感染叶锈菌的小麦细胞间隙液中激发子的定性及初步分离

感染叶锈菌后小麦叶片细胞间隙液(1wF)中有激发子存在,它(们)能诱导寄主PAL、PO活性的增强及细胞过敏性坏死的产生。这种有诱导活性的物质分别用NaIO4和蛋白酶处理证明含有糖基和蛋白质成分,可能是糖蛋白。IWF经凝胶过滤分离后,各部分诱导不同的防卫反应的活性强度不等。因此IWF中可能含有几种不同成分的激发子,或是同种成分而聚合度不同的激发子。     

RFP_（134）对UMR106细胞EGF受体酪氨酸蛋白激酶的调节作用

以大鼠成骨肉瘤细胞（ＵＭＲ１０６）为模型,研究了表皮生长因子（ＥＧＦ）对其受体酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）的调节作用。以本实验室从植物中提取纯化的二萜类活性物质（ＲＦＰ１３４）为诱导分化剂,观察了ＲＦＰ１３４对ＵＭＲ１０６细胞ＥＧＦ受体ＴＰＫ的活性和磷酸化作用的影响,并与ＲＡ和ＲＦＰ１３４＋ＲＡ处理细胞做了比较,结果显示ＥＧＦ与其受体结合后能激活ＴＰＫ,使ＴＰＫ活性增加２倍．ＲＦＰ１３４,ＲＡ,ＲＦＰ１３４＋ＲＡ处理细胞后,分别降低ＥＧＦ诱导的受体ＴＰＫ活性５０％,４３％,５５％,降低磷酸化ＴＰＫ含量５５％,３６％,５３％。从结果中发现无ＥＧＦ刺激的细胞也具有受体ＴＰＫ磷酸化作用,用ＲＦＰ１３４,ＲＡ,ＲＦＰ１３４＋ＲＡ处理细胞,分别降低受体磷酸化ＴＰＫ含量５９％,４０％,５７％,而且我们发现用ＥＧＦ诱导的细胞受体ＴＰＫ含量高于无ＥＧＦ作用的细胞．提示ＵＭＲ１０６细胞本身可能具有受体ＴＰＫ活性,能够引起细胞受体自动磷酸化,ＥＧＦ刺激后ＴＰＫ的磷酸化作用增强,可见ＲＦＰ１３４对ＥＧＦ诱导的ＴＰＫ磷酸化和无ＥＧＦ诱导的受体自动磷酸化都具有明显的抑制作用,（并强于ＲＡ）这可能与在第二信使水平上阻抑ＰＴＰＫ活性密切相关     

cAMP与小鼠胸腺细胞凋亡相关性的研究

本文采用Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ诱导小鼠胸腺细胞凋亡,探讨胞内ｃＡＭＰ浓度上升与细胞凋亡的相关性,采用透射电镜,ＦＣＭ和ＭＴＴ法,结果显示：Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ能诱导小鼠胸腺细胞凋亡,不同浓度其作用程度不同,已由ＦＣＭ证实,透射电镜显示细胞凋亡的形态学特征,Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ激活胞内腺苷酸环化酶,产生大量ｃＡＭＰ,其诱导细胞凋亡数目最多的浓度,ＭＴＴ法显示其光密度（ＯＤ５７０）值最高,表示细胞活性最强。我     

iNOS在不同种属血管细胞中诱导表达差异的比较研究

为了探讨不同种属血管细胞中ｉＮＯＳ基因诱导表达的差异及其分子机制,采用Ｎｏｒｔｈ－ｅｒｎ印迹、电泳迁移率改变分析（ＥＭＳＡ）和细胞转染实验对ｉＮＯＳ基因在人、牛、大鼠血管内皮细胞（ＥＣ）和兔、大鼠平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）中的诱导表达和转录调控机制进行了研究．结果显示,ＩＬ－１β可诱导人、大鼠的ＥＣ和大鼠的ＶＳＭＣ表达ｉＮＯＳ,但对兔ＶＳＭＣ和牛ＥＣ无诱导作用．在ＩＬ－１β＋ＴＮＦ－α＋ＬＰＳ作用下,人和大鼠血管细胞ｉＮＯＳ的表达活性显著高于牛和兔,同一种属动物的ＶＳＭＣ比ＥＣ更易被诱导活化．用含有大鼠ｉＮＯＳ基因上游－１０３７～－４３８片段的报告基因转染这些细胞,经细胞因子和ＬＰＳ处理后,被转染细胞的ＣＡＴ活性变化与细胞的ｉＮＯＳ表达活性相一致．上述结果表明,ｉＮＯＳ表达调节具有种属特异性和细胞特异性．ＥＭＳＡ证实在不同种属的ＥＣ和ＶＳＭＣ中,与ｉＮＯＳ基因表达调控区（－１０３７～－７８７）相互作用的蛋白因子是不均一的．提示不同种属血管细胞内特异转录因子的种类及浓度不同和（或）反式因子与顺式元件相互作用的方式不同可能是这种差异的分子基础．     

