微细胞(microcell)的制备及其生物学特性

本文比较了单纯用秋水酰胺(1μg/ml)和秋水酰胺(1μg/ml)加细胞松弛素B(1μg/ml)复合处理体外培养的细胞株的微细胞生产率,发现后一种方法大大提高了微细胞的获得率。对于微核化细胞的离心脱核方法以及粗制的微细胞纯化方法亦作了改进。同时研究了微细胞的存活时间以及它的大小等生物学特性。并且研究了CHO Wg3-h SL7 HFC四种细胞在秋水仙胺和秋水仙胺加细胞松弛素B复合处理后的微核率,发现后一种方法能促进细胞的微核化,但不同的细胞株对这两种有丝分裂阻断剂敏感性差异很大,体外未经转化的人的正常成纤维细胞对有丝分裂阻断剂的敏感性与细胞年龄有密切关系,越年轻越敏感。     

微核细胞率与辐照后时间的关系分析

微核测定法,是在染色体分析法的基础上,于本世纪七十年代初期建立的一种细胞遗传学快速测定法。由于其方法简便、观察容易、鉴别可靠而日益受到重视。然而,许多学者只注意到微核细胞率与剂量的关系,对微核细胞率与辐照后时间的关系研究尚少。为此,我们设计了本试验。     

微核细胞率与辐照后时间的关系分析

微核测定法,是在染色休分析法的基础上, 于本世纪七十年代初期建立的一种细胞遗传学 快速测定法。由于其方法简便、观察容易、鉴别 可靠而日益受到重视。然而,许多学者只注意 到微核细胞率与剂量的关系,对微核细胞率与 辐照后时间的关系研究尚少。为此,我们设计 了本试验。     

香烟烟雾水溶物诱发蚕豆根尖细胞微核的研究

本文研究了不同浓度的香烟烟雾水溶物对蚕豆根尖细胞微核的诱变作用,结果表明, 上述水溶物能够引起蚕豆根尖细胞微核率发生敏感性变化,提示蚕豆根尖细胞微核技术可作为一种香烟遗传毒理学检垛方法使用。此外,还对使用该方法的意义以及添加VE对香烟烟雾水溶物微核率的影响进行了讨论。     

转染GFP对结肠直肠癌细胞遗传物质稳定性的影响

为探究绿色荧光蛋白(GFP)对结肠直肠癌细胞遗传物质稳定性是否存在影响,选取3种常用的结肠直肠癌细胞系HCT116,SW480,DLD-1;采用脂质体转染法把GFP转入细胞,统计几种细胞系微核、核芽的比例;分别比较各种细胞系自发微核、核芽和GFP组的差异.结果发现,HCT116细胞中对照组与GFP组的微核细胞率分别为3...     

环境致突变物的蚕豆细胞微核检测

大量新的化合物的合成,原子能的应用,多种工业废物的大量排放,使生命物体的生境条件发生改变,对生物的遗传进化效应产生了深远影响。这使得具有一套高灵敏度、操作技术简单的测试系统来监视环境致突变物的诱变活性及对人体和其他生物的遗传危害显得甚为重要。真核类生物细胞微核测试技术成为一种较为理想的方法。微核（MCN）是真核类生物细胞经辐射或化学诱变剂的作用而产生的一种游离于主核之外的异常结构,和中期细胞染色体畸变情况一样,微核率的大小和用药的剂量或辐射累积效应呈正相关,同时染色体畸变率与微核率之间相关非常显著。因此可以用简便的微核计数法代替繁杂的中期畸变染色体计数法来分析外界影响因素的致突变活性及其强度。     

复合肥对花背蟾蜍蝌蚪红细胞微核及核异常的影响

以花背蟾蜍蝌蚪外周血红细胞微核及核异常作为毒理监测指标,对Gosner 31、42和46期蝌蚪进行观察,研究了复合肥对水生生物的毒性效应.结果表明:用复合肥溶液浓度为1、1.5、2、2.5和3g·L-1进行染毒时,红细胞出现了大、小2种类型的微核,在核异常类型中出现了严重的核分叶和双核类型;在3个被观察的蝌蚪发育期中,42期蝌蚪红细胞微核细胞率和核异常细胞率数值明显低于其他两个发育期;在5个浓度的染毒中,2.5g·L-1浓度组在微核、双核和核分叶与对照组间无显著性差异;花背蟾蜍不同发育时期的蝌蚪,对生境中不良因素的抵抗能力存在着明显的差别,且微核和核异常与复合肥浓度之间没有明显的剂量-效应关系.     

