猪源乳酸菌的分离鉴定及部分生物学特性

目的 筛选出安全无毒可食用的乳酸菌。 方法 以仔猪粪便为样品,分离筛选出1株乳酸菌,经理化鉴定和16S测序,鉴定为乳酸片球菌,对其进行生长曲线、产酸能力测定,抗逆性、黏附性和抑菌能力等特性分析。 结果 该菌株在8 h达到稳定期,12 h菌液pH值为4.51,抗逆性、黏附性和抑菌能力等特性较为优秀。 结论 该菌株具有很好的生物学特性,可作为优秀的食用菌种应用于动物微生态制剂以及猪饲料添加剂中。     

一株硫酸盐还原菌的分离鉴定及生物学特性研究

从处理硫酸盐废水厌氧折流板反应器（Anaerobic battqe reactor,ABR）的污泥中分离到1株硫酸盐还原菌,对该菌株进行了形态、生理生化特性方面的研究,并对16S rDNA序列进行了分析。该菌株为杆状或弧状,大小为（0．5～0．7）μm×（1．4～1．9）μm,革兰染色阴性,芽胞染色阴性,能运动,具有硫酸盐还原功能。菌株最适生长pH为7．0～8．0,喜中性偏碱环境;初始[SO4^2-]为2000mg／L,OD600nm。值为1．206,SO4^2-去除率达到71％;该菌株能分别利用乳酸、丙酮酸、丁酸、乙酸、乙醇、甲醇、葡萄糖作为电子供体,进行硫酸盐异化还原,乳酸最有利于该菌SO4^2-的去除,SO4^2-去除率为91．4％,其次为丙酮酸,达到51．2％。基于16SrDNA序列同源性构建了系统发育树,结果表明此株菌是属于脱硫弧菌属（Desulfovibrio）的硫酸盐还原菌,与Desulfovibrio具有96．0％的序列相似性。     

猪源肠道乳酸菌的分离与生物学特性研究

目的分离猪消化道中的乳酸菌。方法无菌采集健康猪的新鲜粪便,接种MRS培养基,厌氧培养分离乳酸菌。并对分离菌形态学,生化特性,产酸性,耐酸性,耐胆汁性,高温耐受性,抑菌性等方面进行研究。结果分离到5株嗜酸乳杆菌,分离的细菌对2株致病菌明显具有抑制性。结论为研制高效专一的猪用微生态制剂奠定基础。     

一株肺炎克雷伯菌的分离鉴定及生物学特性分析

【背景】肺炎克雷伯菌是一种人兽共患机会致病菌,可引起多种动物感染且防治难度大。【目的】调查某犀牛驯养场病原菌存在情况。【方法】对随机采集到的6份犀牛粪便进行细菌分离鉴定、耐药情况及相关耐药基因、毒力基因筛查、小鼠致病性试验。【结果】分离到一株肺炎克雷伯菌,分离率为16.67%。分离株对强力霉素、多黏菌素B、杆菌肽等6种抗生素耐药,且携带有五大类共6种耐药基因。检出kfuBC、fimH、ureA、uge、wabG和wcaG这6种毒力基因。在致病性试验中接种浓度为1×10¹⁰ CFU/mL时小鼠死亡率高达80%,死亡小鼠肝脏、肺脏和小肠组织有不同程度的病变。【结论】该犀牛驯养场分离到的肺炎克雷伯菌耐药情况严重,耐药基因与耐药表型的复合率低,耐药机制复杂;毒力基因携带情况与致病性试验结果较符合,研究数据可为驯养场防治该菌的潜在感染提供参考。     

