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1.
用发光物质N-氨基丁基N-乙基异鲁米诺(ABEI),采用碳二亚胺缩合法,成功地标记了动物及植物钙调素(CaM),标记率为[ABEI]/[CaM]≈0.8-0.9.对ABEI标记CaM的反应条件、结合物的质量和保存时间进行了观察.此标记物稳定,-20℃可保存10个月以上,适用于化学发光免疫法测定生物样品中CaM含量.
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2.
为了探讨氟康唑作用机制,观察它对热带念珠菌作用后存活率、活性氧(Reactive oxygen species,ROS)、线粒体膜电位(Mitochondrial membrane potential,△Ψm)和细胞周期的变化。参照NCCLS M27-A方案的微量稀释法测定氟康唑对热带念珠菌的最低抑菌浓度(MIC);热带念珠菌与不同浓度氟康唑共同培养后用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)分析热带念珠菌存活率、ROS、线粒体膜电位△Ψm和细胞周期的变化。结果表明,氟康唑作用后,热带念珠菌氟康唑耐药株的存活率、ROS、线粒体膜电位△Ψm和细胞周期各期比例均没有明显变化;而热带念珠菌氟康唑敏感株的存活率和线粒体膜电位△Ψm明显下降,ROS明显升高,而且大部分热带念珠菌阻滞于G2/M期,并出现明显凋亡峰,呈一定的时间剂量依赖关系。自由基清除剂谷胱甘肽抑制热带念珠菌ROS的产生,阻止细胞周期G2/M期阻滞和降低凋亡。由此可见,氟康唑可能通过刺激热带念珠菌产生过多ROS,并使线粒体膜电位△Ψm下降,从而诱导热带念珠菌凋亡。
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3.
对1971—2000年陇东塬区气象资料分析表明,该区气温呈现出明显的线性上升趋势,且以冬季和春季增温为主。增温表现为平均气温、最高气温和最低气温同时上升。最高气温以季节转换时升幅最大,最低气温多数时间呈现上升趋势,且升温较最高气温显著。最高气温和最低气温均以12月上升最为显著。在气候变暖的趋势下,蒸发量显著增大,界限温度初日提前、终日推后,气温稳定通过0℃和10℃积温增加,无霜期延长,春秋土壤水分减少等。降水量、日照时数、太阳辐射和空气相对湿度等农业气象要素的整体变化不显著。认为气候变暖引起的多要素变化对农业的影响有利有弊,农业管理部门应根据当地气候变化特征,及时调整种植结构,优化种植模式,趋利避害,充分挖掘气候资源潜力,提高农业经济效益。
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4.
金黄色葡萄球菌简称金葡菌,是一类革兰阳性需氧或兼性厌氧菌,可导致化脓性感染、肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等局部感染,以及败血症、脓毒血症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决其产生的毒素和侵袭性酶,其中溶血素已经成为该细菌的一个重要致病因子。本文对金黄色葡萄球菌溶血素的分子特征、作用机制、免疫预防及临床应用方面的研究进展进行综述。
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5.
目的 了解假丝酵母菌血流感染患者常见病原菌分布及药物敏感性情况,评估 (1,3)βD葡聚糖检测(G试验)联合真菌培养在假丝酵母菌血流感染诊治中的应用价值。 方法 回顾性分析浙江省人民医院2014年1月至2018年12月假丝酵母菌血流感染患者的病原菌分布及药物敏感状况,同步分析G试验检测结果。 结果 假丝酵母菌血流感染病原菌以白假丝酵母菌为主。所检出的90株假丝酵母菌对两性霉素B最为敏感,敏感率为100.00%;对5氟胞嘧啶、伏立康唑、氟康唑和伊曲康唑的敏感率分别为98.89%、90.00%、87.78%和77.78%。热带假丝酵母菌对伏立康唑、氟康唑和伊曲康唑的敏感率分别为56.25%、50.00%和43.75%,光滑假丝酵母菌对伊曲康唑敏感率仅为58.33%。假丝酵母菌血流感染患者、局部假丝酵母菌感染患者血清(1,3)βD葡聚糖水平高于对照组,差异有统计学意义(t=6.576、P结论 G试验可作为假丝酵母菌血流感染的诊断参考依据,血清(1,3)βD葡聚糖水平与假丝酵母菌感染的严重程度有关。G试验联合真菌培养在假丝酵母菌血流感染诊治中具有重要作用,有助于临床早期诊断和监测治疗。
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6.
【目的】基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)法基于微生物的特征蛋白指纹图谱鉴定菌种,本研究利用基因组学和MALDI-TOFMS技术鉴定放线菌纲细菌的核糖体蛋白质标志物。【方法】从MALDI-TOF MS图谱数据库选取放线菌纲代表菌种,在基因组数据库检索目标菌种,获取目标菌株或其参比菌株的核糖体蛋白质序列,计算获得分子质量理论值,用于注释目标菌株MALDI-TOFMS指纹图谱中的核糖体蛋白质信号。【结果】从8目,24科,53属,114种,142株放线菌的MALDI-TOFMS图谱中总共注释出31种核糖体蛋白质。各菌株的指纹图谱中核糖体蛋白质信号数量差异显著。各种核糖体蛋白质信号的注释次数差异显著。总共15种核糖体蛋白质在超过半数图谱中得到注释,注释次数最高的是核糖体大亚基蛋白质L36。【结论】本研究找到了放线菌纲细菌MALDI-TOF MS图谱中常见的15种核糖体蛋白质信号,可为通过识别核糖体蛋白质的质谱特征峰鉴定放线菌的方法建立提供依据。
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7.
