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大肠杆菌BL21(pTrc-gsh)与酵母耦联合成谷胱甘肽的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
谷胱甘肽 (GSH)广泛存在于动、植物和微生物细胞内 ,有参与氨基酸的跨膜运输、维持细胞的还原状态等重要生理功能 ,在临床、保健品、食品等行业有广泛用途 ,如 :重金属解毒、抗氧化延缓衰老等 ,我国基本靠进口。开发高效、低成本的GSH生产工艺势在必行。谷胱甘肽的制备有化学合成法[1 ] 、提取法[2 ] 、微生物发酵法[3] 、酶法[4] 等。由于酶法合成GSH的产率高、后续的分离提取较简单而倍受关注。它是以ATP为能量供体、由γ 谷氨酰半胱氨酸合成酶 (GSHI)和谷胱甘肽合成酶 (GSHII)连续催化合成的 :谷氨酸 半胱氨酸 A… 相似文献
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Cu~(2 )作用下辣椒膜脂过氧化及倍半萜环化酶基因转录 总被引:1,自引:0,他引:1
分析了在CuCl2作用下辣椒叶片倍半萜环化酶活性、倍半萜环化酶mRNA表达、细胞GS H和GSSG代谢及膜脂过氧化。结果表明,Cu2+能诱导辣椒叶片表达倍半萜环化酶活性,酶活性的表达与相应的基因转录有关。辣椒叶片在CuCl2作用下合成了含-SH的螯合肽,相应地GSH含量下降,GSSG的含量有所上升,细胞膜脂过氧化作用加剧。推测细胞膜脂过氧化产物或GSH氧化产物可能参与了CuCl2诱导辣椒倍半萜环化酶基因表达的信号传递作用。 相似文献
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血管活性肠肽对兔支气管上皮细胞抗臭氧损伤的保护作用 总被引:6,自引:0,他引:6
用支气管刷洗法收集新西兰兔支气管上皮细胞(BEC),以臭氧(O3)攻击培养的BEC,建立细胞损伤模型。测定BEC的3H释放率计算O3的细胞毒指数(CI)、测定细胞内丙二醛(MDA)的含量反映细胞氧化性损伤的程度,测定细胞内过氧化氢酶(CAT)活性及还原型和氧化型谷胱甘肽(GSH和GSSG)的含量反映细胞抗氧化能力。观察血管活性肠肽(VIP)预处理对BEC的细胞保护作用并初步探讨其保护机制。观察到:BEC的3H释放率与O3暴露时间成正比;O3暴露2h使MDA含量和GSSG含量明显增加,GSH减少;VIP预处理呈剂量依赖性降低O3暴露的CI值、降低MDA和GSSG含量、增加GSH及GSH/GSSG比值、增加CAT活性,显示出细胞保护效应;VIP的保护效应可被放线菌素D(A-D)或蛋白激酶C阻断剂H7部分取消。结果表明:O3暴露会导致BEC损伤,VIP可通过增强BEC的抗氧化能力而保护BEC,VIP的信号在细胞内的转导途径与基因转录及依赖PKC的酶蛋白磷酸化有关。 相似文献
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谷胱甘肽的生物学功能 总被引:13,自引:0,他引:13
谷胱甘肽的生物学功能郑云郎(浙江省台州卫生学校317000)谷胱甘肽是一种由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸三种氨基酸组成的小肽,有还原型和氧化型之分。还原型谷胱甘肽分子中含有活泼的流基(-SH),故以GSH表示。2分子GSH脱氢生成氧化型谷胱甘肽(GSSG... 相似文献
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耐力训练对大鼠肝脏,股四头肌谷胱甘肽抗氧化系统酶活性的影响 总被引:9,自引:0,他引:9
目的和方法:本文通过检测大鼠肝脏、股四头肌中GSHPX、谷胱甘肽转硫酶(GST)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性及脂质过氧化(LPO)产物丙二醛(MDA)的含量变化,观察耐力训练对大鼠机体产生内源性自由基及谷胱甘肽抗氧化系统酶活性的影响。结果:SD雄性大鼠经11周跑台训练后,安静状态时肝脏中MDA含量下降,GSHPX、GSH活性下降,股四头肌中GSHPX、GST活性升高;90min定量负荷运动使大鼠肝脏中MDA含量升高,GSHPX、GST、GR活性均下降,但训练组GSHPX、GST活性恢复较快。结论:大鼠经耐力训练后提高了谷胱甘肽抗氧化系统酶的抗氧化功能,表现了良好的运动适应性,且恢复较快。值得注意的是训练组大鼠GR活性在运动后恢复期存在下降趋势,其机理有待进一步研究。 相似文献
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山葵的离体快速繁殖 总被引:1,自引:1,他引:0
1 植物名称 山葵 (Eutremawasabi)日本品种岛根 3号。2 材料类别 无菌萌发的种子苗。3 培养条件 基本培养基为自行设计的“贵山”(代号GS)配方 [其大量元素组分为 :每L含(NH4) 2 SO40 .32 1 g、KNO31 .2 81 g、KH2 PO40 .2 0 0g、CaCl2 · 2H2 O 0 .887g和MgSO4· 7H2 O0 .746g ,铁盐、微量元素和维生素组分均与MS配方相同 ]。种子萌发培养基为 :( 1 )GS 6 BA 0 .2mg·L- 1 (单位下同 ) ;芽增殖培养基为 :( 2 )GS 6 BA 0 .4;生根培养基为 :( 3)GS IBA 0 .4。蔗糖… 相似文献