一株沙门氏菌裂解性噬菌体的分离鉴定及生物学特性

【目的】从贝类样品中分离到一株沙门氏菌裂解性噬菌体SLMP1,对其进行鉴定及生物学特性分析。【方法】采用双层平板法从贝类样品中分离沙门氏菌噬菌体SLMP1,观察噬菌斑特征,分析SLMP1的宿主范围;利用聚乙二醇8000沉淀浓缩SLMP1颗粒,用氯化铯等密度梯度离心纯化;采用透射电子显微镜观察纯化的SLMP1颗粒;采用酚-氯仿法提取SLMP1核酸,通过核酸酶处理分析核酸类型;分析SLMP1的热稳定性、pH稳定性、最佳感染复数、一步生长曲线及裂菌效果。【结果】SLMP1噬菌斑直径约2–3 mm,圆形透明、边缘清晰;SLMP1能裂解肠沙门氏菌肠亚种和鼠伤寒沙门氏菌;SLMP1头部呈二十面体,直径约62 nm,含非收缩性尾部,尾长约110 nm,属于长尾病毒科;SLMP1核酸为双链DNA;SLMP1在30–60 °C稳定,在pH 4.0–11.0稳定,最佳感染复数为0.001,感染宿主菌潜伏期为10 min、裂解期为120 min、裂解量为51;SLMP1在液体环境中具有良好的裂菌效果。【结论】SLMP1属dsDNA长尾科裂解性噬菌体,具有沙门氏菌生物抑菌剂的应用潜力。     

一株地黄根腐病病原菌的分离鉴定及生物学特性研究

分离鉴定地黄根腐病的病原菌,对其致病性和生物学特性进行研究.利用平板分离法对地黄根腐病的病原菌进行分离纯化;利用测序技术和遗传进化分析对所得菌株进行鉴定;利用回接试验对所得菌株进行致病性检测;利用生长监测,确定所得菌株的各项生理学特性.获得一株菌落橙黄色,边缘整齐,表面光滑、湿润菌体椭圆形,有疑似出芽现象的真菌;该菌与...     

几株乳酸菌的分离鉴定

通过厌氧分离技术,从鸡肠道和西红柿花面分离得到五株产乳酸细菌,根据《伯杰细菌鉴定手册》（第八版）［１］鉴定ＳＢ１、ＳＢ２４５１、ＳＢ３１５１均为干酪乳杆菌（Ｌ．ｃａｓｅｉ）,Ａ、ＳＡ则可能是乳酸菌的一个新种。五株菌均为同型发酵,乳酸产量均达到９６％以上．对抗生素等药物及低ｐＨ有一定耐受性,是益生素饲料添加剂的优良菌种［２］。     

一株金黄色葡萄球菌噬菌体的分离鉴定与生物学特性

[背景]金黄色葡萄球菌作为一种条件致病菌,在临床感染中扮演着重要的角色,需要研究更多更有效的防治手段.[目的]分离金黄色葡萄球菌噬菌体,研究其生物学特性,从而为金黄色葡萄球菌的替代防治提供理论借鉴.[方法]以金黄色葡萄球菌D085为宿主从污水中分离得到一株噬菌体,命名为vB_SauS_SAP3,用PEG8000浓缩、氯...     

猪源乳酸菌的分离、鉴定及其生物学特性

【目的】将分离自猪肠道粘膜、食糜和粪便的乳酸菌,通过产乳酸能力、生长性能、耐酸和耐胆盐性能及抑菌能力评价,筛选适应养猪生产的潜在益生特性的菌株。【方法】共分离获得155株乳酸菌纯菌株,从中筛选出4株产酸能力较强的乳酸菌,结合生理生化试验及细菌16S rRNA测序鉴定其种属,评价候选乳酸菌的生长情况、耐酸、耐胆盐及抑菌特性。【结果】综合变色时间(8 h)、pH值(3.9)和乳酸含量(100 mmol/L),筛选出4株(L45、L47、L63和L79)候选菌株,经鉴定依次为罗伊氏乳杆菌、植物乳杆菌、约氏乳杆菌和粪肠球菌。该4株乳酸菌均可在体外快速生长;L47和L79能够耐受pH 2.5的酸性环境,L47能够耐受0.5%胆盐环境;各乳酸菌上清液与指示菌共培养,发现对E coli K88和沙门氏菌均产生了抑制作用,其中L47上清液对指示菌的抑制作用较强。【结论】L47具有较好的产酸性能与生长性能、可耐受猪胃酸和肠道胆盐环境,对E.coli K88和沙门氏菌具有较好的抑制作用,说明该乳酸菌具有潜在的益生特性。     

