乳酸菌阴道胶囊辅助治疗在行ART反复着床失败患者中的应用

探究行辅助生殖技术（ART）反复着床失败患者应用乳酸菌阴道胶囊辅助治疗对子宫内膜容受性（ER）和阴道微生物的影响。

选取2020年5月至2022年5月本院收治ART反复着床失败患者100例,根据治疗方式分为观察组（n = 50）和对照组（n = 50）。对照组采用常规治疗,观察组采用常规治疗联合乳酸菌阴道胶囊。比较两组的性激素水平（雌二醇、孕酮）,内膜容积、子宫内膜厚度、血管血流指数（VFI）、内膜血流指数（FI）和阻力指数（RI）等子宫内膜容受性指标,阴道pH值、阴道菌群检出率和乳酸菌数量。

两组治疗前后血清雌二醇、孕酮水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。两组治疗前子宫内膜厚度、内膜容积、血管血流指数、内膜血流指数和阻力指数比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后观察组子宫内膜厚度、内膜容积和血管血流指数均高于治疗前（P＜0.01）和对照组（P＜0.05）。治疗前两组菌群检出率差异无统计学意义（P＞0.05）,治疗后两组菌群检出率均低于治疗前（P＜0.05）,治疗后观察组菌群检出率低于对照组（P＜0.05）。两组阴道pH值均低于治疗前（P＜0.001）,治疗后观察组阴道pH值低于对照组（P＜0.001）。两组阴道乳杆菌正常率均高于治疗前（P＜0.05）,治疗后观察组高于对照组（P＜0.05）。两组胚胎着床率、临床妊娠率、早期流产率和持续妊娠率差异无统计学意义（P＞0.05）。

乳酸菌阴道胶囊治疗ART反复着床失败患者可以改善子宫内膜容受性和阴道菌群。

     

孕晚期女性阴道菌群与妊娠结局的相关性

分析不同妊娠结局女性孕晚期阴道菌群,探索阴道菌群变化与妊娠结局的相关性。

收集厦门市第五医院收治的妊娠期女性阴道分泌物,筛选排除后,纳入不良妊娠组14例,正常妊娠组17例。采用高通量测序法对阴道菌群16S rDNA V3−V4区进行测序;采用QIIME2软件分析阴道菌群的组成和多样性指标;采用PCoA主坐标分析菌群β多样性差异;采用LEfSe比较不同妊娠结局女性阴道微生物差异,获得具有统计学意义的菌群标志物,并对差异菌群做相关性分析。

在菌群组成方面,厚壁菌门、乳杆菌属比例在正常妊娠组中显著增加,放线菌门、双歧杆菌属比例在不良妊娠组中显著升高（均P＜0.05）。在多样性方面,两组的α多样性差异无统计学意义（P＞0.05）,正常妊娠组β多样性较高,不良妊娠组的菌群相似度较高（均P＜0.05）。LEfSe分析结果显示,正常妊娠组阴道乳杆菌属丰度显著升高,不良妊娠组加德纳菌属、双歧杆菌属和梭菌目丰度显著增加。相关性分析表明,乳杆菌目与梭菌目比例呈负相关。

与正常妊娠组相比,不良妊娠组女性阴道菌群存在多样性下降、乳杆菌丰度下降的趋势,同时双歧杆菌、加德纳菌、梭菌等厌氧菌丰度增加。

     

壶腹周围憩室对胆总管结石患者结石成分及胆道菌群的影响

探究壶腹周围憩室(periampullary diverticulum, PAD)对胆总管结石成分及胆道菌群的影响。

收集我院行内镜下取石治疗患者44例, 其中14例伴有PAD、30例无PAD, 使用红外光谱法和分光光度法分析结石样本中胆固醇、胆红素含量。从入组患者中分别筛选8例伴有PAD的患者为PAD组, 8例无PAD的为对照组, 收集患者胆汁样本, 提取样本中菌群DNA进行扩增并构建细菌基因文库, 经Illumina MiSeq平台高通量测序后进行生物信息学分析。最后对差异菌群与胆红素、胆固醇进行相关性分析。