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《生物技术通报》2003,(1)
030 0 0 1血管生成抑制因子TSF的设计、表达及其对血管生成的抑制效应〔中〕/沈先荣… / /科学通报 .- 2 0 0 1,46 (13) .- 10 74~ 10 80PF4的C 末端 13肽和TSP1的 42 9~ 45 9片段 31肽通过Gly Pro Gly肽桥设计为融合蛋白TSF。采用pGEX 2T载体在E .coliJM10 9中获得了TSF蛋白的高效表达。采用MTT方法、损伤细胞迁移实验、鸡胚绒毛尿囊膜实验和小鼠移植肿瘤抑制实验 ,测定了TSF及其相关物GST TSF ,PF4(5 8~ 70 ) ,TSP1(42 9~ 45 9)等对血管生成和肿瘤生长的抑制效应。结果显示TS… 相似文献
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中枢甘氨酸受体分子特性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目录一、GlyR在CNS中的分布二、GlyR的分子结构 (一 )亚单位结构 (二 )受体组装和表达 (三 )配体结合 (四 )通道孔区 (五 )通道激活 (六 )磷酸化三、GlyR分子病 (一 )家族性惊厥病 (二 )鼠惊厥综合病 (三 )肌阵挛 (四 )遗传性惊厥病的生理趋同现象四、结语甘氨酸受体 (GlyR)介导的抑制性神经传递在哺乳动物中枢神经系统 (CNS)反射活动、随意运动调节和感觉信号的处理中具有重要作用[1] 。GlyR五聚体由三个独立的多肽组成 :两个糖蛋白 (48kD和 5 8kD) ,分别称为α和 β亚单位 ,另一个为 9… 相似文献
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模拟谷胱甘肽过氧化物酶活性三肽的制备及其性质研究 总被引:1,自引:0,他引:1
开发一种制备硒代谷胱甘肽(GSeH)的新方法,以合成的谷氨酰-γ丝氨酰-甘氨酸(Glu-Ser-Gly)三肽为原料,经苯甲基磺酰氟(PMSF)活化,用H2Se突变Ser成硒代半胱氨酸(SeCys)制成GSeH.用元素分析及氨基酸分析确定此三肽的组成并推导出此三肽的结构,研究了GSeH的性质,结果表明,此三肽具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的活性,其活力比其它一些小分子有机模拟物高,在性质上出有于它 相似文献
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热休克蛋白——细胞的内源性保护蛋白 总被引:11,自引:0,他引:11
关于应激反应的最初报道是 1 962年Ri tossa等在果蝇唾液腺染色体中发现一种热诱导的“蓬松”现象 ,并具有基因转录活性[1] 。 1 974年Tissiers等从热休克果蝇唾液腺细胞中分离出一组特殊蛋白质即热休克蛋白 (heatshockprotein ,HSP)。目前根据分子量HSP可分为 6个家族 ,1 0 0~ 1 1 0kD大分子HSP家族、HSP90家族、HSP70家族、HSP60家族、HSP40家族及 1 8~ 3 0kD的小分子HSP家族。其中HSP70是最保守和研究最为深入的一种[2 ] 。在正常情况下 ,HSP70通过辅助新生肽的折叠… 相似文献
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高氧预适应对大鼠心肌缺血损伤时抗氧化酶的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
抗氧化酶具有减轻心肌缺血再灌注损伤的作用,在抗氧化酶中,比较重要的是超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GlutathionePeroxidase,GSHpx)和过氧化氢酶(CAT)。为了解高氧预适应(HyperoxicPreconditioning,HOP)对大鼠心肌缺血损伤时抗氧化酶的影响,本实验将实验组大鼠放入高压氧舱内,每日吸80-85%氧气(1atm,15-20%为氮气)6h,连续7d。利用Langendorf装置做成心肌缺血再灌注模型。实验动物随机分为二个部分。第一部分可逆性心肌缺血(HOPA组与对照A组):缺血10min,再灌注60min。观察冠脉回流液中SOD活力,检测心肌内抗氧化酶活力(SOD,GSHpx,CAT)。第二部分不可逆性心肌缺血(HOPB组与对照B组):缺血60min,再灌注60min。测定冠脉回流液中肌酸磷酸激酶(CPK)含量,SOD及心肌内抗氧化酶活力。结果表明:对于可逆性心肌缺血:SOD,GSHpx活力升高;对于不可逆性心肌缺血损伤:HOP能减少CPK释放,SOD活力升高。 相似文献
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本工作建立了臭氧对原代培养的兔支气管上皮细胞(BEC)损伤模型,观察到血管活性肠肽(VIP)、表皮生长因子(EGF)、热应激等微环境理化因子可减轻细胞损伤,具有细胞保护作用,其保护机制与提高还原谷胱甘肽(GSH)含量有关,并依赖于蛋白激酶的磷酸化调节及基因转录。BEC细胞在基础情况下有bcl-2基因的低水平表达。VIP和EGF可促进bcl-2基因转录,增强BEC的抗氧化损伤能力。EGF或热应激促进 相似文献
