数学模型预测细胞培养物的生长

商品化的植物细胞培养物要求其生长率可重复,批量之问只能有很小变化。在研究罂粟(Papaversomniferum)细胞培养物的生长动力学时,Furdue大学的W.R.Curtis及同事们观察到,用不同瓶中的培养物接种,其生长率的变化是“惊人的”。 Curtis的小组测定出磷酸盐为限制生长物质,他们开发了一种数学生长模型,该模型可根据细胞的胞内磷含量算出培养物的生长率。实验表明,该模型能够根据种菌的胞内磷含量预测培养物的线性生长特性及依赖种菌的生长变化性。研究者说:该模型提供了“在批量培养中预测和控制生长率的数学基础。培养     

云南红豆杉细胞发酵培养的研究

利用云南红豆杉(Taxus yunnanensis)细胞悬浮培养的最佳培养条件,进行了细胞10L规模的发酵培养研究。对细胞发酵培养过程中的pH值变化、糖利用率以及细胞生长周期等实验参数进行了测定。已进行的3次发酵培养的实验结果表明:培养细胞的生长率已达0.4g/L.d(即12.0g/L),培养细胞中紫杉酵的含量为0.119％(其中培养液中的紫杉醇含量约占42％)。初步建立了优化的云南红豆杉细胞大量培养系统。     

感染柑桔裂皮病类病毒的悬浮细胞的一些特性

爪哇三七(Gynura aurantiaca D.C.)是柑桔裂皮病类病毒(Citrus Exocortis Vi-roid,简称CEV)敏感的指示植物。我们建立了健康和CEV感染的爪哇三七悬浮细胞培养的体外系统。绘制了悬浮细胞培养的生长曲线、pH曲线和温度曲线。CEV可以在悬浮细胞中复制。对继代培养中CEV和寄主核酸的连续测定表明CEV的扩增阻遏了寄主核酸的复制。     

测定固定化细胞对植物毒性剂反应的方法

筛选离体培养物以获取具化学或物理植物毒性剂抗性的细胞,需要一种测定这类试剂对细胞生长或活力影响的方法。如细胞计数、称重法、细胞容积法、有丝分裂指数和活力染色等方法都繁琐费力,而且是破坏性的,还需使用昂贵的仪器。耶路撤冷Hebrew大学的T.Tepper、M.Ziv和A.Ashri发明了一种快速、简便的非破坏性光度测定法,测定固定化植物细胞对植物毒性剂的生长反应。Tepper小组将天门冬属Asparagus officinalis细胞固定于琼脂滴中,在回转摇床上培养于液体生长培养基上。每2或3天将琼脂滴置于显微镜下观察。     

细胞体外生长的检测

植物细胞悬浮物生长测定需要取样、样品称重或测量.然而,植物细胞往往形成团聚体,这就使其难以获得匀质的样品.此方法劳动强度大,不准确且易受污染. 瑞士联邦工学院的M.Taya等人利用培养基的传导性变化研究了一个连续测定植物细胞生长的方法.干细胞质量与细胞悬浮物和“膜-底船式”培养物(咖啡、长春花、烟草和     

超声诱导基因转移

植物基因工程的关键技术之一,是把外源基因导入植物细胞.目前,植物细胞的基因转移方法有:(1)农杆菌Ti或Ri质粒载体法;(2)病毒载体法;(3)磷酸钙核酸沉淀吸收法;(4)PEG介导DNA直接转移法;(5)脂质体载体法;(6)显微注射法;(7)电激基团转移法:(8)基因枪喷射法;(9)激光微束法等.前两种方法是以生物体作为载体介导基因转移,属生物方法中间三种方法是以化学药物介导基因转移.属化学方法;后四种是以物理手段介导基因转(?)属物理方法.由于物理方法操作比较简单,不受宿主范围的限,因此近年(?)发展迅速.     

