（１）用火箭电泳法测定伤寒Ｖｉ多糖菌苗多糖含量。经对不同实验条件进行比较,选择出较为理想的条件。用该法测定８批样品。结果均符合规程要求。对其中５批样品进行６次重复试验表明,该法的重复性好,操作简单,是测定多糖含量较为理想的方法。（２）用琼脂糖柱层析法对２８批伤寒Ｖｉ多糖菌苗的分子大小进行测定。对用该法所得柱层析收集液分别用Ｈｅｓｔｒｉｎ法和２０６ｎｍ扫描法测定其多糖回收率,对测定结果进行比较。结果表明,两种方法的测定结果无显著性差异（Ｐ＞０．０１）,而且重复性均好。可根据实验室条件选择测定方法。     

Flt3配体胞外域的原核表达纯化及活性鉴定

目的:构建pET32a(+)-hFLext原核表达载体,诱导hFLext蛋白表达、纯化及活性鉴定.方法:以人淋巴细胞cDNA文库为模板,克隆hFlext,构建pET32a(+)-hFLext重组表达载体.转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导蛋白表达,镍珠亲合层析纯化蛋白,SDS-PAGE及Western blot鉴定.细胞增殖实验检测其生物学活性.结果:成功克隆获得hFLext,并构建了pET32a(+)-hFLext重组表达载体.在大肠杆菌BL21,经1 mM IPTG 30℃诱导12 h,成功表达Trx-hFLext融合蛋白,主要以包涵体形式存在.经8M尿素变性包涵体蛋白,逐步透析复性,镍珠亲合层析纯化蛋白,SDS-PAGE及Western blot鉴定,成功获得高纯度的Trx-hFLext融合蛋白.细胞增殖实验证实其具有生物学活性,能够有效刺激脐血细胞增殖.结论:成功构建了pET32a(+)-hFLext重组表达载体,表达、纯化了具有生物学活性的Trx-hFLext融合蛋白,为造血干/祖细胞的体外扩增研究奠定了基础.     

PLT,MPV,PDW对单采血小板产品聚集的影响

目的：探讨血小板含量（PLT）,血小板平均分布宽度（PDW）,血小板平均体积（MPV）对单采血小板聚集的影响,方法：随机抽取68例血小板捐献者,均成功捐献单采血小板,分为聚集组和对照组。献血前抽取静脉血,采用麦道尼克CA620血细胞分析仪进行血细胞分析,检测PLT,MPV,PDW。结果：聚集组（%）PDW 17.5±1.8,高于对照组（%）PDW12.1±0.9（P〈0.05）。聚集组（fl）MPV 11.0±0.9高于对照组（fl）MPV 7.8±0.8（P〈0.05）,差异有统计学意义,聚集组PLT（187±13.3）×109,对照组PLT（195±11.0）×109,二者无明显统计学差异（P〉0.05）。MPV,PDW分别与PLT进行相关性分析,PLT与MPV无显著相关（r=0.132,P〉0.05）;PLT与PDW无显著相关（r=0.147,P〉0.05）。结论：单采血小板产品出现聚集,其捐献者PDW,MPV高于单采产品正常捐献者,与献血者PLT计数无明显关系。     

时钟基因Bmal1促进血管平滑肌细胞增殖

摘要 目的：观察时钟基因Bmal1的过表达对血管平滑肌细胞增殖的影响,进一步探讨生物节律对于血管发育的具体影响。方法：采用包装GV341-Bmal1载体的慢病毒转染的方法构建大鼠胸主动脉平滑肌细胞（A7R5）稳定转染Bmal1的细胞系,实时定量PCR和细胞爬片Bmal1的免疫荧光染色的方法判断所构建细胞系是否稳定过表达Bmal1,细胞爬片Ki67的免疫荧光染色的方法观察时钟基因Bmal1的过表达对血管平滑肌细胞增殖的影响。结果：实时定量PCR结果显示稳定转染Bmal1组细胞Bmal1的表达是对照组的11.2倍（P<0.01）;细胞爬片的免疫荧光染色结果显示稳定转染Bmal1组细胞BMAL1的表达明显升高（P<0.05）,且稳定转染Bmal1组Ki67阳性细胞比例明显升高（P<0.05）。结论：通过慢病毒转染的方法成功构建了血管平滑肌细胞稳定转染Bmal1的细胞系,细胞片Ki67的免疫荧光染色结果显示Bmal1的过表达促进了血管平滑肌细胞的增殖。