孤生受体的相互作用对视黄酸应答元件的影响

孤生受体ＣＯＵＰ－ＴＦ和ｎｕｒ７７的功能及其作用机理仍未阐明．以ＤＮＡ瞬时转染和测定氯霉素乙酰转移酶（ＣＡＴ）活性,以及凝胶阻抑测定,分析ＣＯＵＰ－ＴＦ和ｎｕｒ７７的相互作用对视黄酸应答元件（ＲＡＲＥｓ）的影响．实验表明,ＣＯＵＰ－ＴＦ通过降低ＲＡＲＥｓ的基础活性,来增强ＲＡＲＥ对视黄酸（ＲＡ）的敏感性,而ｎｕｒ７７则拮抗ＣＯＵＰ－ＴＦ的作用．ｎｕｒ７７能够加强不同ＲＡＲＥｓ的转录活性,并且与ＲＡ的诱导无关．结果证实,ｎｕｒ７７通过与ＣＯＵＰ－ＴＦ的直接作用而对ＲＡＲＥｓ产生影响,从而抑制ＣＯＵＰ－ＴＦ与ＲＡＲＥｓ结合和ＣＯＵＰ－ＴＦ的转录活性     

RFP134对UMR106细胞EGF受体酪氨酸蛋白激酶的调节作用

以大鼠成骨肉瘤细胞（ＵＭＲ１０６）为模型,研究了表皮生长因子（ＥＧＦ）对其受体酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）的调节作用。以及实验室从植物中提取纯化的二萜类活性物质（ＲＦＰ１３４）为诱导分化剂,观察了ＲＦＰ１３４对ＵＭＰ１０６细胞ＥＧＦ受体ＴＰＫ的活性和磷酸化作用的影响。并与ＲＡ和ＲＦＰ１３４＋ＲＡ处理细胞做了比较。结果显示ＥＧＦ与其受体结合后能激活ＴＰＫ,使ＴＰＫ活性增加２倍。ＲＦＰ１３４,ＲＡ,ＲＦＰ     

利用GFP示踪细胞内源性P53活性检测DNA损伤

ＤＮＡ损伤的检测对预防癌症和遗传病等非常重要。采用分子克隆技术,将报告基因—绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）置于ＳＶ４０基本启动子调控下,构建成对照载体ｐＳＶ－ＧＦＰ。在ＳＶ４０基本启动子上游插入寡核苷酸Ｐ５３ＲＥ,构建成示踪载体ｐ５３ＲＥ－ＧＦＰ。转染ＮＩＨ３Ｔ３细胞,以ＧＦＰ示踪细胞内源性Ｐ５３的转录激活活性。紫外线照射或Ｈ２Ｏ２处理转化细胞使ＤＮＡ损伤,诱导细胞内源性Ｐ５３的表达。用激光扫描共聚焦成像系统（ＬＳＣＩＳ）对细胞进行红、绿、蓝三色光融合成像,并测定ＧＦＰ经４８８ｎｍ激发后发出的绿色荧光光密度,验证ＧＦＰ示踪Ｐ５３的特异性。ｐ５３ＲＥ－ＧＦＰ转化细胞３Ｔ３－ＲＥＧ经紫外线照射或Ｈ２Ｏ２处理后,ＧＦＰ的表达增高,处理后１ｈｒ光密度即达到最高水平,随后逐渐降低。血清“饥饿”—非ＤＮＡ损伤处理的３Ｔ３－ＲＥＧ细胞,以及经紫外和Ｈ２Ｏ２处理的对照载体ｐＳＶ－ＧＦＰ转化细胞３Ｔ３－ＳＶＧ,ＧＦＰ的表达无明显增强。实验表明：ＧＦＰ示踪内源性Ｐ５３转录激活活性用于检测ＤＮＡ损伤有很高的灵敏度和特异性,适宜推广应用。     

地塞米松诱导红系细胞凋亡的观察(英文)