2组患者对比年龄、胆管直径、结石直径和总胆红素(TBIL)等资料差异均无统计学意义(均P > 0.05)。2组患者结石中胆固醇和胆红素含量[(39.77±13.00)%vs(61.80±26.00)%, Z=-2.973, P=0.003;(27.03±13.00)%vs(12.27±16.00)%, Z=-2.999, P=0.003)差异存在统计学意义。PAD组与对照组Alpha多样性差异无统计学意义(P > 0.05), 而在物种群落组成上存在差异。卟啉单胞菌属、嗜胆菌属等10种菌属在PAD组中的丰度高于对照组, 真杆菌属、乳杆菌属较对照组降低, 差异均有统计学意义(均P < 0.05)。相较于对照组, PAD组牛磺酸和次牛磺酸的代谢、钙信号通路等5条通路差异存在统计学意义(均P < 0.05)。嗜胆菌属和卟啉单胞菌属与胆红素具有相关性(R²=0.701 3, P < 0.000 1;R²=0.286 8, P=0.032 5)。

伴有PAD的患者结石含有更高的胆红素成分。PAD的存在改变胆道菌群多样性、构成及丰度, 并可能通过菌群变化影响结石成分。

     

牙周干预联合常规四联药物治疗对口腔及胃幽门螺杆菌根除效果的临床研究

探讨牙周干预联合常规四联药物对口腔及胃部幽门螺杆菌根除的效果, 为该类患者的治疗提供参考。

选择胃部H.pylori阳性转诊口腔科进行牙周健康状况及口腔H.pylori检查的患者140例, 随机分为观察组和对照组各70例。对照组患者采用常规四联药物治疗, 观察组在对照组的用药基础上给予牙周干预治疗。对比两组患者治疗前及停药1个月、6个月及12个月后的牙周临床指数和胃肠道症状; 记录并比较两组患者停药1个月、6个月及12个月后口腔H.pylori根除率和胃H.pylori根除率, 评估两组患者治疗不良反应。

停药1个月、6个月及12个月后, 两组患者牙周临床指数中GI、SBI、PD及CAL值和胃肠道症状评分(腹痛腹胀、恶心呕吐、反酸嗳气)较治疗前显著降低, 同时观察组患者均显著低于对照组(均P < 0.05)。观察组患者停药6个月及12个月后口腔H.pylori根除率和胃H.pylori根除率均显著高于对照组(81.43%vs 60.00%, 71.43%vs 48.57%, 75.71%vs 51.43%, 68.57%vs 41.43%;χ²=7.761、7.619、8.914、10.418, 均P < 0.05)。观察组和对照组患者的不良反应总发生率对比差异无统计学意义(4.29%vs 2.86%, P > 0.05)。

牙周干预联合常规四联药物能显著改善胃部H.pylori感染患者的牙周组织健康状况, 减轻其胃肠道症状, 并能有效降低其口腔H.pylori根除率和胃H.pylori根除率, 安全性良好。

     

高危型人乳头瘤病毒感染与阴道微生态及宫颈局部细胞免疫的相关性

探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染与阴道微生态及宫颈局部细胞免疫的相关性, 为该类患者的治疗提供参考。

选择2018年1月至2020年1月我院收治的126例HPV感染者, 依据感染病毒类型分为非HR-HPV感染组(n=69)和HR-HPV感染组(n=57), 并纳入同期来我院体检的50名健康体检者作为对照组。分析HPV感染类型、患者阴道微生态状况及宫颈局部组织T淋巴细胞亚群水平。

患者中复合型与单一型HR-HPV感染率分别为15.8%、84.2%, 差异有统计学意义(χ²=5.324, P=0.047)。对照组、非HR-HPV感染组和HR-HPV感染组对象阴道微生态失调率分别为22.0%、34.8%、45.6%, 其中对照组对象阴道微生态失调率最低(χ²=5.638, P=0.048)。非HR-HPV感染组和HR-HPV感染组患者阴道病原菌检出率高于对照组(均P < 0.05)。非HR-HPV感染组和HR-HPV感染组患者宫颈局部T淋巴细胞亚群水平低于对照组(均P < 0.05)。

