蒙药乌力吉-18对大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴相关激素及受体表达的影响

目的:探讨蒙药乌力吉-18对大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴相关激素及受体的影响。方法:选取40只健康雌性未孕SD大鼠,随机分为空白组、对照组、乌力吉-18高、低2个剂量组,每组10只。空白组灌胃等体积蒸馏水,对照组灌胃逍遥丸,高、低剂量组分别灌胃2.0 g·kg^-1·d^-1、1.0 g·kg^-1·d^-1乌力吉-18,连续给药31学艺术d。采用酶联免疫吸附法测定血清促性腺激素释放激素(GnRH)、促卵泡生成素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E₂)及孕酮(PROG)的含量;免疫组化法检测下丘脑组织促性腺激素释放激素(GnRH)、垂体组织促性腺激素释放激素受体(GnRHR)的表达;以蛋白免疫印迹技术检测卵巢组织促卵泡生成素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHR)蛋白表达量。以实时荧光定量PCR检测卵巢组织中FSHR、LHR基因表达量。结果:与空白组比较,乌力吉-18低剂量组可明显升高血清LH含量(P<0.05),上调下丘脑组织GnRH、垂体组织GnRHR表达及卵巢组织FSHR、LHR蛋白表达(P<0.05);乌力吉-18高剂量组可显著升高血清FSH、LH、E₂含量(P<0.05),上调下丘脑组织GnRH表达及卵巢组织FSHR表达量(P<0.05),并可显著升高卵巢组织中FSHR、LHR基因表达量(P<0.05);对照组可明显升高血清E₂含量(P<0.05)。结论:蒙药乌力吉-18可明显升高血清FSH、LH及E₂的含量,促进下丘脑组织GnRH、垂体组织GnRHR及卵巢组织中FSHR、LHR的表达,表明乌力吉-18能够对下丘脑-垂体-卵巢轴相关激素及受体表达产生影响。     

雌性哺乳动物促卵泡素受体与促黄体素受体的结构与表达

本文从雌性哺乳动物促卵泡素受体(FSHR)和促黄体素受体(LHR)的结构及在卵泡发育过程中的表达和功能加以综述,指出FSHR及LHR在卵泡的生长发育、优势化及排卵等方面具有重要的功能。     

FSHR、LHR基因突变与多态对女性生殖的影响

卵泡刺激素(FSH)与黄体生成素(LH)促进性腺的发育和成熟、调节人类配子的产生,在生殖方面起着关键的作用。两受体(FSHR与LHR)的突变会导致生殖能力的改变,出现一系列临床症状,引起组织学,分子水平等多方面的变化,同时FSHR的多态性与卵巢反应性、女性的月经周期等许多方面相关。本文从多方面阐述FSHR与LHR对女性生殖的影响。     

不同培养时间对鸡卵泡颗粒细胞孕酮、雌激素分泌水平及FSHR、LHR基因表达的影响

目的：研究培养不同时间鸡卵泡颗粒细胞孕酮和雌激素的分泌水平,促卵泡素受体（FSHR）和促黄体素受体（LHR）的基因表达水平,推断体外培养时间对颗粒细胞激素分泌及相关受体基因表达的影响。方法：通过细胞体外培养的方法,分别于0 h、24 h、48 h、72 h、96 h收集鸡卵泡颗粒细胞上清液,采用ELISA法测定细胞上清液内的孕酮及雌激素分泌水平,并采用荧光定量PCR技术检测颗粒细胞内FSHR和LHR基因表达情况。结果：在培养初期0 h~48 h孕酮和雌激素分泌量显著降低（P < 0.05）,随着培养时间增加到72 h两种激素的分泌量又开始增加,并达到培养初期水平,培养至96 h细胞内孕酮和雌激素分泌量再次降低;颗粒细胞FSHR和LHR mRNA的表达水平则随着培养时间的增加而降低（P < 0.05）。结论：体外培养的卵泡颗粒细胞内孕酮和雌激素的分泌量随体外培养时间的延长呈先降低后升高的趋势,可能与体外培养细胞的生长状态相关,从整体上看随着培养时间的延长,细胞内孕酮和雌激素的分泌量均降低,可能与两种促性腺激素受体FSHR和LHR基因表达量下降相关。     

