放射自显影在医学研究中的应用

放射自显影是利用感光乳胶记录被研究材料中放射性物质分布和定位的方法。它的原理和普通照象一样,由于被研究材料中的放射性同位素放出的射线作用于感光乳胶,使感光乳胶中的卤化银感光形成潜影,经显影剂作用后感光的卤化银还原成为黑色的银元素     

压碎法制片技术在植物细胞放射自显影中的应用

放射自显影技术是放射性同位素示踪研究中最常用的方法之一,由于灵敏度高,既能准确定位又能精确定量,对研究生物体内物质的动态具有独特的优点。在植物细胞放射自显影研究中,常用的石蜡切片法虽能制出很薄的连续切片,但实验周期长,材料经脱水与浸蜡之后,易发生收缩,一些醇溶性或脂溶性物质并易产生移位或流失,而影响实验结果。为此,我们进行了研究。     

放射自显影技术应用的现状及未来趋势

放射自显影通常指结合了放射标记探针的分子或组织通过感光材料（如X光胶片）曝光、显影、定影获得金属银颗粒图像的实验技术，它是定性、定量分析与探针结合的靶分子含量及其在组织中分布的传统手段，在生物学基础研究以及临床前新药研究等方面有着广泛的应用。近年来磷屏成像技术的普及显著缩短了放射自显影技术的实验周期，并拓展了在短半衰期正电子放射核素中的应用。本文重点介绍放射自显影技术应用中尚不能全面被非放射性替代技术取代的一些实验工作进展，主要包括某些酶活性的测定、磷酸化位点分析、低丰度核酸检测以及与放射性探针特异结合的靶点（如受体等）在组织中的分布等实验技术工作。适应当前应用趋势的变化对放射示踪共用技术平台的建设，对帮助技术支撑人员提供更好的、具有针对性的技术性服务具有一定的指导意义。     

生物学中的电镜放射自显影术

放射自显影是利用放射性同位素发射的带电粒子(α或β粒子),作用于感光材料的卤化银晶体而产生潜影,再经显影把“像”显示出来,以研究该放射性物质在生物机体(整体的、组织的或细胞的和亚细胞水平的)内的径迹或颗粒定位的一种技术。由于采用各种     

电镜放射自显影术

<正> 电镜放射自显影术是指用电子显微镜观察的放射自显影术。与用光学显微镜观察的放射自显影术比较,具有下列优点:(一)分辨力高,可达0.1微米,比光学的高10倍,因此,能更精确地确定放射源的位置;(二)能把放射性和亚显微结构相联系,因而可用于研究细胞器的功能活动。     

HW4型乳胶在电镜放射自显影术中的应用

在毛主席无产阶级革命路线的指引下,我国的科学技术事业迅速发展,生物学、医学研究中近代技术方法的应用日益广泛,电子显微镜放射自显影术即是其中之一。遵照毛主席关于独立自主、自力更生的教导,我们应用国产HW4型细颗粒电子敏感乳胶(以下简     

植物的放射自显影法

一、前言自从贝克勒耳(H.Becguerel)于1886年发现天然放射性以后,俄国学者于1904年就首次的应用自显影方法研究了天然放射性物质在动物机体内不同组织的分布,但是这     

薄切片的放射自显影术

薄切片是指厚度为0．5～1μm的树脂类切片。文献中称它为厚切片（thicksection）或半薄切片（semithinsectio）,籍以与电镜观察用的薄切片（thinsection）区别。我国已习惯称电镜用的切片为超薄切片,因此,把这类切片称薄切片就能说明其比超薄切片厚,比普通石蜡切片薄的特性。用薄切片作放射自显影具有下列优点：（1）改善分辨力：放射自显影象的分辨力与样品的厚度成反比,薄切片的厚度低于普通石蜡切片,所以其分辨力高于用石蜡切片制作的放射自显影象的。（2）减少人工假象：用薄切片作放射自显影,不需去除包埋剂,因此,提供了平正…     

电子显微镜放射自显影操作方法的比较

电子显微镜放射自显影方法,能够把结构和功能联系起来,对研究某一标记物在细胞内的部位及动力学问题等提供了良好的方法。但此方法有很多细节掌握不好就会影响结果。下面分六个问题谈谈:     

应用放射自显影技术对小鼠小肠上皮细胞的细胞动力学研究

二十多年来,国外学者对小鼠小肠粘膜上皮细胞的细胞动力学进行了较多的研究,但结果不同。据记载:隐窝上皮细胞的细胞周期时间自10小时至38小时不等(Thomus,1974;Cairnie,1965;Bond,1965;Lesher,1961a;Lesher,1961b;Lipkin,1971;Quaster,1959;Cleaver,1967),波动范围较大,且上皮细胞成熟后到毛顶端的经过时间也很不一致,自36小时至3天的均有(sherman,1960;Fry,1961;Quastler,1959;Hughs,1958;Cairnie,1965;Leblond,1959)。     

