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从堆肥和污泥中分离到一批抗药性高温细菌,经电泳检查,发现6株高温细菌细胞中有质粒存在。其中,嗜热脂肪芽孢杆菌T653的细胞DNA提取液电泳图谱上,有三条非染色体DNA条带,用电镜直接观察,证明它们是T653细胞中的三个质粒。测得两个较小质粒的分子量分别为3.6×10~6和45×10~6道尔顿。研究了嗜热脂肪芽孢杆的T653的温度生长条件与其细胞中质粒的关系。T653细胞中三个质粒的明确功能有待进一步探讨。 相似文献
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嗜热脂肪芽孢杆菌HY—69耐热中性蛋白酶的性质研究 总被引:3,自引:0,他引:3
嗜热脂肪芽孢杆菌HY-69的耐热中性蛋白酶已纯化。研究了纯酶的性质,该酶分子最为24kd,由6个构成一个六聚体。酶的等电点9.15。最适作用pH为7.5,最适作用温度为85℃;该酶具有很好的耐热性,90℃时酶活半寿期为22min,80℃保温3小时,酶活仍保持63%;酶的pH稳定性也好,该酶是金属蛋白酶,活性中心含锌离子,酶的热稳定性依赖于钙离子。测定了酶的氨基酸组成和N末端氨基酸序列。 相似文献
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固定化嗜热脂肪芽孢杆菌合成低聚半乳糖 总被引:7,自引:2,他引:7
利用海藻酸钙、明胶和壳聚糖为固定化载体包埋嗜热脂肪芽孢杆菌细胞合成低聚半乳糖 (GOS)。通过比较三种方法的酶活力回收、最适反应条件、GOS的得率和和载体机械强度 ,选择明胶作为固定化细胞的载体。反应体系的温度、pH、乳糖浓度、乳糖的转化率和载体的传质阻力对GOS合成有明显影响。在CSTR反应器中水解 60 %乳糖 ,GOS最大得率为31 2 % ,经过 96h( 8批反应 ) ,产物得率为原来的 88%。在空速 0 0 9h- 1条件下 ,利用填充床反应器连续水解乳糖 ,GOS的得率和反应器生产能力分别为 31 5%和 1 7 4g (L·h) ,连续反应1 40h,GOS得率下降 2 0 %。产物经过活性炭柱层柱分离纯化 ,通过13C NMR鉴定四糖的化学结构为 β D Gal ( 1→ 3) D Gal ( 1→ 6) D G ( 1→ 4) D Glu。 相似文献
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以嗜热脂肪芽孢杆菌为材料,通过PolyminP沉淀,硫酸铵分级及Phenyl-Sepharose,DEAE纤维素,磷酸纤维素,FPLC MonoQ,FPLC Superose12等柱层析,得到部分纯化的DNA解链蛋白1。BstH1具有依赖DNA和Mg^2+的ATP酶活力,不同类型的核酸对BstH1的ATP酶活力的促进作用不同。 相似文献
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植物染色体显微切割技术的研究现状与展望 总被引:10,自引:0,他引:10
植物染色体显微切割技术的研究现状与展望马有志徐琼芳辛志勇(中国农业科学院作物育种栽培研究所,北京100081)TheAdvancesoftheTechniqueofPlantChromosomeMicrodisectionMaYouzhiXuQion... 相似文献
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固定化嗜热脂肪芽孢杆菌连续合成半乳糖寡糖的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
利用固定了产β-半乳糖苷酶的嗜热脂肪芽孢杆菌,以乳糖为底物,在纤维床反应器中连续合成半乳糖寡糖(GOS),最高得率为50.7%。在连续反应体系中,研究了底物浓度、pH、反应温度和停留时间对半乳糖寡糖合成的影响,确定最佳反应条件为底物浓度450 g/L、反应温度55℃、pH7.0、停留时间100 min。在连续反应24h后,流加1.5%的D-半乳糖能提高合成GOS的能力,固定化细胞反应体系中连续稳定操作120 h。 相似文献
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Abstract Using promoter-probe plasmids, more than 200 promoter-containing fragments from Bacillus stearothermophilus and Bacillus subtilis were cloned in B. subtilis . Among these, 15 promoter fragments were highly temperature-dependent in activity compared to the promoter sequence (TTGAAA for the −35 region, TATAAT for the −10 region) of the amylase gene, amyT , from B. stearothermophilus . Some fragments exhibited higher promoter activities at elevated temperature (48°C), others showed higher activities at lower temperature (30°C). Active promoter fragments at higher and lower temperatures were obtained mainly from the thermophile ( B. stearothermophilus ) and the mesophile ( B. subtilis ), respectively. A promoter fragment active at high temperature was sequenced, and the feature of the putative promoter region was discussed. 相似文献