牙鲆肠道乳酸菌的分离和鉴定

目的：根据微生态学原理,从健康牙鲆的肠道固有菌群中分离乳酸菌。方法：需氧与厌氧培养法。结果：两种方法获得了不同的结果,用LBS（pH6.5）直接分离,从19株分离菌中只获得6株乳酸菌,其中1株P15为乳杆菌;而用LBS（pH5.4）和SL(pH5.4）先富集后分离得到了许多单一的乳杆菌菌落。对所分离的乳杆菌进行生化鉴定,均符合该菌的生化特征。牛津杯抑菌试验显示,乳酸菌对弧菌均有抑制作用,其中乳杆菌P15在pH6.8和pH7.5生长良好,并对弧菌有强力的抑制作用;而在pH8.0和pH8.5时该菌生长不良且无抑菌活性。     

大熊猫肠道芽孢杆菌的分离鉴定及部分生物学特性

【目的】分析大熊猫肠道中芽孢杆菌的种类、纤维素分解能力、抗微生物作用和常用抗生素药物敏感性。【方法】利用芽孢耐高温特性分离菌株,基于16S r RNA基因序列构建系统发育树,通过测量芽孢杆菌在刚果红纤维素培养基上的分解圈分析其纤维素分解能力,采用牛津杯法测定芽孢杆菌的抑菌能力,结合软件分析抑菌能力和进化树之间的关系,通过PCR调查芽孢杆菌的抗菌肽分布规律,最后通过药敏试验检测芽孢杆菌是否对常用抗生素敏感。【结果】共分离得到21株芽孢杆菌;进化树显示,这些芽孢杆菌分为6个类别(Category);羧甲基纤维素钠水解结果显示,所有菌株均能分解纤维素;大部分芽孢杆菌菌株对3种肠道病原菌有较强的抑制能力,聚类分析表明,菌株的抗菌能力与基于16S r RNA基因的分类有一定的关联性;66.67%(14/21)的菌株中可以检测到2个或3个抗菌肽基因;药敏试验结果显示,菌株整体药物耐受率低,仅为7.54%(19/264),但仍有少数菌株对抗生素耐受。【结论】分离菌株种类丰富,分布平均,且均具有纤维素分解能力。21株菌株都含有抗菌肽基因,代谢产物对3种肠道病原菌具有明显抑制作用。常用抗生素耐受性低,对规范临床用药具有指导性。     

圈养大熊猫肠道乳酸菌分离及益生特性

【背景】大熊猫数量稀少、繁殖困难,在其生长过程中极易感染消化系统疾病甚至死亡。【目的】分析圈养大熊猫肠道可培养乳酸菌的群落结构与功能,筛选具有益生特性的乳酸菌菌株,为大熊猫消化系统疾病的预防和肠道微生物研究提供理论参考及菌种资源。【方法】采用3种培养基分离大熊猫粪便中的乳酸菌,通过革兰氏染色镜检和过氧化氢试验对分离的菌株进行初步鉴定,基于BOXA1R-PCR图谱遗传多样性选取代表菌株进行16S rRNA基因测序分析并进行主成分分析(principal component analysis, PCA),同时分析乳酸菌菌株安全性和益生特性。【结果】通过初步鉴定共分离获得58株乳酸菌,根据BOXA1R-PCR结果挑选20株菌进行测序,结果显示20株菌分属于明串珠菌属(Leuconostoc)、肠球菌属(Enterococcus)、魏斯氏菌属(Weissella)和链球菌属(Streptococcus)这4个属,主成分分析结果表明不同年龄段的大熊猫肠道乳酸菌群落结构存在差异。20株乳酸菌均不溶血,17株乳酸菌对11种抗生素均敏感;11株菌耐pH值2.0酸性条件,14株菌对0.3%的胆盐具有良好...     