正常机体内,红细胞生成素（ＥＰＯ）诱导红系细胞分化,并阻止其凋亡,使其维持机体所需足够的数量。本文采用诱发贫血病毒（ＦＶＡ）诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞所形成的红细胞为实验系统,研究了外界因子？？地塞米松（Ｄｅｘ）对ＥＰＯ作用的影响。取６８周雌性ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,尾部静脉注射含ＦＶＡ的小鼠血清。１５天后,断颈处死。取脾于ＩＭＤＭ中漂洗、剪碎、过滤、离心、制成单细胞悬液,在ＥＰＯ存在下,于平皿中培养至不同的时期后,进行不同浓度、不同时间的Ｄｅｘ处理。取细胞进行：（１）台盼蓝染色计数死细胞数;（２）观察ＤＮＡ电泳图谱;（３）电镜检察细胞学变化。Ｆｉｇ．１表明：随着Ｄｅｘ处理浓度和时间的增加,细胞死亡率也增加。Ｆｉｇ．２表明：１０－４浓度Ｄｅｘ处理,即可使早（１２ｈ）、中（２４ｈ）幼期红细胞凋亡,ＤＮＡ断裂成多聚核小体,产生明显ＤＮＡ梯形带。Ｆｉｇ．３表明：高浓度Ｄｅｘ可以使早幼期红细胞凋亡。电镜观察表明：与对照（Ｆｉｇ．４）比较,Ｄｅｘ处理后,细胞核固缩,染色质沿核膜内面周边凝聚,核周间隙扩张,胞质内出现空泡（Ｆｉｇ．５）;随后细胞破碎,出现大量凋亡小体（Ｆｉｇ．６）。Ｄｅｘ拮抗ＥＰＯ,诱导红系细胞凋亡的现象此     

缺氧诱导因子—1

氧是在细胞内呼吸氧化还原反应中电子的最终接受体。缺氧可以引起急性或长期的生理或病理生理反应,在这些过程中缺氧诱导了许多基因的转录。缺氧诱导因子－１（ＨＩＦ－１）是可与红细胞生成素基因（ＥＰＯ）３＇增强子特异结合的由缺氧诱导的ＤＮＡ结合蛋白,可激活Ｈｅｐ ３Ｂ细胞ＥＰＯ的基因转录。并且由于它可在很多细胞被缺氧诱导,包括生成ＥＰＯ和不生成ＥＰＯ细胞,以及许多缺氧诱导的基因都具有ＨＩＦ－１结合位点等特点     

Forskolin对成骨样细胞蛋白激酶C及三磷酸肌醇的影响

Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ（ＦＳＫ）是一种植物二萜类化合物,为腺苷酸环化酶的特异激活剂,实验发现：ＦＳＫ和作为参照的诱导分化剂维甲酸（ＲＡ）单独或联合应用均可升高胞浆蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性,并降低膜ＰＫＣ活性,ＦＳＫ可使表皮生长因子（ＥＧＦ）诱导的细胞内三磷酸肌醇（ＩＰ３－１,４,５）水平降低至对照组的４４．４％至６７％;ＦＳＫ与ＲＡ合用可显著降低成骨样细胞特征蛋白碱性磷酸酶（ＡＫＰ）的活性。以上结果表明,ＦＳＫ对成骨样细胞内磷脂酰肌醇信息传递体系有深刻影响,可能与其调节细胞的增殖分化有关。     

高效的骨诱导生长因子——成骨蛋白-1

成骨蛋白１（ＯＰ１）又称骨形态发生蛋白７（ＢＭＰ７）,属转化生长因子β（ＴＧＦβ）超家族成员．重组人ＯＰ１（ｒｈＯＰ１）在体内和体外都显示了高效的骨诱导活性,可使多种实验动物的骨缺损满意愈合,有良好的临床应用前景     

不同类型兔2‘,5’—寡聚腺苷酸合成酶的比较研究

新城疫病毒（ＮＤＶ）诱导的兔网织细胞中只含有一种１１０ｋＤ的２’５‘－寡聚腺苷酸合成酶（２’,５‘－ＯＡＳＥ）,而ＮＤＶ诱导的兔脾脏中含有１１０ｋＤ和４０ｋＤ的２’,５‘－ＯＡＳＥ。网织细胞和脾脏中的１１０ｋＤ大酶皆位于核糖体中,脾脏中的小酶在细胞液,核糖体中皆有分布。纯化的兔２’,５‘－ＯＡＳＥ性质研究表明ＮＤＶ诱导的兔 钢织细胞中的Ｐ１１０和ＮＤＶ诱导的兔脾脏中的Ｐ１１０２’,５‘－ＯＡＳＥ是     

