Rab23 研究进展

Rab23为小GTP结合蛋白,是Ras超家族Rab家族成员,其突变可引起小鼠开脑综合征(open brain syndrome),因此又称为opb基因.它是Sonic hedgehog信号通路的负调控因子,在不同肿瘤中发挥不同作用,并参与机体组织器官的发育和分化.它可能通过转运细胞内蛋白发挥相关作用.     

Rab23研究进展

Rab23为小GTP结合蛋白,是Ras超家族Rab家族成员,其突变可引起小鼠开脑综合征（openbrain syndrome）,因此又称为opb基因。它是Sonic hedgehog信号通路的负调控因子,在不同肿瘤中发挥不同作用,并参与机体组织器官的发育和分化。它可能通过转运细胞内蛋白发挥相关作用。     

Rab5a研究进展

Rab5a是Rab蛋白家族成员之一,属于小GTP酶。Rab5a是早期胞吞途径中一个重要的限速成分,主要负责调控胞吞中胞吞泡与早期内体的融合。近年来国内外对其研究非常活跃。现对Rab5a的结构、相互作用蛋白及功能的最新研究进展进行综述。     

植物Rab蛋白的研究进展

Rab蛋白是小G蛋白超级家族中的成员之一。通过Rab蛋白氨基酸序列的系统进化分析表明,植物Rab家族又可分为8个亚家族,分别为RabA、RabB、RabC、RabD、RabE、RabF、RabG和RabH。Rab蛋白一般位于胞内特异膜系统的胞质面,它们是小泡运输的关键调节因子。Rab蛋白有非常保守的结构域,同时又具有功能多样性,它们在细胞分化、顶端优势、花粉管发育、根瘤形成以及生物和非生物胁迫反应中均起着非常重要的作用。该文对近年来国内外有关植物Rab蛋白的结构特点及其多样性功能的研究进展进行综述。     

植物Rab蛋白家族的研究进展

Rab家族是一类非常重要的小G蛋白,在多种细胞生理活动中都起着至关重要的作用。高等植物进化出了一组独特的Rab蛋白来满足各种细胞物质运输的特定需要。细胞内Rab蛋白感知上游信号通过自身活性的调节影响植物生长发育及对环境胁迫的反应。对植物Rab蛋白进化特点、结构特征及各成员在植物信号转导、生长发育和胁迫响应中的功能进行了综述。     

Rab 蛋白调控胞内囊泡运输

细胞内各个细胞器之间通过囊泡的膜转运是真核细胞存在的基本。Rab蛋白确保了转运蛋白被运输至正确的目的地。Rab蛋白是小GTP酶中的一大家族,它通过募集其效应物蛋白,其中包括接头蛋白,栓系因子,激酶,磷酸酶以及动力蛋白等,调控了细胞膜的选取,囊泡出芽,去包被,转运以及膜融合等过程。本文主要从Rab蛋白循环着手,依次论述了Rab蛋白在囊泡出芽,去包被,转运和膜融合等过程中起到的作用,从而使读者对Rab蛋白能有一个更加系统的了解。     

Rab蛋白在葡萄糖转运中的作用

在脂肪和骨骼肌细胞中,胰岛素可迅速刺激葡萄糖转运,即通常所说的GLUT4转运。 GLUT4转运是指Rabs与GTP结合时,促进囊泡与微管和微丝蛋白结合,并通过锚定和融合作用使GLUT4囊泡与目标膜结构融合。多数 Rab 家族成员广泛表达于各种组织细胞中,且在细胞内定位十分广泛,几乎存在于真核细胞所有的膜相关的细胞器的胞浆侧。 Rab 蛋白作为囊泡运输的分子开关,通过调节运输小泡的停泊和融合,在囊泡的形成、转运、粘附、锚定、融合等过程中起着重要的作用。 Rab蛋白受到多种上游调节蛋白的调节,同时调控着下游的多种效应蛋白,构成了复杂的调控网络：任何一个环节改变都可能会导致蛋白质转运的异常,进而引发疾病。本文系统阐述了Rab蛋白在葡萄糖转运过程中的作用及该领域的最新进展。     

小G蛋白Rab5的研究进展

小GTP酶Rab5是细胞内部各类膜组分(membrane component)运输的关键调节因子。Rab5在无活性的GDP结合形式和有活性的GTP结合形式之间循环。不同状态的Rab5通过募集不同的下游效应物,调控囊泡的出芽、锚定和融合运输。Rab5除了能够调节早期胞内体(early endosome)的融合,它还调节细胞自噬、线粒体的稳态、染色质的排列整合、细胞的迁移以及能量代谢等。此外,Rab5与肿瘤、阿尔兹海默症及亨廷顿病也有着非常密切的关系。本文结合近几年Rab5的最新研究进展作一综述。     

植物Rab蛋白的分类与功能

Rab蛋白构成小G蛋白超家族中最大的1个家族,广泛存在于动物、植物和微生物中.Rab调控细胞内的囊泡形成、转运、锚定及囊泡与质膜的融合等过程,在细胞内吞和分泌途径中发挥分子开关的作用.不同生物中Rab的结构和作用机制非常保守,但Rab的分类和生理学功能存在差异.植物Rab不仅行使类似于动物或微生物同源Rab的细胞学功能,而且在植物生长发育、激素信号调节、生物或非生物胁迫应答等方面表现出功能特异性.本文结合近年的研究进展,对植物Rab的分类、结构、调节机制和功能进行了综述,并对当前植物Rab功能研究的难点和方向进行了
讨论.     