一株耐盐酵母的分离、鉴定及其生物学特性

以洋河酒厂的酒曲为材料,首先利用盐浓度梯度富集培养和氯化三苯四唑(TTC)染色法初筛获得18株酵母菌株,再通过杜氏小管产气及摇瓶发酵实验,从18株初筛菌株中分离得到1株在1. 4 mol/L NaCl浓度下生长性能较好的菌株,命名为W58。经形态观察和26S rDNA基因序列比对分析,该酵母菌株被鉴定为1株库德里阿兹威氏毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)。对菌株的生长性能及耐受性进行研究发现:该菌最适生长温度为30℃,最适pH为6. 0,在高盐条件下(1. 4 mol/L NaCl),其胞内海藻糖的积累显著增加,比对照菌株高28. 6%。此外,菌株W58在高盐条件下,其ATPase活性比对照菌显著提高(约3倍)。综上所述,菌株W58在高盐条件下能通过胞内积累海藻糖以及维持一定的ATPase活性抵抗外界环境压力。     

水貂肠炎病毒山东株分离鉴定及生物学特性分析

【目的】本研究旨在研究水貂肠炎病毒(mink enteritis virus,MEV)的基因组遗传进化特征。【方法】对采自山东境内水貂养殖场的109份水貂腹泻样品进行MEV的分离和鉴定,利用血凝和血凝抑制试验、多步生长曲线绘制以及蛋白的三级结构模拟等,对分离毒株生物学特性进行分析,通过重叠PCR对分离株进行全基因扩增,使用MegAlign进行序列同源性比对分析,利用DNAMANV6对基因组5’末端和3’末端回文结构进行预测,应用MEGAV6进行遗传进化分析。【结果】共分离得到5株病毒,经电镜观察和间接免疫荧光试验鉴定为MEV毒株,分别命名为MUTQS-1-5,GenBank登录号分别为OK275645、OK275646、OK275647、OK275648和OK275649;各分离株5’-和3’-UTR分别由长回文序列组成,具有典型的细小病毒基因组末端的茎环样结构,NS1和VP2基因的推导氨基酸序列存在多个非同义突变位点,其中NS1蛋白的E/Q545V位氨基酸突变,以及VP2蛋白的F267Y、Y324I位氨基酸突变为首次在MEV上发现;生物学特性分析表明,上述突变并未明显改变病毒的血凝及...     

一株分离自玉米浸渍水的乳酸菌的鉴定

在玉米淀粉的生产过程中,浸渍玉米籽粒是非常重要的工艺过程。在玉米籽粒浸渍过程中,添加乳酸杆菌制剂可以缩短浸渍时间［2,3］,加强浸渍效果,提高玉米淀粉的产量和质量。在此项研究中,使用了一株分离自玉米浸渍水的杆状细菌。1材料和方法1．1菌株：HW106,分离自玉米浸渍水。1．2培养基：番茄汁培养基,改良基础合成培养基等,具体成份略。1．3乳酸定性分析：纸上层析方法卜1。1．4培养液浊度测定：450urn波长处的吸光度表示。1．5产酸的同化实验方法：液体试管方法,用待试化合物替代改良基础合成培养基中的葡萄糖或硫酸铝,接入细…     

一株产共轭亚油酸乳酸菌的鉴定及其特性

从酸菜汁中分离筛选到一株产共轭亚油酸(CLA)能力较高的乳酸菌。经鉴定,确定为植物乳杆菌Lactobacliius plantarum。微氧条件可提高CLA的产量,催化亚油酸(LA)生成CLA的酶受着LA的诱导。37℃对细胞生长和CLA生成最为有利。对数生长期为6～12h,18h后进入稳定期。在14～22h,CLA生成量快速增加,24h时达到最高值。该菌的培养物经萃取、甲酯化后,进行了气相色谱分离,生成的CLA产物为c9/t9,c11-CLA和t10,c12-CLA异构体的混合物。     

海参肠道中乳酸菌的分离鉴定及活性物质研究

从辽宁大连海域的海参肠道中经初筛和复筛分离得到一株具有广谱抑菌活性的乳酸菌HS-R13。经过16S rDNA序列同源性比对及系统发育树分析,鉴定该菌株为乳酸片球菌属(Pediococcus)。通过抗菌作用的排酸实验、过氧化氢排除实验和蛋白酶敏感实验以及Tricine-SDS-PAGE电泳,初步确定该菌株所产生的抗菌活性物质为多肽类,它对李斯特氏菌,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌等常见的食品病原菌有明显抑制作用。生物学特性研究表明,该活性物质对在不同的酸碱度及高温条件下,均能保持较高活性,为海洋源细菌素的研究提供了基础。     