HPV33、16、18型为HPV感染主要类型, 会加重阴道微生态紊乱程度, 影响局部细胞免疫功能。检测患者HPV感染情况和宫颈局部细胞免疫功能可为患者临床治疗提供有效数据, 有利于治疗措施的制定。

     

氨基酸型肠内营养制剂支持后克罗恩病患者肠道微生物和非靶向代谢组学指标的分析

探讨氨基酸型肠内营养制剂支持后克罗恩病患者的肠道微生物和非靶向代谢组学指标的变化,为该类患者的治疗提供参考。

选择我院收治的20例克罗恩病活动期患者作为研究对象,所有患者均采用氨基酸型肠内营养制剂进行支持治疗。比较患者治疗前后肠道菌群结构、菌群多样性以及非靶向代谢组学检测结果的差异。

治疗后,患者肠道乳杆菌属（t=5.200,P＜0.001）、大肠埃希菌（t=11.974,P＜0.001）、克雷伯菌属（t=15.033,P＜0.001）、糖单胞菌（t=12.166,P＜0.001）、恶臭假单胞菌（t=31.063,P＜0.001）、肠球菌属（t=28.867,P＜0.001）数量均显著升高;同时患者肠道菌群OUTs（t=40.435,P＜0.001）、Observed species（t=5.475,P＜0.001）、Chao1指数（t=12.348,P＜0.001）、Simpson指数（t=2.961,P=0.005）、Shannon指数（t=3.330,P=0.002）均显著升高。相比治疗前,治疗后患者血清以及粪便中的氨基酸、多肽、脂肪酸、胆固醇及碳水化合物水平均显著改善。

氨基酸型肠内营养制剂支持后,克罗恩病患者肠道菌群丰度提高,同时患者脂质代谢的改善可能与氧化应激反应通路相关联。

     

红茶对2型糖尿病小鼠肠道菌群分布的影响

探讨红茶对2型糖尿病（T2DM）小鼠肠道菌群分布的影响,为研究红茶在代谢性疾病的辅助治疗机制提供参考。

构建 T2DM小鼠模型,将其随机分为模型组（T2DM组）和茶水饲喂组（T2DM_T组）,取健康小鼠作为对照组（Control组）,每组各15只。实验终点收集3组小鼠粪便进行宏基因组测序,分析组间菌群差异;同时进行肝脏组织形态学检查,观察组织病理学改变。

与Control组和T2DM组相比,T2DM_T组拟杆菌门（F = 21.056,P＜0.001）、邓肯氏菌属（F = 13.330,P = 0.001）、乳杆菌属（F = 36.546,P＜0.001）和粘液乳杆菌属（F = 43.813,P＜0.001）的相对丰度增加,担子菌门（F = 8.676,P = 0.005）、Muribaculum（F = 8.151,P = 0.006）和肠球菌属（F = 4.271,P = 0.040）的相对丰度降低。与T2DM组小鼠相比,T2DM_T组小鼠肝细胞排列较为紧密,细胞空泡变性程度有所减弱。

红茶在一定范围内能调节T2DM模型小鼠肠道菌群结构和相对丰度,红茶水喂饲可减缓造模所致的T2DM小鼠肝脏细胞的损伤,其具体作用机制值得深入研究和探讨。

     

急性脑卒中患者肠道菌群研究

通过粪便标本检测急性脑卒中患者肠道菌群变化情况, 探讨急性脑卒中患者肠道菌群结构。

通过高通量二代测序技术对10例健康者(对照组)及10例急性脑卒中患者(疾病组)粪便样本进行菌群结构测序分析。

与对照组比较, 急性脑卒中患者粪便样本中物种OTU信息量显著增加(P < 0.01), 菌群多样性指数(Shannon)和物种均一度指数(Evenness)也有所增加但差异无统计学意义(均P > 0.05)。门水平上, 疾病组患者肠道Bacteroidetes数量较对照组显著增加, Firmicutes数量显著减少(均P < 0.05)。属水平上, 疾病组患者肠道Bacteroides、Bilophila、Butyricimonas比例较对照组显著升高, 而Collinsella、Coprococcus、Clostridium等比例较对照组显著降低(均P < 0.05)。