Rab21, a Novel PS1 Interactor,Regulates γ-Secretase Activity via PS1 Subcellular Distribution

γ-Secretase has been a therapeutical target for its key role in cleaving APP to generate β-amyloid (Aβ), the primary constituents of senile plaques and a hallmark of Alzheimer’s disease (AD) pathology. Recently, γ-secretase-associating proteins showed promising role in specifically modulating APP processing while sparing Notch signaling; however, the underlying mechanism is still unclear. A co-immunoprecipitation (Co-IP) coupled with mass spectrometry proteomic assay for Presenilin1 (PS1, the catalytic subunit of γ-secretase) was firstly conducted to find more γ-secretase-associating proteins. Gene ontology analysis of these results identified Rab21 as a potential PS1 interacting protein, and the interaction between them was validated by reciprocal Co-IP and immunofluorescence assay. Then, molecular and biochemical methods were used to investigate the effect of Rab21 on APP processing. Results showed that overexpression of Rab21 enhanced Aβ generation, while silencing of Rab21 reduced the accumulation of Aβ, which resulted due to change in γ-secretase activity rather than α- or β-secretase. Finally, we demonstrated that Rab21 had no effect on γ-secretase complex synthesis or metabolism but enhanced PS1 endocytosis and translocation to late endosome/lysosome. In conclusion, we identified a novel γ-secretase-associating protein Rab21 and illustrate that Rab21 promotes γ-secretase internalization and translocation to late endosome/lysosome. Moreover, silencing of Rab21 decreases the γ-secretase activity in APP processing thus production of Aβ. All these results open new gateways towards the understanding of γ-secretase-associating proteins in APP processing and make inhibition of Rab21 a promising strategy for AD therapy.     

Rab蛋白的结构、功能及进化

Rab蛋白是小分子GTP结合蛋白家族(small GTP-binding proteins)中最大的亚家族,大约由200个氨基酸组成,由保守的G结构域与高度可变的N端和C端组成。Rab蛋白作为细胞内囊泡运输的分子开关,与其上游调控子和下游特定的效应子相互作用,并与GTP的结合和水解过程相偶联,在囊泡运输的不同阶段发挥作用。对不同Rab蛋白调控囊泡运输的研究有利干全面理解细胞内各类囊泡定向运输的分子动力学机制。     

玉米Rab1B基因功能的初步研究

在酿酒酵母中,GTP结合蛋白YPTl调节蛋白质从内质网到高尔基体的运输.YPT1温敏突变株ASY01等在26℃能正常生长,但在高温(37℃)条件下,细胞死亡.经鉴定,YPT1温敏突变是由于第136位的丙氨酸突变为天冬氨酸.克隆一个玉米Rab基因,分子进化研究表明它是一个Rab1基因,命名为ZmRab1B.与酵母YPT1温敏突变体的功能互补实验结果表明,ZmRab1B基因能恢复酵母YPT1温敏突变株的正常生长,说明ZmRab1B基因的功能是调节蛋白质从内质网到高尔基体的运输.     

Rab8的结构和功能的研究进展

Rab蛋白是小分子GTP结合蛋白家族中最大的亚家族。Rab8作为Rab家族中的成员之一,其在“无活性”的GDP结合状态与“活性”的GTP结合形式之间不断循环。不同结合形式的Rab8招募不同的效应因子,调控囊泡的形成、锚定和融合等阶段,此外, Rab8还参与调控自噬和动物繁殖功能。该文综述了Rab8调控囊泡运输、自噬以及动物繁殖功能的研究进展,以期为后续研究Rab8功能提供参考。     

克氏原螯虾Rab5、Rab6蛋白及其抗体对血淋巴细胞吞噬活性的影响

为研究克氏原螯虾(Procambarus clarkii)Rab5(PcRab5)和Rab6(PcRab6)的生物学功能, 利用同源重组技术构建了克氏原螯虾pET-B2m-PcRab5和pET-B2m-PcRab6原核表达载体, 并进行了诱导表达和多克隆抗体的制备, 采用ELISA和Western Blot技术检测了抗体效价和特异性。将PcRab5和PcRab6的原核表达蛋白和多克隆抗体注射到健康克氏原螯虾体内, 研究了其对血淋巴细胞吞噬活性的影响。实验结果表明构建的pET-B2m-PcRab5和pET-B2m-PcRab6原核表达载体经诱导后可表达目的蛋白, 分子量均为67 kD, 纯化后蛋白条带单一, 纯度较高。重组表达纯化后的PcRab5和PcRab6蛋白免疫日本大耳兔分别获得效价为1:2048 K和1:512 K的兔抗血清, 制备的抗体可分别特异性识别PcRab5和PcRab6蛋白。将PcRab5和PcRab6蛋白注射健康克氏原螯虾后, 其血淋巴细胞中可吞噬荧光微球的细胞比例分别显著上升至38%和30%(P＜0.01)。而将纯化的PcRab5和PcRab6多克隆抗体分别注射至螯虾体内后, 其血淋巴细胞的吞噬细胞比例均出现显著下降(P＜0.05), PcRab5和PcRab6蛋白参与了血淋巴细胞吞噬功能。实验为进一步研究克氏原螯虾PcRab5和PcRab6分子功能奠定基础, 也可为理解甲壳动物Rab5和Rab6在血淋巴细胞吞噬功能中的作用提供帮助。     