水杨酸对黄瓜叶片抗氧化剂酶系的调节作用

分析了水杨酸（ＳＡ）对黄瓜（ＣｕｃｕｍｉｓｓａｔｉｖｕｓＬ．）叶片抗氧化剂酶系活性及活性氧水平的调节作用。不同浓度的ＳＡ（０．５ｍｍｏｌ／Ｌ、１ｍｍｏｌ／Ｌ、２．５ｍｍｏｌ／Ｌ、５ｍｍｏｌ／Ｌ）均能显著地提高被处理叶片超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和过氧化物酶（ＰＯＤ）活性,而且还能诱导同株的非处理叶片中ＳＯＤ和ＰＯＤ活性增加。用１ｍｍｏｌ／ＬＳＡ处理第一片真叶,在处理后６～７２ｈ,ＰＯＤ活性增加了２２％～６７％,同株非处理的第二片真叶ＰＯＤ活性增加了１４％～８６％,但是,在ＳＡ处理后３ｈ之前以及处理９６ｈ之后,ＰＯＤ活性没有变化。ＳＡ能够显著降低超氧物阴离子含量和提高过氧化氢水平,但它对过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性的抑制作用很弱,表明ＳＡ提高体内过氧化氢含量的原因主要是通过提高ＳＯＤ活性而不是抑制ＣＡＴ活性。同工酶分析表明,ＳＡ不能诱导新的ＳＯＤ同工酶,但可以诱导新的ＰＯＤ同工酶。     

青心酮对妊娠高血压综合征胎盘血管内皮和平滑肌细胞内一氧化氮合酶的影响

本文对正常孕妇、妊娠高血压综合征（ＰＩＨ）患者和经青心酮（ＤＨＡＰ）治疗的ＰＩＨ患者等共２４例,应用组织化学分析方法观察胎盘血管内皮细胞（ＶＥＣ）和平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）内一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性的变化。结果表明：正常孕妇胎盘ＶＥＣ和ＶＳＭＣ内ＮＯＳ活性较高;ＰＩＨ胎盘ＶＥＣ和ＶＳＭＣ内ＮＯＳ活性明显减弱,并伴有组织和细胞的形态学损伤;经ＤＨＡＰ治疗后的ＰＩＨ胎盘ＶＥＣ和ＶＳＭＣ细胞ＮＯＳ活性较未经ＤＨＡＰ治疗者明显增加,其组织和细胞损伤也减轻。本研究结果提示胎盘内ＶＥＣ和ＶＳＭＣ细胞的ＮＯＳ减少可能与ＰＩＨ的发生和／或发展有关,青心酮治疗ＰＩＨ的作用可能与ＤＨＡＰ促进胎盘ＶＥＣ和ＶＳＭＣ内一氧化氮（ＮＯ）合成有关。     

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体α链（GM-CSFRα）的克隆与表达

ＧＭ-ＣＳＦ高亲和力受体至少由两条链组成,低亲和力的α链及无结合力活性的β链。本文采用ＲＴ-ＰＣＲ的方法,从ＧＭ-ＣＳＦ依赖细胞株ＴＦ-１中克隆了全长的ＧＭ-ＣＳＦＲα链Ｃｄｎａ（包括信号肽部分）,经酶切及全基因测序鉴定,并分别在原核及真核细胞表达系统中表达。在大肠杆菌中ＧＭ-ＣＳＦＲα以ＧＳＴ融合蛋白形式表达,谷胱甘肽Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析纯化融合蛋白。ＧＳＴＣＳＦＲαＣ无受体活性,推测主要与缺乏翻译后修饰有关。将全基因克隆入真核表达载体Ｐｓｖｌ中,转染ＣＯＳ-７细胞瞬时表达以重建ＧＭ-ＣＳＦ的低亲和力受体,１２５ＩＧＭ-ＣＳＦ平衡结合实验证明转染后的ＣＯＳ-７细胞膜上有受体的表达,Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｉｎｇ显示表达的受体α链分子量略低于ＴＦ-１细胞。胞外区基因（ＣＳＦＲαＢ）克隆入Ｐｓｖｌ构建的Ｐｓｖｌ／ＣＳＦＲαＢ表达载体,转染ＣＯＳ-７细胞后,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表达细胞上清,有单一的反应带,表达上清有ＧＭ-ＣＳＦ的受体活性。     