一株猪葡萄球菌的分离鉴定、生物学特性研究及全基因组测序分析

【背景】2021年6月,广东省茂名市某散养户送检了一头发病仔猪,猪身上长有脓疱,四肢关节肿大,关节内可见脓液。【目的】确定引起仔猪发病的病原菌,分析其药物敏感性,为临床用药提供指导;对分离菌株进行全基因组序列分析,挖掘其毒力因子和耐药基因,揭示该菌致病和耐药的分子机制。【方法】取关节脓液分离细菌;通过革兰氏染色、16S rRNA基因和全基因组测序分析,鉴定细菌种类;通过溶血试验、血浆凝固酶试验和生长曲线测定,确定分离菌株的溶血活性、血浆凝固酶活性和生长特性;用小鼠感染模型评估分离菌株的致病性;用纸片扩散法测定分离菌株的药物敏感性;通过全基因组序列分析挖掘分离菌株的毒力因子和耐药基因。【结果】分离菌株被鉴定为猪葡萄球菌(Staphylococcus hyicus);该菌不溶血,无血浆凝固酶活性,在胰蛋白胨大豆肉汤培养基中于37℃、120r/min条件下生长良好;小鼠感染试验结果显示,该菌具有高致病性;药敏试验结果显示,该菌对苯唑西林、大观霉素等7种药物敏感,对青霉素G、红霉素等9种药物耐药;全基因组序列分析结果显示,该菌携带多个毒力因子和耐药基因。【结论】从发病仔猪的关节脓液中分离到一株猪葡萄球菌,可用苯唑西林、大观霉素等药物防控该菌感染;解析了该菌的基因组信息,为后续深入研究该菌致病和耐药的分子机制奠定了基础。     

一株福氏志贺氏菌噬菌体的分离鉴定及其生物学特性

【背景】志贺氏菌是一类能引起人和动物腹泻的致病菌,由于抗生素滥用导致其耐药问题日益严重,寻找新的抗菌药物和治疗方法成为目前亟待解决的问题。【目的】检测志贺氏菌对肉鸡的致病性,分离纯化出一株可裂解强致病性志贺氏菌的噬菌体,并对其生物学特性进行研究。【方法】从病鸡肠道黏膜分离志贺氏菌;以健康肉鸡为动物模型进行攻毒,测定强致病性菌株的耐药性;并以此为宿主菌分离噬菌体,聚乙二醇(Polyethylene Glycol,PEG)沉淀法纯化浓缩噬菌体后,用透射电子显微镜观察其形态特征。利用双层平板法测定噬菌体的宿主谱、最佳感染复数、一步生长曲线、pH和热稳定性对噬菌体活性的影响。【结果】分离得到26株志贺氏菌,分别命名为BDS1-BDS26,其中BDS8致病性最强,经鉴定属于福氏志贺氏菌,而且存在多重耐药性,灌喂后的肉鸡出现严重腹泻和血便;解剖病症主要表现为心脏肥大、肠系膜出血明显等。以BDS8为宿主菌,分离得到噬菌体ΦDS8。透射电镜结果显示噬菌体ΦDS8的头部呈二十面体形状,直径61±2 nm,尾长165±2 nm,属长尾噬菌体科。噬菌体ΦDS8在pH 4.0-10.0、50℃以下范围内能保持...     

10株水痘带状疱疹病毒的分离鉴定与生物学特性

用Vero-E6细胞从12例水痘及带状疱疹病人水疱液中分离到10株病毒,分离阳性率为83.3%.10株病毒均具有使感染细胞圆缩、融合、脱落等典型的VZV局灶性细胞病变(CPE)特点,CPE随着传代次数增加而加快.用带状疱疹恢复期病人血清作间接免疫荧光染色镜检,可见典型的感染细胞核内荧光块.10株病毒感染细胞制成的抗原片,检测5例带状疱疹病人急性期及恢复期血清,荧光抗体滴度均有4倍以上增高.VZV对Vero细胞敏感;对沙鼠肾,胎兔肾,胎豚鼠肾、肺、脾原代单层细胞不敏感;对乳小白鼠不敏感.毒种在-20℃保存一周内死亡;但在30%脱脂牛奶、20%小牛血清及10%山梨醇Eagle's液中,液体或真空冷冻干燥-100℃可保存二年以上.