Rab23 在皮肤鳞状细胞癌中的表达

目的:研究Rab23在皮肤鳞状细胞癌(SCC)中的表达及意义。方法:用免疫组化S-P法分别检测30例皮肤SCC、15例正常皮肤组织标本中Rab23的表达。结果:Rab23在皮肤SCC和正常皮肤中阳性率分别为90%和13.3%,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Rab23在皮肤SCC中高表达可能在皮肤SCC的发生发展过程中发挥作用。     

Rab23对乳腺癌细胞生长增殖的抑制作用

目的：研究Rab23分子对乳腺癌细胞生长增殖的作用,探讨这种作用是否与乳腺癌ER＋/ER-依赖性相关。方法：选取ER＋乳腺癌细胞系Bcap-37、MCF-7和ER-乳腺癌细胞系MDA-MB-231为研究对象,采用质粒转染提高细胞中Rab23基因的表达和RNA干涉技术减少其表达,运用克隆形成实验、BrdU掺入实验、MTT实验等技术检测Rab23分子对乳腺癌细胞生长、增殖的影响。结果：克隆形成实验提示,三种乳腺癌细胞系Rab23质粒转染组的集落形成数量明显少于对照组,而Gli1质粒转染组集落形成数量较对照组明显增加;BrdU掺入实验提示,Rab23转染组的三种乳腺癌细胞BrdU掺入率与对照组有明显减少（P＆lt;0.05）,而Rab23干涉组的BrdU掺入率较对照组升高（P＆lt;0.05）;MTT实验显示Rab23转染组A490值最低,其次为对照组,而Rab23干涉组A490值最高（P＆lt;0.05）。结论：Rab23分子对乳腺癌细胞生长增殖有抑制作用,这种抑制作用可能与乳腺癌ER＋/ER-依赖性无相关性。     

Rab23在皮肤鳞状细胞癌中的表达

目的：研究Rab23在皮肤鳞状细胞癌（SCC）中的表达及意义。方法：用免疫组化S-P法分别检测30例皮肤SCC、15例正常皮肤组织标本中Rab23的表达。结果：Rab23在皮肤SCC和正常皮肤中阳性率分别为90％和13.3％,二者差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：Rab23在皮肤SCC中高表达可能在皮肤SCC的发生发展过程中发挥作用。     

Rab GDP解离抑制因子的定位和表达

目的:构建含人GDI1和GDI2基因的真核表达载体进行定位和蛋白表达研究。方法:用PCR从U251细胞cDNA克隆GDI1和GDI2基因,构建真核表达载体pEGFP-N2-GDI1和pEGFP-N2-GDI2,转染HEK293T细胞。荧光显微镜观察GDI1和GDI2蛋白的细胞内定位,再通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定蛋白的表达。结果:成功克隆到1 341bp和1 335bp的人源GDI1和GDI2基因,并准确插入真核表达载体pEGFP-N2中,荧光观察这两个蛋白定位到细胞浆中,并能利用标签抗体检测到GDI1和GDI2的表达。结论:GDI1和GDI2能够定位到细胞浆,并能通过Western blotting检测,为进一步研究GDI1和GDI2的功能奠定了基础。     

桔小实蝇Rab家族基因鉴定和表达模式研究

桔小实蝇Bactrocera dorsalis（Hendel）是国内重要的果蔬害虫，能取食多种水果和蔬菜，给果蔬业造成严重的经济损失。Rab蛋白是一类小分子GTP 结合蛋白，在囊泡运输和信号传递中发挥了重要作用。本研究从桔小实蝇转录组文库中鉴定了7个Rab基因家族作为研究对象，利用实时荧光定量PCR等分子生物学技术研究了其表达模式。研究结果不仅有助于提高我们对桔小实蝇发育分子机制的理解，而且为防治桔小实蝇提供了新思路和新途径。     

Rab11的结构特征、效应因子与功能

Rab11是Rab小分子GTP酶家族的成员.在细胞内膜泡再循环途径中,Rab11作为重要调节因子,介导膜泡从内体向质膜的运输.近年来随着对Rab11研究的深入,人们发现该蛋白质在多种细胞生命活动中发挥着关键作用.现对Rab11的结构、效应蛋白及功能等方面进行了综述.