目的了解本地区万古霉素耐药肠球菌(Vancomycin resistant Enterococci,VRE)耐药基因型别及耐药性,为临床治疗提供依据。方法用PCR方法检测56株VRE的耐药基因vanA、vanB、vanC、vanD、vanE和vanG;用K-B法检测其对临床常用14种抗菌药物的药敏,并用肉汤稀释法检测万古霉素和替考拉宁的药敏。结果 56株VRE中,vanA阳性的43株;vanB、vanC、vanD、vanE和vanG阳性0株;未检测到万古霉素耐药相关基因的13株。2011-2014年万古霉素和替考拉宁的MIC值呈逐年向左漂移趋势,与同期替考拉宁的使用有关。结论本研究所收集VRE对万古霉素的耐药大部分为高水平耐药,所携带的耐药基因类型主要为vanA,另有其他未知基因型以及少数vanA阳性但是表现为万古霉素敏感菌株。
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8.
肠球菌为革兰阳性(G+)球菌,广泛分布于自然环境及人和动物消化道内,既往认为肠球菌是对人类无害的共栖菌。自20世纪80年代以来,肠球菌严重感染的发生率和病死率明显升高,肠球菌成为了院内感染的重要病原菌,不仅可引起尿路感染,皮肤软组织感染,甚至危及生命的腹腔感染、败血症、心内膜炎、脑膜炎等,在败血症中肠球菌为第三位的病原菌,仅次于凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌。由于肠球菌对多种抗菌药物具有天然耐药(固有耐药)和获得性耐药的特性,许多常用抗菌药物活性降低,往往造成临床治疗失败。为此,相研究对有关肠球菌的耐药机制的相关文献进行综述,以利于同道们进一步研究。
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9.
目的 探索不同培养基、不同培养时间和不同蛋白质提取方法对侵袭性丝状真菌质谱鉴定准确率的影响, 旨在提高基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术鉴定侵袭性丝状真菌的准确率。
方法 采用分子生物学方法为金标准, 同时运用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术对所收集临床丝状真菌进行鉴定。根据分子生物学的鉴定结果, 去除VITEK-MS v3.0数据库中没有的菌株, 其余菌株接种在沙氏葡萄糖琼脂(SDA)、马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)和察氏培养基(CA)3种不同的培养基中, 采用2种不同的蛋白质提取方法(甲酸乙腈法和磁珠法), 获得了不同培养时间点(2、3、5、7和9 d)的特异性质谱指纹图谱。
结果 不同丝状真菌蛋白质提取方法进行比较, 甲酸乙腈法总鉴定准确率为79.8%, 磁珠法总鉴定准确率为77.5%, 2种丝状真菌蛋白质提取方法的质谱鉴定准确率差异无统计学意义(χ 2 =1.040, P =0.308)。不同培养基进行比较, SDA培养基总鉴定准确率为90.7%, PDA培养基总鉴定准确率为81.4%, CA培养基总鉴定准确率为67.4%, 3种不同培养基的丝状真菌质谱鉴定准确率差异有统计学意义(χ 2 =36.609, P < 0.001), 其中使用SDA培养基鉴定准确率最高, 使用CA培养基鉴定准确率最低(SDA vs PDA, χ 2 =7.748, P =0.005;SDA vs CA, χ 2 =35.131, P < 0.001;PDA vs CA, χ 2 =10.994, P =0.001)。不同培养时间进行比较, 丝状真菌培养2、3、5、7和9 d后的质谱总鉴定准确率分别为64.3%、88.4%、89.1%、79.1%和78.3%, 不同培养时间的质谱鉴定准确率差异有统计学意义(χ 2 =32.274, P < 0.001)。培养3 d和培养5 d的质谱鉴定准确率优于培养7 d和培养9 d的质谱鉴定准确率, 培养2 d的质谱鉴定准确率明显低于其他时间(3 d vs 5 d, χ 2 =0.039, P =0.844;7 d vs 9 d, χ 2 =0.023, P =0.879;3 d vs 7 d, χ 2 =4.095, P =0.043;2 d vs 9 d, χ 2 =6.139, P =0.013)。
结论 侵袭性丝状真菌使用SDA培养基培养3 d, 运用甲酸乙腈法提取蛋白质进行质谱鉴定最理想。
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10.
使用地面试验田平行观测资料,就甘肃陇东黄土高原冬小麦对气候变暖的响应进行了比较分析。结果表明,1981年以来,冬小麦对气候变暖的响应主要表征为全生育期与越冬期的缩短,返青期与收获期提前,而越冬前和返青后的生长期总日数并无明显变化;各发育阶段对增温的响应差异明显,增温使营养生长阶段的返青至起身至拔节和生殖生长阶段的开花及成熟日期提前,乳熟日期和开花至成熟期间的总日数无明显变化,但增温使生殖生长阶段的开花至乳熟有延长趋势,而乳熟至成熟期有缩短趋势。籽粒重随≥10℃积温的增加而增加,随3月至收获期最高气温的升高而减少;产量随平均最低气温的升高和≥0℃、≥5℃、≥10℃和≥15℃积温的增加而增加,随≥20℃积温的增加而减少,表明高温天气增加对冬小麦产量有一定程度的逼熟减产负作用产生。
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