GH受体、IGF-I型受体、FSH受体和LH受体mRNA在绍鸭各级卵泡颗粒层和膜层中的表达

采用相对定量反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法,以β-actin为内标,测定绍鸭排卵前卵泡F1、F3、F5及大白卵泡(LWF)颗粒层与膜层中GH受体(GHR)、IGF-I型受体(IGF-IR)和FSH受体(FSHR)、LH受体(LHR)mRNA表达水平,以分析生长轴和生殖轴激素对绍鸭卵泡发育的协同调节作用。结果表明：在所测定的各级卵泡中,GHR mRNA在膜层的表达水平均显著高于颗粒层,膜层中大白卵泡表达量最高,而颗粒层中GHR mRNA水平在各级卵泡之间没有明显差异;相反,IGF-IR mRNA在同级卵泡颗粒层的表达水平显著高于膜层,颗粒层和膜层中IGF-IR mRNA表达在各级卵泡之间的差异均不显著,只是大白卵泡的膜层与其他等级卵泡的膜层相比,IGF-IR的表达量呈现较高的趋势;FSHR mRNA表达的变化趋势类似于IGE-IR,同级卵泡颗粒层中的表达量高于膜层;LMR mRNA在各级卵泡膜层中表达没有明显差异,而颗粒层中IMR mRNA随着卵泡发育成熟逐级显著增加,且F5和LWF卵泡膜层的IMR mRNA显著高于颗粒层,与GHR mRNA的表达相似。结果提示,GH和IGF-I调节卵巢功能的优势作用位点和机制不尽相同;GHR和LHR协同表达与IGF-IR和FSHR协同表达可能对卵泡发育起到精细的调节作用;而IMR在卵泡颗粒层中表达的逐级显著增加可能与卵泡等级的建立和排卵有关。     

籽鹅不同等级卵泡生殖相关激素受体基因的表达

目的：检测籽鹅不同等级卵泡不同生殖相关激素受体mRNA的表达。方法：选用1只8月龄产蛋期籽鹅,处死后分离各级别卵泡（F1、F2、F3、F4、F5、SYF、LWF）,采用实时荧光定量PCR方法检测促卵泡激素受体（FSHR）、促黄体生成素受体（LHR）、雌激素受体α（ER α）、雌激素受体β（ER β）、生长激素受体（GHR）和胰岛素样生长因子结合蛋白-1（IGFBP-1）6种生殖相关激素受体mRNA的表达量变化。结果：SYF和LWF中LHR、GHR和IFGBP-1 mRNA表达量较低,而F1-F5级卵泡中表达量较高;SYF和LWF中ER βmRNA表达量较高,而等级卵泡中表达量较低。结论：本实验研究了不同等级卵泡FSHR、LHR、ER α、ER β、GHR和IGFBP-1 mRNA的变化规律,为研究禽类产蛋机制提供基础数据。     

沉默Smad8基因对小鼠卵泡颗粒细胞增殖的影响

SMAD8(又称SMAD9)蛋白质是TGF-β/SMADs信号通路中重要的转录因子。该研究利用RNA干扰技术沉默Smad8基因,探讨该基因对小鼠卵泡颗粒细胞增殖的影响。免疫组化技术对SMAD8在小鼠卵泡的表达进行定位,设计并合成Smad8-si RNA转染小鼠颗粒细胞,荧光定量PCR(q PCR)和Western blot检测Smad8基因沉默效率,CCK-8法分析颗粒细胞增殖能力,ELISA检测细胞上清中雌二醇(E2)和孕酮(P4)浓度,q PCR检测颗粒细胞促卵泡素受体(follicle stimulating hormone receptor,FSHR)、促黄体素受体(luteinizing hormone receptor,LHR)以及与细胞增殖相关的细胞周期调控蛋白基因Cyclin D2和CDK4 m RNA水平。结果显示,SMAD8仅表达于卵泡的颗粒细胞,Smad8-si RNA有效抑制了Smad8的表达(P0.01),Smad8沉默后颗粒细胞的增殖能力明显减弱,细胞上清中E2水平显著下降,P4水平未受影响,颗粒细胞LHR、Cyclin D2和CDK4 m RNA水平明显降低,FSHR m RNA无明显变化。以上结果表明,沉默Smad8基因降低了小鼠颗粒细胞的增殖能力,其机制可能与沉默Smad8调低了颗粒细胞增殖分化相关的E2合成以及LHR、Cyclin D2和CDK4的表达下降有关。     