急性脑卒中患者肠道菌群结构与健康人存在显著差异。

     

川崎病及川崎病冠状动脉病变患儿肠道菌群变化

研究川崎病及川崎病冠状动脉病变患儿肠道菌群变化情况, 为调节其肠道菌群提供参考。

选择我院2018年7月至2020年5月纳入的97例川崎病患儿作为观察对象, 依据超声心动图检查将其中出现冠状动脉病变的45例患儿作为研究组, 另外52例单纯川崎病患儿作为对照组, 检测两组患儿肠道菌群情况。

两组患儿肠道菌群多样性相比差异无统计学意义(P > 0.05), 但研究组患儿肠道菌群丰度高于对照组(P < 0.05)。研究组患儿肠道厚壁菌门占35.85%, 低于对照组的54.06%(P < 0.05)。研究组患儿肠道拟杆菌门占33.57%, 高于对照组的21.30%(P < 0.05)。研究组患儿肠道变形菌门占24.39%, 与对照组的25.21%相比差异无统计学意义(P > 0.05)。研究组患儿肠道乳杆菌属、拟杆菌属、韦荣球菌属分别占3.87%、25.03%、2.75%, 与对照组的21.23%、16.23%、17.95%相比差异均有统计学意义(均P < 0.05)。

川崎病冠状动脉病变患儿肠道菌群状况与单纯川崎病患儿存在显著差异, 合并冠状动脉病变的患儿肠道菌群紊乱更为显著, 应受到临床重视。

     

双歧杆菌乳杆菌三联活菌片对幽门螺杆菌根治后消化道不良反应的改善作用

探讨加用双歧杆菌乳杆菌三联活菌片对临床四联疗法根除幽门螺杆菌(H.pylori)过程中患者消化道不良反应的改善作用。

选择2019年1月至2020年1月在昆明医科大学第二附属医院门诊就诊的100例H.pylori感染患者, 分为益生菌组和正常组, 各50例。全部患者通过四联疗法根除H.pylori后, 益生菌组患者继续加用双歧杆菌乳杆菌三联活菌片治疗, 对结果进行分析。

2组患者使用含有铋剂的四联疗法根除H.pylori后效果满意。益生菌组患者不良反应发生率低于正常组(25.5% vs 47.5%;χ²=11.023, P=0.001)。

益生菌可减轻四联疗法根除H.pylori后消化道不良反应, 根除H.pylori过程中加用益生菌的时机尚待进一步探讨。

     

胚胎移植前的阴道微生态对辅助生殖患者妊娠结局的影响

探讨辅助生殖治疗患者在胚胎移植前的阴道微生态对妊娠结局的影响。

选取1 420例在北部战区总医院生殖医学科经体外受精/卵胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)治疗并接受冻融胚胎移植的不孕患者。在胚胎移植前取阴道分泌物涂片、革兰染色、显微镜镜检检查阴道微生态情况, 回顾性分析阴道微生态对辅助生殖患者妊娠结局的影响。

微生态失衡患者的HCG阳性率、临床妊娠率、胚胎种植率、流产率和早产率与微生态正常患者相比差异无统计学意义(P > 0.05)。708例微生态失衡患者中, 菌群正常功能下降335例、菌群抑制141例、白细胞异常127例、BV中间型52例、BV 30例、VVC 23例。BV患者的流产率与其他几种微生态失衡情况相比, 差异有统计学意义(P < 0.01)。

微生态失衡对辅助生殖患者的妊娠率影响有限; BV患者在胚胎移植后可能有流产的风险, 建议调整阴道微生态的平衡防止流产发生。

     

