人红细胞膜血型糖蛋白的研究进展

血型糖蛋白(GP)是红细胞膜中主要含唾液酸的跨膜蛋白,有A、B、C和D四种.GPA是MN血型糖蛋白,GPB表达Ss、U血型,GPC、GPD则是Gerbich抗原,四种血型糖蛋白的结构有不同程度的同源性,尤以同类间的同源性程度最高,GPA在防止红细胞之间、红细胞与血管内皮细胞之间的相互作用有重要功能,并在配体诱导下影响红细胞膜的物理性质.GPC是维持红细胞正常形状、正常物理性质的重要因子.GPA和GPC的功能还分别与带3蛋白、带4.1蛋白有关.     

我国青年人红细胞膜血型糖蛋白变异的筛查

采用免疫印迹技术首次调查我国人群红细胞膜血型糖蛋白(Glycophorins; GP)的变种。受检者114人,年龄17—25岁,男80名,女34名。以对GP分子不同区域具特异性的4种抗血清为探针,调查发现3个类型的10例变种,总检出率达8.8％。其中汉族的检出率为5.7％,黎族为25％,其余民族中未检出变种。4例Ⅰ型先证者红细胞膜GP的免疫印迹图谱与st~a表型相似,其中1例经血清学检查确证。1例Ⅱ型缺失δGP。其余5例Ⅲ型变种尚未见有文献报道。7例GP变种红细胞膜的唾液酸含量明显高于正常人。     

我国人红细胞膜MiⅢ血型糖蛋白的基因结构分析

在１１４名青年人中筛查出的两例血型糖蛋白（ＧＰ）变种。携有ＭｉⅢ基因特殊的变异片段。先证者均为海南省黎族男性,属杂合子。借助聚合酶链式反应（ＰＣＲ）获得跨越ＭｉⅢ基因外显子２￣４的基因组序列,再进行被扩增ＤＮＡ的直接测序,确证其基因结构属（δ－α－δ）杂化体。通过基因的微转换机理,δ基因的假外显子在其３＇端同显示５＇剪接信号的α基因外显子３及内含子３融合,前两者形成一组合外显子３．ＭｉⅢ基因的近端     

我国人红细胞膜MiⅢ血型糖蛋白的基因结构分析

在１１４名青年人中筛查出的两例血型糖蛋白（ＧＰ）变种,携有ＭｉⅢ基因特殊的变异片段．先证者均为海南省黎族男性,属杂合子．借助聚合酶链式反应（ＰＣＲ）获得跨越ＭｉⅢ基因外显子２～４的基因组序列,再进行被扩增ＤＮＡ的直接测序,确证其基因结构属（δ－α－δ）杂化体．通过基因的微转换机理,δ基因的假外显子在其３＇端同显示５＇剪接信号的α基因外显子３及内含子３融合,前两者形成一组合外显子３．ＭｉⅢ基因的近端（δ－α）断点（Ｂｒｅａｋｐｏｉｎｔ）在组合外显子３内（第８２５～８５０位核苷酸）;而远端（α－δ）断点则在内含子３内（第９０４～９６８位核苷酸）．     

大鼠脑组织中P-糖蛋白的免疫印迹检测方法

目的:确定蛋白免疫印迹检测大鼠脑组织中P-糖蛋白的最佳实验条件。方法:将成年雄性Wistar大鼠随机分为正常组和模型组。模型组分八个时间点,采用反复夹闭颈总动脉辅以硝普钠降压的方法制备脑缺血再灌注模型。正常组直接断头取脑分别进行组织匀浆和提取微血管,而模型组断头取脑均提取微血管,利用蛋白免疫印迹检测大鼠脑内P-糖蛋白的表达水平。结果:最佳实验条件是:提取微血管,用裂解液C冰上裂解30min,然后40000g离心30min留上清,蛋白定量后在5*上样缓冲液中25℃处理30min。而模型组各时间点P-糖蛋白的表达量随时间的延长逐渐增多。结论:利用提取脑微血管的方法在上述实验条件下进行P-糖蛋白的检测方便、可行,明显优于脑组织匀浆;并且在脑缺血再灌注这种病理状态下脑组织内P-糖蛋白的表达呈现一定的时序特征。     

血型糖蛋白C是恶性疟原虫配体PfEBP-2(baebl)的红细胞膜受体

恶性疟原虫(Plasmodium falciparum,Pf)红细胞结合蛋白-2(Pferythrocyte binding protein-2,PfEBP-2)是Duffy结合样红细胞结合蛋白(Duffy-binding-like erythrocyte-binding protein,DBL-EBP)家族的一个成员,长期以来Pf入侵人红细胞时该配体所需的受体迄未被确认。2003年Lobo等采用酶处理的红细胞与缺失不同膜表面蛋白的罕见变种红细胞,显示PfEBP-2不与缺失血型糖蛋白C(GPC)的红细胞结合,并且它与缺失外显子2或外显子3的GPC变种进行的结合亦互有差异,因此证明GPC是PfEBP-2(或称baebl,EBA-140)的红细胞膜受体。他们进一步检出GPC分子上的结合域局限在其外显子2的第14￣22位氨基酸残基范围。PfEBP-2与受体的相互作用需要唾液酸,而不涉及血型糖蛋白A(glycophorin A,GPA)或血型糖蛋白B(GPB),它代表了Pf入侵红细胞的一条新途径。Mayer等继续探索了BAEBL(VSTK)变种与GPC结合的特异性,揭示在该Pf配体变种的第II区,围绕Thr-121的两个Arg残基对保证BAEBL(VSTK)同唾液酸结合的特异反应十分关键。并认为,BAEBL的单个点突变将有助Pf识别各种红细胞表面糖蛋白或糖脂分子上的寡糖,从而显著拓宽了其入侵的范围。     