黄体生成素受体基因在牦牛发情周期不同阶段生殖系统中的表达模式

旨在检测黄体生成素受体(Luteinizing hormone receptor,LHR)基因在牦牛发情周期不同阶段生殖系统中的表达。实验选取青海健康的处于卵泡期和黄体期的2岁龄雌性牦牛各3头,根据黄牛LHR基因序列5'端和3'端的保守序列设计特异性引物,利用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)法分析牦牛发情周期不同阶段,生殖系统中LHR基因的相对表达量。结果显示,LHR基因在牦牛发情周期不同阶段生殖系统中的表达量存在差异,卵巢和输卵管中卵泡期LHR基因的表达量高于黄体期,黄体期子宫中LHR基因的表达量高于卵泡期。研究表明牦牛在发情周期不同阶段生殖系统中LHR基因的表达量存在差异,提示LHR在牦牛的繁殖过程中对生殖系统具有重要的调节作用。     

胰岛素样生长因子-Ⅰ受体和LH受体mRNA在黄体中的表达及调节

研究了大鼠卵巢黄体中胰岛素样生长因子-Ⅰ受体(IGF-ⅠR)与促黄体激素受体(LHR)的表达关系及调节. 在动情周期中, LHR阳性黄体能表达高水平的IGF-ⅠR mRNA. 动情期黄体的LHR表达水平降低, 而IGF-ⅠR表达仍较高. 假孕第1天黄体中LHR表达较低,第8天达最高水平, 第14天表达已降低到检测不到的程度. 与LHR表达不同, 在第1天假孕黄体中IGF-ⅠR的表达已较高, 此后至第14天在黄体中均检测到IGF-ⅠR信号. 孕鼠黄体同时表达LHR 和IGF-ⅠR mRNA. IGF-Ⅰ刺激LHR mRNA在黄体中的表达. 前列腺素(PG)F抑制IGF-ⅠR和LHR的表达. PGE2能消除PGF对IGF-ⅠR和LHR mRNA表达的抑制作用. 上述结果提示:IGF-Ⅰ可能通过其受体的表达变化参与调节黄体功能、维持黄体结构. PGF抑制IGF-ⅠR的表达可能是黄体萎缩的机制之一.     

雷州黑鸭FSHR和ESR1与繁殖性状关联分析

旨为探究产蛋基因FSHR和ESR1对雷州黑鸭的影响。采用荧光定量PCR对FSHR和ESR1在雷州黑鸭0-120 d的下丘脑-垂体-卵巢轴的表达规律进行研究,并通过PCR-SSCP对FSHR和ESR1的多态性与繁殖性状关联分析。结果表明,FSHR在0-90 d表达量总体呈稳定上升趋势,但在90-120 d下丘脑和垂体表达量略微下调,差异不显著(P0.05);ESR1表达量在0-120 d表达量总体呈上升趋势,但在90 d卵巢表达量出现波动,差异不显著(P0.05);FSHR的SNP(g.856937GA,g.922947AG)和ESR1的SNP(g.190744AG)与雷州黑鸭产蛋量显著相关(P0.05),但与雷州黑鸭蛋品质关联不显著。以上结果提示:FSHR和ESR1对雷州黑鸭早期性腺发育起着重要作用,且3个SNP位点均可作为雷州黑鸭重要的产蛋标记基因。