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用1HNMR法测定TDK肽在H2O(HODK),50%六氟丙醇(FPDK)和2mol/LGu·HCl(GUDK)中的溶液构象。在HODK和FPDK中,TDK肽的两段序列Asp0~Ile4,Ser9~Ile17分别具有较稳定的α-螺旋含量;而GUDK的SALS序列仍能检测到有序残存结构。并假设SALS序列是肽链形成二级结构的原始核心。 相似文献
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开发一种制备硒代谷胱甘肽(GseH)的新方法。以合成的谷氨酰-γ-丝氨酰-甘氨酸(Glu-Ser-Gly)三肽为原料,经苯甲基磺酰氟(PMSF)活化,用H_2Se突变Ser成硒代半脱氨酸(SeCys)制成GSeH。用元素分析及氨基酸分析确定此三肽的组成并推导出此三肽的结构。研究了GSeH的性质.结果表明,此三肽具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的活性,其活力比其它一些小分子有机模拟物高,在性质上也有优于它们的一些特点,其动力学行为与天然GPX类似。 相似文献
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用HNMR法测定TDK肽在H2O(HODK),50%六氟丙醇(FPDK)和2mol/LGu.HCl(GUDK)溶液构象。在HODK和FPDK中,TDK肽的两段序列Asp0-Ile4,Ser9-Ili17分别具有较稳定的α-螺旋含量;而GUDK的SALS序列仍能检测到有序残存结构。并假设SALS序列是肽链形成二级结构的原始核心。 相似文献
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热应激对支气管上皮细胞的抗臭氧细胞保护作用 总被引:3,自引:0,他引:3
本研究在臭氧(O3)对培养的兔支气管上皮细胞损伤模型上观察了热应激处理对支气管上皮细胞抗O3损伤的保护效应,并初步探讨其机制。结果表明,42℃热应激处理30min可明显降低O3攻击下的细胞毒指数(CI)及细胞内MDA含量,表示热应激对支气管上皮细胞具有细胞保护作用。进一步观察表明,热应激预处理可增加细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)含量、降低氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量、增加GSH/GSSG比值,并能增加两型谷胱甘肽的总量。结果提示热应激的细胞保护作用机理可能与其增加从谷胱甘肽合成及增强谷胱甘肽还原酶活性,提高细胞自身的内源性抗氧化能力有关。 相似文献
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牛奶子的组织培养及植株再生 总被引:1,自引:0,他引:1
1 植物名称 牛奶子 (Elaeagnusumbellata) ,又称甜枣、羊奶子。2 材料类别 幼苗的下胚轴。3 培养条件 ( 1 )MS 6 BA 1mg·L- 1 (单位下同 ) 2 ,4 D 3 IAA 0 .5 CH 30 0 ;( 2 )MS 6 BA2 2 ,4 D 2 NAA 0 .5 CH 30 0 ;( 3)MS 6 BA3 2 .4 D 1 IBA 0 .5 CH 30 0 ;( 4 )MS 6 BA1 .5 IAA 0 .5;( 5)MS 6 BA 1 .5 NAA 0 .5;( 6)MS 6 BA 1 .5 IBA 0 .5;( 7)MS 6 BA 0 .2 IAA 0 .5 GA 0 .5;( 8)MS 6 BA 0 .2 IAA 0 .1 GA… 相似文献
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报道了一种新的具有抗吗啡镇痛活性的肽的分离纯化,并进行部分一级结构测定.狗脑先经醋酸提取,冷冻成干粉,然后上SephadexG-50和S-SepharoseF.F柱,最后经RP-HPLC纯化,鉴定纯度后,测定其抗吗啡镇痛活性,通过SDS-PAGE法测得其分子量为8.9kD.氨基酸序列分析测得该肽的N端序列为:V-I-S-V-A-D-W-T-Q-I-F-T-M-R-Y-F-I-T-G-Y-H-Q-D-Y-X-G-L-H-I-G.经部分一级结构同源序列检索,未见与此有同源的蛋白质的报道,暂命名该肽为CC4肽 相似文献
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肝细胞生长因子的生物学功能与应用 总被引:1,自引:0,他引:1
肝细胞生长因子 (hepatocytegrowthfactor,HGF)又称扩散因子 (Scatterfacator,SF) ,最初是从血浆和血小板中纯化获得并认为是一种刺激肝细胞生长增生的有丝分裂原 ,对肝切除或化学损伤后的肝再生起重要作用[1] 。 1984年 ,Nakamura等从部分肝切除的大鼠血清中分离到一种能刺激原代培养的肝细胞生长和合成的肝源性因子 ,并首次将它命名为肝细胞生长因子[2 ] 。自从HGF的发现至今 ,国内外对其作了许多研究 ,对它的来源、结构、功能乃至基因序列都已有了较为全面、透彻的了解。目前已知H… 相似文献