用电镜放射自显影术研究TMV-RNA在烟叶细胞中的复制

在放线菌素D(AMD)抑制细胞RNA合成时,用3H-尿嘧啶核苷标记TMV侵染的和健康的烟草叶片,经固定,包埋,切片,RNA酶处理及放射自显影后,在电镜下观察。结果表明,3H-尿嘧啶核苷向病毒基因组或其复制中间体的掺入主要发生在细胞核内,叶绿体内有少量掺入,线粒体内未发现有掺入。因此认为TMV—RNA的合成主要是在缅胞核内进行的。切片如先经蛋白酶和RNA酶处理,再进行放射自显影,则自显影上的银粒几乎全部消失。从超薄切片后的剩余样品取小样,用酚一SDS法和Serva纤维素柱层析,从TMV侵染的烟叶中分离到了抗RNA酶的’H—ds—RNA。从而推测复制中间体在体内很可能主要是单链的,其复制过程很可能不经过双链复制型(RF)。提取到的’H一‘is—RNA：,可能是提取过程中的人为产物。     

PCR-SSCP技术在昆虫学研究中的应用

聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术是一种简便、灵敏的突变检测方法。随着该技术的不断发展和完善,其应用也越来越广泛。尤其是近年来该技术在昆虫学研究中涉及了:基因突变位点的检测、昆虫分类鉴定、多样性分析及连锁图谱的构建等多个领域。文章综述PCR-SSCP技术的发现、原理、在昆虫学研究中的应用及其优点和不足之处。     

重组DNA技术在昆虫学中的应用

重组DNA技术即基因工程,亦为人们称做基因克隆或基因操作。重组DNA技术已被应用于昆虫学的基础研究和应用研究中。本文首先对重组DNA技术及基因转移技术(在昆虫学研究中与重组DNA技术配合应用的重要手段)作一简述,然后着重介绍这些技术在昆虫学研究中的应用概况。 重组DNA技术 重组DNA技术就是将DNA从细胞中分离出来,切割成片段,与载体DNA连接,形成重组DNA分子,然后导入宿主细胞,进行复制。     

无花粉蛋白在体内定位的放射自显影研究

天花粉蛋白是从中草药发掘出来的一个植物蛋白性的中期引产和抗增生性滋养层细胞疾病的药物。在临床应用中已累积了大量经验。关于作用机理的研究也进行了各方面的工作(上海实验生物研究所第二研究室,1976)。在小白鼠以间接荧光标记抗体法,追踪了给药后不同时间,“纯制天花粉”抗原分布的动态。结果证明,天花粉蛋白的原     

植物显微自显影及双标记彩色自显影技术的应用研究

放射自显影技术作为示踪研究的一种测定手段,已普遍应用于生物学的各个学科的研究工作中,特别是它具有灵敏度高、定位性强、可保存生物机体及组织细胞的完整,以及自显影标本可以长期保存等特点,更显得具有独到之处。成为研究生物机体和细胞结构与功能之间关系的重要方法之一。     

冷冻取代和干膜显微放射自显影

显微放射自显影技术已经在生物学研究中得到广泛的应用。但由于常规制片一系列操作中出现有各种溶液的取代更替,从而难以对一些水溶性放射性化合物在组织和细胞内的定位予以确切鉴定,同时放射性化合物     

植物组织中光合产物的放射自显影定位

植物光合产物,都为水溶性,不能用常规石腊制片技术进行放射自显影研究。为了定位研究这类水溶性化合物在植物组织中的分布,参考Appleton、Stumpf等的方法,利用我国现有条件,试验了冰冻制片、冻装核4乳胶干板技术,取得了自显影定位照片。其方法如下。     

用放射自显影法测定局部胃粘膜血流量最好

测定胃粘膜血流量的方法很多,但都各有缺点,如氨基比林清除法仅限于测定全胃或小胃粘膜血流量。在局部胃粘膜血流量测定方法中,放射微球法在统计误差和分辨能力方面有一定的缺陷,而多普勒测速计的测定需要插入胃腔;氢气清除法虽然有较高的定位能力,但也仅限于一定数量预先选定的部位,并且要求组织和电极之间有物理性接触。最近W.J.Angerson等采用放射自显影方法测定局部胃粘膜血流量,可     

RAD-seq技术及其在昆虫学研究中的应用

限制性酶切位点关联DNA测序技术(restriction-site-associated DNA sequencing,RAD-seq)是在二代测序技术基础上发展起来的一种简化基因组技术(reduced-representation genome sequencing,RRGS)。RAD-seq利用限性核酸内切酶使基因组片段化,经过修饰后连接含标记的接头构建文库并进行测序。因其具有操作简单、实验成本低、通量高等优点,在分子生态学、进化基因组学、保护遗传学等领域得到应用。目前发展起来的RAD-seq技术主要包括利用稀有酶和物理打断方式进行基因组片段化的mbRAD、利用稀有酶和常见酶组合酶切的方式进行基因组片段化的ddRAD、利用IIB型限制性内切酶得到短片段文库的2bRAD、利用同裂酶和Illumina试剂盒建库的ezRAD和完全利用Nextera试剂盒建库的nextRAD。本文对每种RAD-seq技术的特点及其在昆虫种群遗传学、群落生态学、物种界定、系统发育和遗传连锁图谱构建等研究领域的应用进行了综述。