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表面活性剂对嗜热脂肪芽孢杆菌产高温蛋白酶的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
研究了表面活性剂对嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillusstearothermophilus)WF146产胞外高温蛋白酶的影响。结果表明,表面活性剂Tween80在0.05%~0.1%(体积比)浓度范围内对WF146产酶有一定的促进作用。在培养基中添加0.1%Tween80可使发酵液酶活提高12.7%,Tween20和TritonX100则抑制嗜热脂肪芽孢杆菌WF146产酶。另外,TritonX100抑制嗜热脂肪芽孢杆菌WF146生长,而Tween80和Tween20不抑制其生长。 相似文献
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Abstract Bacillus stearothermophilus DNA fragments containing a promoter were isolated in Escherichia coli using a shuttle promoter-probe vector. The molecular sizes of the isolated fragments ranged from 0.78 to 10 kb. The 0.78 and 1.1 kb fragments were selected and examined in some detail for promoter activity in both E. coli and Bacillus subtilis by analysis of expression of erythromycin-resistance (Emr ) and β-galactosidase. The results showed that the two fragments exhibit a high promoter activity in both bacteria. In vitro promoter activity of the 1.1 kb fragment was also shown by RNA syntheses catalyzed by RNA polymerases prepared from E. coli, B. subtilis and B. stearothermophilus . 相似文献
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We studied the segregational stability of plasmids based on pTB913, a 4.5-kb rolling-circle plasmid derived from the thermophilic Bacillus plasmid pTB19. In Bacillus stearothermophilus the stability of pTB913 derivatives appeared to be strain-dependent. In strain CU21 large amounts of single-stranded pTB913 DNA were found and the plasmid was highly unstable at 57 degrees C. In strain NUB3621, however, very low amounts of single-stranded plasmid DNA were formed and pTB913-based replicons were only slightly unstable at 57 degrees C. The NUB3621/pTB913 host-vector system seems appropriate for molecular cloning. A RepA-based replicon, also derived from pTB19 but replicating by a theta mechanism, was highly unstable in B. stearothermophilus NUB3621. 相似文献
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嗜热脂肪芽孢杆菌HY-69耐热中性蛋白酶的性质研究 总被引:1,自引:0,他引:1
嗜热脂肪芽孢杆菌HY-69的耐热中性蛋白酶已纯化。研究了纯酶的性质;该酶分子量为24kd,由6个单体构成一个六聚体。酶的等电点9.15.最适作用pH为7.5,最适作用温度为85℃:该酶具有很好的耐热性,90℃时酶活半寿期为22min,80℃保温3小时,酶活仍保持63%;酶的pH稳定性也很好。该酶是金属蛋白酶,活性中心含锌离子,酶的热稳定性依赖于钙离子。测定了酶的氨基酸组成和N末端氨基酸序列。 相似文献
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嗜热脂肪芽孢杆菌高温蛋白酶分解毛发角蛋白的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
本文研究了嗜热脂肪芽孢杆菌 (Bacillusstearothermophilus)WF - 1 4 6高温蛋白酶对毛发角蛋白的水解作用。结果表明 ,在体积分数为 2 %的巯基乙醇存在的条件下 ,WF - 1 4 6高温蛋白酶对毛发角蛋白有明显的水解作用。对酶解液氨基酸分析表明 ,酶解液中含有对照液中没有的游离蛋氨酸和亮氨酸 ,且游离氨基酸总量是对照样品的 2 .4倍 ,达 1 5 8mg·L-1 。此外 ,酶解液中含有大量的肽 相似文献