妊娠中晚期阴道微生态失调及乳酸菌胶囊干预对不良妊娠结局的作用

目的 观察妊娠中晚期妇女阴道微生态状况,探讨应用乳杆菌活菌胶囊纠正阴道微生态失调对不良妊娠结局的预防价值。方法 选择孕13~36周单胎妊娠期妇女560例,取其阴道分泌物,经革兰染色后油镜下观察,进行阴道微生态（阴道菌群的密集度、多样性、优势菌、炎症反应等）状况评价,检测阴道分泌物成分、阴道病原菌类型。对阴道微生态失调孕妇,根据是否接受乳杆菌活菌胶囊治疗分为治疗组和对照组,治疗组给予乳杆菌活菌胶囊,对照组不采用药物干预。追踪随访所有孕妇的妊娠情况,比较阴道微生态正常组、微生态失调治疗组及微生态失调对照组的不良妊娠结局。结果 560例研究对象中,阴道微生态正常 335 例（59.82%）,微生态失调225例（40.18%）。225例微生态失调孕妇中,细菌性阴道病（bacterial vaginosis,BV）32例（14.22%）,阴道假丝酵母菌病（vulvovaginal candidiasis,VVC）56例（24.89%）,滴虫性阴道炎（triehomonal vaginitis,TV）11例（4.89%）,BV和VVC混合感染4例（1.78%）,BV和TV混合感染3例（1.33%）,菌群增殖过度75例（33.33%）,菌群抑制44例（19.56%）。微生态失调组pH值>4.5、过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶阳性比例均明显高于微生态正常组（χ2=55.59~340.06,Ps0.05）。结论 妊娠中晚期容易导致阴道微生态失调,造成不良妊娠结局,乳杆菌活菌胶囊纠正阴道微生态失调对于改善不良妊娠结局有较好的预防作用。     

乳酸菌阴道胶囊联合甲硝唑栓对妊娠晚期BV患者阴道乳酸菌及妊娠结局的影响

目的 探讨乳酸菌阴道胶囊联合甲硝唑栓对妊娠晚期细菌性阴道病（BV）患者阴道乳酸菌数量及妊娠结局的影响。方法 选取产科门诊治疗的妊娠晚期BV妇女110例,随机分为观察组和对照组各55例。观察组予以乳酸菌阴道胶囊（1粒/晨,1次/d）联合甲硝唑栓（1粒/晚,1次/d）阴道给药,对照组予以单纯甲硝唑栓阴道给药治疗,用法与用量同观察组,两组疗程均为10 d。治疗结束后1周复诊观察阴道乳酸菌数量,并比较其临床疗效、妊娠结局及阴道假丝酵母菌病（VVC）的发生率。结果 1周后复诊,观察组患者阴道乳酸菌数量多于对照组（χ2=24.44,P0.05）。观察组和对照组分别诱发VVC 2例（3.64%）和8例（14.55 %）,观察组VVC发生率低于对照组（χ2=3.96,P<0.05）。结论 妊娠晚期BV患者予以乳酸菌阴道胶囊和甲硝唑栓联合治疗的疗效确切,能增加阴道乳酸菌数量,纠正阴道菌群紊乱,减少VVC的发生率,从而减少早产发生率,改善妊娠结局。     

移植胚胎数目对高龄不孕患者IVF—ET结局的影响

目的：探讨移植胚胎数目对高龄不孕患者IVF—ET结局的影响。方法：根据移植胚胎个数将年龄超过35岁的不孕患者338个周期分为单胚胎移植组（I组）,2个胚胎移植组（Ⅱ组）,3个胚胎移植组（Ⅲ组）。分析患者IVF治疗情况并按年龄分层比较三组患者的IVF-ET结局。结果：高龄不孕患者行IVF,随年龄增加,获卵数、优质胚胎率和临床妊娠率降低,流产率呈增高趋势。Ⅰ组的妊娠率9．43％,显著低于Ⅱ组（24．24％）和Ⅲ组（31．37％）（P〈0．05）。对于40岁以下的患者,移植3个胚胎的妊娠率与移植2个胚胎差无异,但显著高于移植1个胚胎（P〈0．05）。增加40岁以上患者移植胚胎的数目,妊娠率未出现有统计学意义的升高。三组的胚胎种植率分别为9．43％,12．12％和12．2％,无统计学差异。Ⅲ组中多胎率12．5％（6／48）,其中35-36岁年龄段多胎率16．67％（5／30）。结论：高龄不孕患者可移植的胚胎数目随年龄增加和获卵数目降低而降低。其中较年轻者（35-36岁年龄段）,移植3个胚胎,对妊娠率提高无明显效果,但多胎发生显著增加。     