人红细胞膜唾液酸的测定

大多数哺乳动物的细胞膜(包括红细胞膜)含有糖蛋白。唾液酸是糖蛋白末端糖的残基,位于细胞的外表面,参加细胞的识别,粘着和接触抑制。唾液酸也是循环系统中红细胞存活的主要决定因素,它在正常红细胞的衰老以及衰老细胞被清除中起着关键作用。红细胞唾     

检测HIV的蛋白印迹和ELISA检测方法学比较

为了寻找一种适合大批量标本测定且具有高敏感性、高特异性的艾滋病临床实验室检测方法。比较了艾滋病检测的蛋白印迹实验和酶联免疫吸附实验两种方法,并采用不同厂家生产的不同代酶免试剂和对已确诊为阴性和阳性的标本进行比较测定。结果科华一代、二代、三代和四代酶免试剂盒的功效率分别是83．7、92．13、97．50和85.3;万泰一代、二代、三代和四代功效率分别是83．5、95．88、97．10和84．2;蛋白印迹实验的功效率是99．5。所以酶联免疫吸附实验更适合大批量标本的检测,而第三代酶免试剂具有更高的特异性和敏感性。     

夏氏疟原虫入侵时小鼠红细胞膜唾液酸糖蛋白的改变

夏氏疟原虫入侵时小鼠红细胞膜唾液酸糖蛋白的改变刘俊凡,卢义钦（湖南医科大学生化教研室,长沙４１Ｏ０７８〕ＲｏｎａｌｄＬ．ＮｏｇｅｌＯｌｇａＯ．Ｂｌｕｍｅｎｆｅｌｄ（爱因斯坦医学院内科血液学研究室和生化学系,美国纽约１０４６１）关键词夏氏疟原虫;红细胞...     

血红蛋白对人红细胞膜流动性的影响

本文报道了pH7.5时血红蛋白和红细胞膜的结合效应.在10—45℃温度范围内观察到血红蛋白对膜脂质流动性的限制作用.看来这种限制作用不是脂质过氧化所致,而是血红蛋白和红细胞膜直接作用的结果.对流动性大的膜,血红蛋白的效应也随之增大.高铁血红蛋白及红细胞膜去胆固醇皆能修饰血红蛋白和膜的相互作用.     

血型糖蛋白C的研究进展

有关血型糖蛋白Ｃ（ＧＰＣ）的研究,近年来进展很快。它的糖蛋白一级结构及基因结构均已阐明,主要组成Ｇｅｒｂｉｃｈ血型抗原系统。ＧＰＤ（或γＧＰ）是从ＧＰＣ的Ｎ末端区截短而成。通过ＧＰＣ外显子２、３、４的单个或多个缺失,可产生若干表型的ＧＰＣ变种。ＧＰＣ参与红细胞膜骨架的构建,在维持红细胞的正常形态和膜机械特性中发挥重要作用。它还可能与恶性疟魔虫入侵红细胞有关。本就Ｇｅ血型抗原,ＧＰＣ的分子结构和功     

人红细胞膜带3蛋白结构研究进展

人红细胞膜带３蛋白由９１１个氨基酸组成,可分为Ｎ端胞质域和Ｃ端膜域。最新研究结果表明,α螺旋含一较高的跨膜域往返跨膜１２次,在细胞膜中,带３蛋白主要以二聚体和四聚体形式存在,尽管其中的单体可独立地转运阴离子,然而二聚体中的两个单体之间存在着相互作用。     

细胞膜糖蛋白及其寡糖链分析方法的研究进展

细胞膜与细胞的各种生命活动如细胞识别粘着、运动迁移、免疫应答、物质运输、信息传导、细胞分裂、细胞分化、衰老及病变、癌变都有密切的关系。细胞表面糖蛋白是细胞膜的主要成分,而糖蛋白的性质及功能又和糖链的结构有关,因此细胞膜糖蛋白中寡糖链的结构及作用机制研究成为生物学基础理论的课题之一。主要综述了近年来细胞膜糖蛋白研究中细胞膜的类别、细胞膜的制备方法、细胞膜糖蛋白的提取与分离纯化、寡糖链的结构分析方法。     

脂质过氧化对人红细胞膜脂流动性的影响

研究枯稀过氧化氢/高铁血红素体系所产生的烷基过氧自由基对红细胞的损伤。测定了脂质过氧化的产物——丙二脂的生成,并证明阿魏酸钠对脂质过氧化的抑制。荧光偏振的结果指出,膜脂过氧化以后降低了膜脂的流动性。人红细胞用5DSA和16DSA标记并用ESR检测膜脂流动性,结果表明,序参数S几乎没有发生变化,旋转相关时间τ值的增加证明膜脂过氧化以后,疏水尾部的物理状态发生了改变。经脂质过氧化以后,红细胞膜中的不饱和脂防酸的减少,可能是降低膜脂流动性的原因之一。