锰对部分缺失金属原子簇的固氮酶钼铁蛋白的重组作用

棕色固氮菌（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）固氮酶钼铁蛋白经邻菲口罗啉和Ｏ２ 处理后,变为部分缺失Ｐ－ｃｌｕｓｔｅｒ和ＦｅＭｏｃｏ 的失活蛋白,经与由ＫＭｎＯ４、高柠檬酸铁、Ｎａ２Ｓ和二硫苏糖醇组成的重组液保温后,重组蛋白的吸收光谱和对Ｃ２Ｈ２、Ｈ＋ 和Ｎ２ 的还原活性都恢复至与还原钼铁蛋白相似的状态,而它的α－螺旋度和在３８０—５５０ ｎｍ 、６２０—６７０ ｎｍ 的ＣＤ谱虽有明显的恢复,但仍与还原钼铁蛋白有所不同。表明：（１）重组蛋白液既含有在缺失金属原子簇的ＭｏＦｅ蛋白与含Ｍｎ 重组液重组过程中可能组装的ＭｎＦｅ 蛋白,又含有在邻菲口罗啉和Ｏ２ 处理后金属原子簇仍旧完整的ＭｏＦｅ蛋白;（２）ＭｎＦｅ蛋白和ＭｏＦｅ蛋白在固氮能力上可能是相似的,而在结构上却可能略有差异     

网织红百分数法测定rHuEPO体内生物学活性的研究

本文通过对网织红百分数法测定ｒＨｕＥＰＯ体内生物学活性进行研究,找出网织红细胞百分数与ｒＨｕＥＰＯ浓度线性相关的范围。从而确定了用计数网织红细胞百分数的方法测定ｒＨｕＥＰＯ体内生物学活性。提出在ｒＨｕＥＰＯ体内生物学活性测定中选择合适的稀释液至关重要。对（３,３）法测定ｒＨｕＥＰＯ体内生物学活性进行了统计,批间ＣＶ、批内ＣＶ均接近１０％,单次实验ＦＬ％平均数为３１．２６％,并提出鼠间差异是造成ＦＬ％较大的主要原因;对（３,３）法与（２,２）法测定ｒＨｕＥＰＯ体内生物学活性进行比较,发现（２,２）法较（３,３）法更适合用于ｒＨｕＥＰＯ生产过程中ｒＨｕＥＰＯ体内生物学活性的测定。     

作物细胞耐旱保护酶系统对外磁场的反应

作物细胞的耐旱保护酶由过氧化物酶（ＰＯＤ） 、过氧化氢酶（ＣＡＴ） 和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ） 组成。对小麦种子施加０．１Ｔ 的磁场处理使其萌发时细胞中ＰＯＤ 活性提高,幼苗根系和叶片细胞中的ＰＯＤ 活性也发生了变化,叶片的ＰＯＤ 同工酶谱中多出了两个酶带。使用蛋白质合成抑制剂和转录抑制剂发现,ＰＯＤ 活性提高的原因是磁场处理促进了ＰＯＤ 合成的翻译过程。干旱胁迫下,经磁场处理的幼苗叶片细胞中的ＰＯＤ、ＣＡＴ 和ＳＯＤ 活性均比对照高,膜脂过氧化产物丙二醛（ ＭＤＡ） 含量比对照低,表明保护酶系统的功能有所增强。     

bFGF与BDNF对损伤后成年小鼠离体培养嗅觉上皮细胞发育的影响

在成熟神经系统中,嗅觉上皮（ＯＥ）很特殊,它能不断产生新的神经元。本文用细胞培养、组织化学和免疫细胞化学技术对成年小鼠的ＯＥ进行了研究。实验显示：双极细胞ＮＦ、ＮＳＥ、ＭＡＰ２、ＯＭＰ和ｔａｕ蛋白免疫染色为阳性,但ｋｅｒａｔｉｎ免疫染色为阴性,说明双极细胞是神经元。用不同浓度血清的培养基。离体培养成年小鼠的ＯＥ,观察碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）和脑源神经营养因子（ＢＤＮＦ）对ＯＥ细胞数量和突     

PAGE活性染色法分析D.radiodurans过氧化氢酶和起氧化物歧化酶

用ＰＡＧＥＡ活性染色分析了Ｄ．ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ过氧化氢酶（Ｃａｔ）和起氧化物歧化酶（ＳＯＤ）。２种同种异型Ｄ．ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ（Ｒ１和Ｓａｒｋ）的Ｃａｔ在电泳带型上存在差异,两者Ｋａｔ均可分为Ａ、Ｂ和Ｃ３条带,但各带所占比例明显不同,ＳＯＤ的分析结果表明,Ｄ．ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ ＳＯＤ以Ｆｅ＾２＋和Ｍｎ＾２＋离子的嵌合体形式存在,其中Ｆｅ－ＳＯＤ成分占９０％以上。ＰＡＧＥ活性染色法