利用植物组织培养纯化病毒

植物病毒的实验室研究需要大量纯化的病毒材料源.Agriculture Canada的P.L.Monette和D.James似乎已发现了这一来源.他们从接种了植物病原体葡萄病毒A.的烟草Nicotiana benthamiana小植株建立了离体节培养物.与无病毒培养物相比,有病毒存在时对组织培养生长率无明显影响.当增殖组织培养物达20g时,比较了此培养物病毒含量与感染病毒的温室保存植物叶片所含病毒量.结果表明,从组织培养物获得的病毒量几乎比温室保存植株所含量高4倍.     

医药上的应用

抗生素和干扰素 951 505 铜绿假单胞曹中生长率和营井素限棚对monobac— tam生产及肽葡聚糖合成的影响[英l/Allison, D.G.…,I.Basic.Microbi01.一1994,84(4). 一217~224E译自DBA,1994,18(20),94—115203 研究了连续培养铜绿假单胞菌ACCl3234过程中生长率和营养素限制对monobactam生产、肽聚糖含量及平均细胞长度的影响。将该菌置于含化学合成基本盐培养基的1l恒化器中,于30℃、恒定搅拌(250rpm)条件下培养,在OE(E470)为2.0时生长停止,这是由葡萄糖(C-限制)或硫酸铵(N·限制)的缺失造成的。所有8种参数随着生长率的增长而增加,C一限…     

Takayama pulchellum原位增长率测定的研究

现今用于测定有害藻华生物原位增长率的方法很难在现场进行有效地应用,因此我们尝试采用基于rRNA、叶绿素和总蛋白质浓度的定量测定方法来估算其细胞增长率.本研究重点对Takayama pulchellum细胞株(TPXM)的rRNA含量和特定生长率的关系进行了探索.用荧光标记的肽核酸探针结合全细胞杂交方法,结合流式细胞仪和专业图像分析软件对T.pulchellum单细胞水平的rRNA进行了定量检测.结果表明不同生长阶段的T.pulchellum单细胞rRNA水平与其相应的细胞特定生长率有较好的相关关系(R2=0.7293,p＜0.01,n=14),单细胞蛋白质含量、rRNA水平与同步后的细胞周期变化情况也有较好的相关关系(R2＝0.6984,p＜0.01,n=14).上述结果提示单细胞rRNA含量可作为指示细胞周期变化和细胞特定生长率的较好指标.     

豌豆组织培养中器官的分化生长过氧化物酶同工酶及核酸含量的变化

在豌豆的离体组织中比较研究了培养基中不同浓度的氮源、蔗糖和细胞激动素(BA)对于培养组织的生长、过氧化物酶同工酶及核酸含量的影响。试验结果表明,培养基中上述因素的变化对外植体芽苗的分化生长有明显影响。在氮源(总氮量、NO_3~-和NH_4~ 的不同比例)、蔗糖浓度和激素水平都适宜时最有利于培养组织的细胞生长与分化。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离培养组织过氧化物酶同工酶的结果表明,过氧化物酶同工酶带数与外植体的生长速度有密切关系,亦即外植体的过氧化物酶同工酶带与外植体的生长速度呈正相关趋势。核酸含量的变化得到了相应结果。     

营养和环境因子对地木耳细胞生长的影响

采用BG11培养基研究了营养、温度、pH值、光照强度和光周期等对地木耳(Nostoc commune)细胞生长的影响。结果显示:(1)Ca、N和P缺失会显著降低地木耳细胞的生长速率,明显抑制胞外多糖的分泌和蛋白质的合成,定期通入体积分数为0.3%的CO2有利于细胞增殖和蛋白质的合成;(2)随着培养温度的升高,地木耳细胞的生长速率、胞外多糖和蛋白质含量先增加然后降低,并于25℃时达最大值;(3)过酸或过碱的培养环境均不利于细胞的生长,细胞生长速率和蛋白质含量于pH为7.5时最大,而胞外多糖含量于pH为8.0时最大;(4)随着光照强度的增加,细胞的生长速率和蛋白质的合成先增加然后降低,并在2000 lx时达最大值,但胞外多糖分泌量持续增加;随着光照时间逐渐缩短,胞外多糖含量持续上升、蛋白质含量持续下降,12 h光照/12 h黑暗光周期最有利于细胞的生长。结果表明,25℃、pH 7.5、光照强度为2000 lx、光周期为12 h光照/12 h黑暗是人工培养地木耳细胞比较适宜的环境条件,而Ca、N和P是地木耳细胞必需的营养元素。     

