老年大鼠血管α1肾上腺素受体及其亚型的改变

本工作用离体与整体实验方法,研究了老年(18月龄)与年轻(3月龄)大鼠血管中 α_1肾上腺素受体储备和 α_1(?)与 α_(1b)亚型比值的差别。在离体实验中用机械方法分离血管,用 Krebs 溶液灌流,在灌流液中加入 α_2和 β肾上腺素受体拮抗剂,然后用去甲肾上腺素(NE)激动 α_1受体。结果显示;老年大鼠主动脉、肾动脉和肠系膜动脉由去甲肾上腺素(NE)引起的最大收缩反应与年轻大鼠无显著差别,但浓度-效应曲线显著右移,功能性解离常数 K_A 值不变,而 K_A 与EC_(50)的比值减小。此外,在老年大鼠主动脉和肠系膜动脉血管,选择性 α_(1b)亚型拮抗剂 CEC对 NE 引起的缩血管效应的阻断作用显著减弱,硝苯吡啶(选择性阻断 α_(1a) 亚型的效应)对 NE 缩血管效应的阻断作用显著增强。整体实验显示老年大鼠硝苯吡啶的降血压作用比年轻大鼠增强,在用硝苯吡啶的基础上给予苯肾上腺素升血压作用减弱。上述结果提示:与年轻大鼠相比较,老年大鼠 α_(1-) 肾上腺素受体储备减少,α_(1a) 亚型相对 α_(1b)亚型的比率增高。     

自发性高血压大鼠血管α1肾上腺素受体亚型的改变

本工作在离体与整体条件下比较易卒中型自发性高血压(SHRSP)大鼠与WKY大鼠血管中α_1受体的两种亚型。在离体灌流的主动脉、肾动脉与肠系膜动脉,50μmol/L氯甲基可乐定(CEC)预温育30min可使α_1受体激动时引起的最大收缩张力在SHRSP与WKY大鼠分别降为对照时的31.4±8.3％与35.2±2.9％,68.4±8.2％与80.1±7.3％,68.4±6.3％与55.4±7.0％,两者间均无显著性差别。但10μmol/L硝苯吡啶对α_1受体收缩效应的阻断作用则在SHRSP大鼠大大超过WKY大鼠,最大收缩张力分别降为对照时的3.1±1.5％与56.5±4.8％(P<0.01),9.0±4.1％与23.6±3.5％(P<0.05),5.9±2.5％与28.0±0.8％(P<0.01)。整体动物实验也显示硝苯吡啶的降血压作用及对苯肾上腺素升血压效应的阻断作用在SHRSP大鼠都较WKY大鼠显著增强。离体主动脉a_1受体激动时的快速相与持续相收缩均主要由α_(1B)亚型激动引起,硝苯吡啶对快速相收缩的阻断作用在SHRSP与WKY大鼠无显著性差别,但对持续相收缩的阻断作用则在SHRSP大鼠显著强于WKY大鼠。上述结果提示SHRSP大鼠血管α_1受体两种亚型的分布没有显著改变,但α_(1B)受体激动时继发性细胞外Ca~(2+)进入的途径由非双氢吡啶敏感性钙通道转变为双氢吡啶敏感性钙通道。     

去甲肾上腺素引起的α1肾上腺素受体三种亚型脱敏过程的差异

将含有α１肾上腺素受体三种亚型的全长ｃＤＮＡ质粒分别转染到人胚肾脏细胞（ＨＥＫ２９３）,α１Ａ－,α１Ｂ－和α１Ｄ－ＡＲ在ＨＥＫ２９３细胞株上得到高水平稳定表达,用＾３Ｈ－ｉｎｏｓｉｔｏｌ标记和柱层析法测定细胞磷酸肌醇积。观察在去甲肾上腺素长期作用下α１三种受体亚型介导磷酸肌醇蓄积敏感性降低的差别。     

α1肾上腺素受体亚型在家兔胸主动脉平滑肌细胞生长中的作用

本实验在体外培养的家兔胸主动脉平滑肌细胞上,利用＾３Ｈ－Ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入的方法,观察了α１－肾上腺素受体（ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃ ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＡＲ）及其亚型对平滑肌细胞ＤＮＡ合成的影响。结果显示：去甲肾上腺素激动α１－ＡＲ能促进平滑肌细胞ＤＮＡ合成,并有以下特点：（１）α１Ａ激动促进平滑肌细胞ＤＮＡ合成,但α１Ｂ激动抑制这一合成作用;（２）α１Ａ促进ＤＮＡ合成的作用与ｃ     