Inhibition of embryo implantation in mice through vaginal administration of a proprotein convertase 6 inhibitor

Uterine proprotein convertase 6 (PC6) plays a critical role in embryo implantation in both mice and women. It was hypothesized that inhibiting uterine PC6 could prevent pregnancy. Vaginal administration of a PC6 inhibitor presents the ideal route for local drug delivery. A peptide-based PC6 inhibitor, C-30k-PEG Poly R that was previously shown to have properties of increased vaginal absorption and penetration was tested for its contraceptive potential in mice following vaginal administration. The study demonstrated that this approach could inhibit embryo implantation in some mice (24% completely and 47% partially inhibited).     

Inhibition of rat embryo implantation in the gossypol-treated uterine horn

We have developed a method to test the effect of gossypol on prevention of embryo implantation in the uterine horn. On the day of proestrus, gossypol (at a dose of 50, 100, 150, 200 and 500 mug per uterine horn was injected directly into the lumen of the right uterine horn. The left uterine horn was injected with 100 mul buffer. The rats were then mated with fertility proven males on the same day. The day of sperm-positive vaginal smear was designated as Day 0 of pregnancy. The number of implantation sites in both control and gossypol-treated horns was examined on Day 8 of pregnancy by laparotomy. The number of pups born was counted after parturition. At laparotomy, the percentages of pregnant animals with positive implantation sites in the gossypol-treated uterine horn (at a dose of 500, 200, 150, 100 and 50 mug per uterine horn) were 0, 0, 0, 10 and 44%, respectively. By contrast, implantation sites were present in 100% of the control horns of the same rats. The average numbers of total implantation sites in both horns vs the number of pups born to gossypol-treated animals using 500, 200, 150, 100, and 50 mug doses were 5.60 +/- 1.25 vs 4.00 +/- 1.00, 5.83 +/- 1.30 vs 4.70 +/- 1.10, 5.80 +/- 1.10 vs 5.50 +/- 1.20, 11.50 +/- 1.00 vs 9.50 +/- 1.50 and 11.67 +/- 1.20 vs 9.30 +/- 1.20, respectively. Gossypol metabolite completely inhibited embryo implantation when administered at 5.30 mug per uterine horn. The potency of the gossypol metabolite in preventing embryo implantation is estimated to be at least 28 times higher than the parent compound.     

阴道微生态平衡与念珠菌性阴道炎研究

目的应用延华乳酸杆菌胶囊对念珠菌性阴道炎病人进行治疗,探讨阴道微生态平衡与念珠菌阴道炎的关系。方法2007年4月至2008年3月,来自我院妇科门诊确诊为念珠菌阴道炎的病人,患者年龄在17—58岁。结果对临床确诊为念珠菌性阴道炎病人进行阴道乳酸杆菌计数,之后随机分成A（205人）、B（198人）2组,分别采用微生态疗法和传统法进行治疗,并且对治愈的病人通过阴道分泌物干片法进行微生态情况的观察和念珠菌培养鉴定法来观察念珠菌性阴道炎的复发情况。结果A组病人治疗后乳酸杆菌计数：1＋者为17％（35／205）、≥2＋者为72％（148／205）和0者为11％（22／205）;B组病人则分别为52％（104／198）、20％（40／198）和27％（54／198）;念珠菌阴道炎复发率A组为10％（21／205）,B组为43％（86／198）;组间比较乳酸杆菌计数及阴道炎复发率差异均有显著性（P〈0．05）。结论阴道微生态的平衡与念珠菌性阴道炎密切相关,调整妇女阴道微生态的平衡可大大降低阴道炎的复发和提高治疗效果。     