在豌豆叶生长过程中核酸含量的变化

从豌豆植株不同叶位切下的叶子培养在无机营养的条件下,培养以后测量了叶子在生长过程中鲜重、干重和面积的变化。同时也用改进过的Sunderland和McLeish方法测定了核酸含量的变化。结果发现,在叶子的核酸含量和生长之间呈现着一种平行性,也就是,富含核酸的幼叶生长最快,而核酸低含量的老叶不进行生长,不仅如此,而且核酸的含量水平随着叶子的生长同时下落,当核酸的含量达到较低水平时叶子的生长也便停止。     

长春花激素完全适应型细胞的生长和阿玛碱合成特性

从长春花激素依赖型细胞系(C20D)筛选出一种激素完全适应型的细胞系(C20hi),考察了两种细胞生长、阿玛碱合成和与吲哚生物碱生物合成相关的酶的活性,结果表明:在生长培养基上二者生长无显著差异,而C20hi细胞平均阿玛碱含量是C20D的31.9倍,在生产培养基上C20hi细胞生长较C20D快,C20hi平均阿玛碱含量是C20D的18.4倍.通过比较生产和生长培养基中C20hi细胞的色氨酸脱羧酶、异胡豆苷合酶和牛儿醇-10-脱氢酶活性,发现在生产培养基中培养细胞的3种酶活性均显著高于生长培养基,但与阿玛碱积累没有密切关系.研究结果还表明,通过5年的继代培养,激素完全适应型细胞系C20hi的阿玛碱含量是比较稳定的.     

全国植物生理实验技术训练班在上海举行

中国植物生理学会委托上海植物生理学会于1981年12月10～30日在上海举办了全国植物生理实验技术训练班。参加这次训练班的学员来自全国21个省的33个单位,共34位同志。训练班先后学习了10种实验技术:(1)磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEP)的提取、分离、纯化及活性测定;(2)凝胶电泳;(3)原生质体培养;(4)植物激素(细胞分裂素)的生物测定;(5)氧电极法测定光合作用;(6)用萤光素酶方法测定三磷酸腺     

石竹细胞悬浮培养研究

石竹细胞继代周期为 7d时 ,悬浮细胞培养系生长最快 ,生长率最高 ,而且培养物中胚性细胞较多 ,并能保持较快的分裂和生长 ,能促进已形成的大细胞团的生长和分化。转代时接种物与新鲜培养基的体积比以1∶2较好 ,悬浮系细胞生长最快 ,生长率最高 ,以 1∶2和 1∶3的高倍稀释接种有利于胚性细胞的形成及产生小的胚性细胞团 ,对悬浮系添加椰乳和水解乳蛋白的混合物 ,可较大幅度地提高悬浮细胞系的生长速率 ,单独添加上述两种物质的效果均不如二者的综合效应好。在 6种不同激素组合中 ,配方 2 (2 ,4 D 1 .5mg/L +NAA0 .5mg/L +6 BA 0 .5mg/L)最好 ,生长率最高。配方 5 (2 ,4 D 1 .5mg/L +NAA 0 .5mg/L +6 BA 1 .0mg/L)其次 ;配方 1 (2 ,4 D 1 .0mg/L +NAA 0 .5mg/L +6 BA 0 .5mg/L)次之。     