绿色荧光蛋白基因结合鼠Talin基因蛋白标记转基因水稻活体生殖细胞及精细胞的微丝骨架

利用绿色荧光蛋白(GFP)基因结合鼠Talin基因表达技术及水稻(Oryza sativa L.)转基因技术,筛选出表达稳定和具等位基因型的第三代转基因水稻.在其活体花粉的4个发育阶段(Ⅰ.小孢子晚期;Ⅱ.二细胞早期;Ⅲ.二细胞晚期;Ⅳ.三细胞阶段),观察了细胞内微丝骨架的分布和结构形态的变化.发现在这4个花粉发育阶段,花粉内的营养核、生殖核、生殖细胞和精细胞都在不同的发育阶段出现位移.而这些位移与微丝骨架的结构变化和运动有密切关系.在胞质中央的微丝网络以及细胞周质的网络不断变化和互动,导致营养核、生殖核或生殖细胞和精细胞的定向位移.在活体生殖细胞和精细胞内,存有一股与细胞纵轴平行排列的微丝骨架.这些微丝骨架对生殖细胞及精细胞可以提供移动的动力,这对生殖细胞或精细胞在花管内以及胚囊内的运动(包括独自游动)提供了依据.     

微核形成与细胞周期关系的初步研究Ⅱ.微核形成的放射性自显影和显微形态学研究

本报告应用γ-射线处理、PHA刺激,放射性自显影等方法研究了微核在人淋巴细胞各周期阶段形成的形态学证据。结果表明,经体外照射的人体外周血,在其间期淋巴细胞各阶段:G_0、G_1、S和G_2期,均可有微核形成,并观察到微核形成的中间过程,核变形,核物质膨出并延伸,中间连丝断裂或在细胞质中消失,与主核完全脱离后微核形成。在有丝分裂中,后期细胞也观察到无着丝点染色体断片和落后染色体,它们有可能形成微核。这样看来,细胞周期各阶段均可能形成微核。作者还观察到胞外微核的形成,并认为它的增多可能是一种病理现象。     

用微核试验研究小枣的抗突变作用

目的:应用微核试验(Micronucleus test,MCNT)技术研究小枣汁对环磷酰胺(CP)的抗突变作用的影响.方法:使用蚕豆根尖细胞微核技术进行微核率检测.结果:结果表明,不同浓度的小枣汁对环磷酰胺诱发的蚕豆根尖细胞微核有明显的抑制作用,1号-阳性和阴性对照试验组的微核率分别为52‰、30‰、26‰、16‰、10‰、9‰、70‰、7‰,小枣汁使CP诱发的微核率从52.0±5.3‰降低至9.7±2.5(P<0.001).结论:说明小枣汁对CP诱发的遗传损伤具有明显的修复、保护以及抗突变作用.     

蚕豆根尖细胞微核试验——Ⅰ.煤焦沥青水悬液的诱变效应

本文应用蚕豆根尖细胞微核检测三种类型的煤焦沥青(CTP)水悬液的诱变效应。结果表明,三种CTP随浓度的增加,根尖细胞微核率近似呈直线性增加。其中以CTP_2中温沥青诱变效应最强,CTP_1高温沥青次之。与我们以前用沥青气管内灌注诱发大白鼠肺癌的实验结果一致。我们认为蚕豆根尖细胞微核试验可作为煤焦沥青对环境污染的一种报警系统。它具有实验周期短、经济、简便和可靠等优点。     

用微核试验测定几种茶树昆虫病毒对小白鼠的安全性

用一种快速简便的测定细胞染色体是否被损伤的方法(即微核试验)测定茶毛虫NPV、油茶尺蠖NPV及油桐尺蠖NPV对小白鼠的安全性,通过测定其骨髓中嗜多染红细胞微核的出现频率,证明无论是单独或是混合感染方式均不能测出这些病毒对骨髓细胞染色体有特定的损伤,而阳性对照环磷酰胺所诱发的微核率与其相比极为显著。此法可作为评价昆虫病毒对哺乳动物安全性的一个重要方法。     

新疆杏仁抗突变作用的实验研究

目的:应用小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核检测试验以探讨杏仁抗突变作用。方法:采用小鼠嗜多染红细胞和有核细胞-微核率(MCN‰)检测法,研究它潜在的抗突变性。结果:该结果能表明杏仁对两种阳性对照组分别诱发的较高微核率有明显降低作用,而且特殊环境下嗜多染红细胞比有核细胞具有较高的敏感性,差异均为非常显著(P<0.001)。结论:杏仁有抗突变,保护染色体损伤,促进DNA修复作用。此项研究抗突变性食物开发和医疗保健中具有重要实际意义。     

食管癌病人放射治疗时外周淋巴细胞微核率的变化以及和染色体畸变率的关系

在辐射诱发的染色体畸变中,除了倒位和相互易位外,几乎都伴有断片的产生。在间期细胞中,这种染色体断片呈现为大小不等的圆形或椭圆形结构,称为微核。观察微核率的变化,称为微核测定。近年来,由于微核测定具有方法简便、观察迅速、鉴别比较容易等一系列特点,在辐射损伤的诊断、辐射防护药的筛选、辐射的细胞遗传学效应研究等     