Factors affecting pregnancy rate following nonsurgical embryo transfer in buffalo (Bubalus bubalis): a retrospective study

The objectives of this study were to determine the pregnancy rate and factors affecting it following nonsurgical embryo transfer in buffalo. Donor buffalo were superovulated with FSH, and embryos collected nonsurgically were evaluated for stage of development and quality. They were transferred nonsurgically to 91 recipients on Days 5 to 7 of the natural (n = 52) or induced (n = 39) estrus (estrus = Day 0). The overall pregnancy rate of 24/91(26.4%) was higher than in earlier reports for buffalo but was much lower than in cattle. Pregnancy rates were not affected by season (autumn vs winter), side of transfer (right vs left uterine horn), or type of estrus (spontaneous vs induced). The pregnancy rate was high 11/27(40.7%) when donors and recipients were closely synchronized, while it was compromised when recipients were in estrus at +12 h (1/7, 14.3%) and at -12 h (5/27, 18.5%). Asynchrony beyond 12 h on either side resulted into conception failure. The pregnancy rate tended to increase with the increase in CL size of recipients, while stage of embryonic development had no effect. The transfer of an 8-cell embryo with a 16-cell embryo led to the birth of heterosexual twins, indicating that the uterine milieu of Day 5 to 6 recipients may be tolerated by the out-of-phase 8-cell embryo, at least in the presence of a more mature embryo. Embryo quality had the greatest effect on pregnancy rate as it was higher (P < 0.005) after the transfer of Grade I than Grade III embryos (6/10, 60.0% vs 3/36, 13.9%). Assessment of returns to estrus indicated that among nonpregnant recipients, 17/67 (25.4%) embryos never matured sufficiently to prevent luteolysis through maternal recognition of pregnancy (MRP), while 14/67 (20.8%) embryos probably died following MRP. These results indicate that efforts to increase pregnancy rate following embryo transfer in buffalo should include prevention of luteolysis during the first week of transfer and a reduction in the incidence of embryonic mortality.     

Correlation of increased concentration of ovine endometrial cyclooxygenase 2 with the increase in PGE2 and PGD2 in the late luteal phase

The effect of intraoviductal embryos on endometrial receptivity was studied by intraendometrial and intrauterine embryo transfer. Five-week-old female ICR mice were mated after superovulation; a vaginal plug confirmed day 1 of pregnancy. On day 4 (90 h after hCG injection), blastocysts were collected and transferred to pseudopregnant female mice and to recipient mice in which the uterotubal junction had been ligated bilaterally on day 1 of pregnancy. Three embryos per uterine horn, a total of six embryos per recipient mouse at days 1-6, were transferred to the endometrium or uterine cavity and implantation and pregnancy rates were calculated. The implantation rate for intraendometrial embryo transfer to recipients of days 3, 5 and 6 was significantly higher for uterotubal junction-ligated mice (72.2, 20.8 and 9.7%, respectively) than for pseudopregnant mice (55.0, 8.3 and 0.0%, respectively). The implantation rate for intrauterine embryo transfer to recipients at days 2, 5 and 6 was significantly higher for uterotubal junction-ligated mice (11.1, 25.0 and 8.3%, respectively) than for pseudopregnant mice (0.0, 3.3 and 0.0%, respectively). Uterotubal junction-ligated mice achieved implantation and bore neonates by intrauterine embryo transfer on days 2 and 6, whereas no implantation was achieved in pseudopregnant mice. The difference in implantation rate could not be explained by a difference in progesterone concentration between the groups. The distribution of proliferating cells in the endometrium was also studied immunohistochemically by use of anti-proliferating cell nuclear antigen (PCNA) antibody in the recipient mice. PCNA-positive cells were more abundant in uterotubal junction-ligated mice and demonstrated a marked extension from the epithelium to the stroma over time, in contrast to those in pseudopregnant mice. These findings indicate that an intraoviductal embryo exerts a biological effect by sending a signal to the endometrial epithelium and stroma, thus facilitating endometrial receptivity to the embryo and improving the rate of implantation.