两种微藻在光生物反应器中的生长和胞内多糖含量研究

利用气升式光生物反应器就光照周期、光质和通气速度对湛江叉鞭金藻和盐藻的生长和胞内多糖含量进行了研究。结果表明：(1)湛江叉鞭金藻和盐藻在亮暗比分别为12L：12D和18L：6D时生长最快,在18L：6D下两种微藻多糖含量较高;(2)不同光质比较,叉鞭金藻在蓝光、红光下,盐藻在红光、白光下有较高的生长速率和多糖含量;(3)600ml／min的通气速度可以获得较好的培养效果。     

生物选择题类型介绍

目前,在各级生物考试中最常见的选择题类型有以下十种。1.最佳选择题,又称为单项选择题。这种题型备有四五个供选答案,其中只有一个是最符合题意的答案。例1.植物的向地性说明了生物体的:(A)适应性;(B)抗旱性;(C)应激性;(D)遗传性……( )。例2.脾脏属于:(A)消化器官;(B)淋巴器官;(C)内分泌器官;(D)排泄器官……( )。 [答案:例1(C)、例2(B)]2.配伍选择题,也称为分析比较选择题。这种题型是几个问题共用一组答案,答案可选用一次,也可重复选用多次,或一次不用,要求应试者通过分析比较后,每个问题只允许选择一个答案。例,将下列细胞器填入相应功能的括号内。(A)线粒体;(B)白色体;(C)有色     

b型流感嗜血杆菌培养及细菌溶解产物制备工艺研究

目的研究b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenza type b,Hib)培养条件及细菌溶解产物制备工艺。方法比较Hib在传统培养基和改良培养基的生长情况,优化改良培养基在生物反应器中对Hib培养条件(p H值、温度、溶解氧等),研究最佳菌体细胞破碎方法及细菌溶解产物纯化制备工艺。结果改良培养基可代替传统培养基用于Hib的生产培养,且Hib在p H7.4、温度为36℃、溶解氧为25%的改良培养基中,生长迅速,菌体产量最高。高压匀浆破碎法的破碎效果明显优于超声波破碎法,破碎效果达到98%以上,纯化后的细菌溶解产物的多糖含量、总氮含量、蛋白质含量、核酸含量及细菌内毒素含量均符合《中华人民共和国药典》(三部)2010版中b型流感嗜血杆菌结合疫苗的质量标准。结论初步建立了b型流感嗜血杆菌培养及细菌溶解产物制备工艺。     

红豆杉悬浮细胞放大培养的细胞生长与紫杉醇合成动力学

研究了在Murashige&skoog s(MS)和 6 2号两种不同的培养基中 ,红豆杉细胞悬浮细胞从摇瓶到 1 0L机械通气搅拌式反应器放大培养过程中细胞生长与紫杉醇合成动力学 .结果表明 :尽管在不同的培养条件下 ,细胞生长曲线均呈现“S”型 .紫杉醇在延迟期与指数生长期中基本上没有积累 ,而且随着培养规模的增大 ,紫杉醇的含量逐渐降低 .进一步对各级放大培养的细胞生长 ,比生长率与胞内外紫杉醇合成量进行分析 ,发现MS利于细胞生长但不利于紫杉醇合成 ,而 6 2号则相反 .根据此文的结果 ,提出了红豆杉细胞培养条件的优化和大规模细胞培养生产紫杉醇应采取的策略     

植物超微结构中核酸的细胞化学方法比较研究

随着电子显微镜技术的广泛应用,植物超微结构的研究日益与生理功能密切地结合起来。为了在超微结构水平上对某种特殊的化学成分(如核酸、蛋白质、酶或多糖等)鉴定或定位,发展了诸如酶的细胞化学、核酸的细胞化学等各种细胞化学方法。电镜的细胞化学尚处于初期阶段,对植物组织尤其如此,已用于动物组织方面的许多化学反应不能用于植物材料。核酸的细胞化学方法已有许多报导,但都是以动物组织为材料发