蚕豆根尖细胞不同剂量率的微核效应研究

本研究采用同一剂量、不同剂量率的~(60)Co-γ射线辐照蚕豆干种子,观察根尖细胞的微核效应。试验结果表明,在0—7.33戈瑞/分处理中,微核细胞率随剂量率的增加略有升高。然而,各处理间的差异显著性不同。此外,在2.03戈瑞/分处理中,能诱发各种类型的微核突变,尤其是出现较多的分裂期微核细胞。本文根据一些分裂期微核细胞所出现的染色体畸变类型,提出辐射诱发的微核既可能是一次击中的产物,也可能是二次击中的产物。同时,微核在细胞遗传工程方面具有可利用的价值。     

鱼类微细胞和小分离细胞制备技术的研究

本文以3种鱼类组织细胞系为材料,对鱼类微细胞和小分离细胞制备技术及其形成机制进行了研究。在微细胞制备中,观察了细胞的微核化过程,微核是由间期状态的细胞核不规则分裂而成。光镜和扫描电镜观察表明,在小分离细胞聚集体形成过程中,细胞核的变化与微细胞的微核化过程相一致,但其细胞质的分裂机制不同,当细胞质进行异常分裂的同时,细胞的微核也随同细胞质不规则分裂而被分配至各个小分离细胞内。     

巯基乙酸对中华蟾蜍红细胞核异常的影响

试验以健康的中华蟾蜍为实验动物,研究注射巯基乙酸对红细胞核异常的影响.试验结果表明,在一定的范围内,巯基乙酸可引起蟾蜍微核细胞率和核异常细胞率遗传指标发生明显变化,随着巯基乙酸浓度的增加和作用时间的延长,蟾蜍红细胞微核和核异常率呈现先上升后下降的规律性变化.     

SO2对蚕豆根尖和叶尖细胞遗传损伤作用的研究

采用微核实验技术,研究大气污染物SO2对蚕豆根尖和叶尖细胞的遗传损伤效应。结果表明2.80和28 mg.m-3的SO2熏气可以诱发蚕豆根尖和叶尖细胞损伤,导致根尖细胞有丝分裂指数下降,根尖和叶尖间期细胞微核率增高,并具有时间效应和浓度效应。经水恢复培养后,根尖分裂细胞数增多,微核率降低,说明恢复培养能够缓解高浓度SO2对根尖细胞的遗传损伤。用石蜡层隔断SO2在根部水中的溶解后,根尖细胞微核率低于叶尖细胞微核率,而在非隔断组中则相反,说明SO2在水中的溶解是产生毒性效应的重要原因。高浓度SO2熏气对蚕豆根尖和叶尖细胞具有遗传学毒性,由于根尖分生区具有较高的分裂指数和微核率,对环境SO2毒性的反应更灵敏,蚕豆根尖微核实验更适于对环境SO2的监测。     

金黄滴虫细胞核微丝系统的初步观察

金黄滴虫细胞核内经常存在着许多直径约为7nm的微丝。这些徽丝大多组合成走向不定的徽丝束,微丝束交织而成遍布核内的网架。核被下面微丝束较多,它们的存在常使核被外凸而成隆脊。核内微丝与核内结构如核仁、染色质等似乎都是相连的。有些微丝横跨核被,一端位于核内,另一端位于核周腔中,并靠近叶绿体。核周腔和内质网腔中也存在着微丝和另一种纤维,印管状纤维。用细胞松弛素B处理后,细胞核、核周腔和内质网腔中的微丝均消失,细胞核的形态也发生变化,似乎微丝网架有支持细胞核的作用。核内微丝可能是在内质网中组装,然后经核周腔进入核内的。     

Alpha粒子和柴油机尾气颗粒提取物共同处理哺乳动物细胞的协同毒性作用

为研究两种有害环境因子同时作用对人类健康的影响,以alpha粒子和柴油机尾气颗粒提取物(d iese lparticu late extract,DPE)共同处理皮肤成纤维细胞(AG1522)为实验模型,对细胞毒性、遗传毒性进行研究。实验发现和未处理的对照组相比,1 cGy alpha粒子和20μg/mL DPE处理24 h,共同作用于细胞能够导致细胞活力下降40%左右,微核形成率上升2倍多;而1 cGy alpha粒子单独辐照时细胞活力下降14.19%,微核形成率上升了36.84%,20μg/mL DPE单独处理24 h时细胞活力下降17.29%,微核形成率上升了73.68%。实验结果表明:这两种环境因子共同作用于哺乳动物细胞时,对于细胞的毒性不是简单的叠加,而是表现出一种协同效应。