氧自由基对大鼠心肌α1肾上腺素受体及其亚型的影响

采用放射配体结合方法观察外源性氧自由基对大鼠心肌α_１肾上腺素受体（α_１受体）及其亚型α_（１Ａ）与α_（１Ｂ）的影响和对β肾上腺素受体（β受体）的影响。发现：（１）·ＯＨ,使α_１受体与~（１２５）ＩＢＥ２２５４最大结合量（Ｂ_（ｍａｘ））分别下降５５％与３６％。（２）·ＯＨ可使α_１受体与~（１２５）ＩＢＥ２２５４结合的Ｋ_ｄ值增高１７１％,而对Ｋ_ｄ值无影响。（３）·ＯＨ,均使α_１受体亚型α_（１Ａ）与α_（１Ｂ）之间的比例增加。（４）·ＯＨ,对β受体与~（１２５）ＩＰＩＮ最大结合量Ｂ_（ｍａｘ）和Ｋ_ｄ值均无影响。（５）氧自由基清除剂甘露醇或超氧化物歧化酶均可对抗氧自由基引起α_１受体及其亚型的改变。上述结果提示,氧自由基可直接作用于心肌膜,引起α_１受体数量和亲和性下降,α_１受体亚型α_（１Ａ）与α_（１Ｂ）之间的比例改变。     

心功能不全大鼠心脏α_1－肾上腺素受体亚型的变化

本文通过主动脉和左肾动脉缩窄复制心功能不全大鼠模型，并采用放射配基结合实验和半定量逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），从蛋白质和基因转录水平上观察在心功能不全时大鼠心脏α１－肾上腺素受体三种亚型的改变。Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析结果显示，在心功能不全组与对照组，大鼠心脏组织１２５Ｉ－ＢＥ与α１－肾上腺素受体结合的亲和性（２２９±３２与１９５±１５ｐｍｏｌ／Ｌ）和数量（１０２±１２与９６±１７ｆｍｏｌ／ｍｇ）均无显著差异。但ＷＢ４１０１对１２５Ｉ－ＢＥ的竞争性抑制实验显示在心功能不全组高亲和性位点所占百分比较对照组显著增高（５１±７％与２２±５％）。ＲＴ－ＰＣＲ的结果显示，在心功能不全大鼠心脏α１Ａ－ＡＲ的ｍＲＮＡ水平高于对照组，但α１Ｂ－ＡＲ的ｍＲＮＡ水平低于对照组，而α１Ｄ－ＡＲ的ｍＲＮＡ水平在两组之间没有显著差异。综合上述结果可知，在心功能不全大鼠，心脏α１Ａ－ＡＲ增加，α１Ｂ－ＡＲ下降，而α１Ｄ－ＡＲ则没有显著改变。     

糖尿病合并高血压大鼠心脏α1肾上腺素受体的变化

目的:探讨糖尿病合并高血压大鼠心脏α1肾上腺素受体(α1-AR)及其三种亚型的变化规律和可能的意义。方法:用Wistar雄性大鼠建立糖尿病合并高血压模型,放射配体结合实验和离体左心房收缩功能实验等方法观察心脏α1肾上腺素受体(α1-AR)及其三种亚型的改变。结果:与正常对照大鼠相比,糖尿病合并高血压大鼠心脏α1-AR最大结合容量(Bmax)显著增加(P<0.05),且α1A-AR和α1D-AR均增加。糖尿病合并高血压大鼠左心房α1-AR介导的最大收缩反应较对照组降低41%(P<0.05),pD2值不变。α1-AR亚型选择性拮抗剂5-MU、spiperon和BMY7378拮抗NE正性变力效应的pA2值不变。结论:糖尿病合并高血压大鼠心脏α1-AR介导的最大收缩反应的降低,其主要与受体后信号转导效应减弱有关,其中以α1A-AR和α1D-AR尤为显著。     

α2肾上腺素受体的结构及其生物学功能

α2肾上腺素受体为七次跨膜的G蛋白偶联受体。该文介绍了有关α2肾上腺素受体的分型、结构和生物学功能的研究进展。     

12月与10周龄大鼠主动脉功能性α1肾上腺素受体亚型比较

本文采用离体血管收缩功能实验方法,比较１２月与１０周龄大鼠主动脉α１肾上腺素受体及其亚型的分布。结果显示;１２月龄大鼠与１０周龄大鼠相比,去甲肾上腺素引起的最大收缩反应显著降低,而半效激动浓度值无显著性改变;氯乙基可乐定对ＮＥ引起血管收缩的抑制作用明显减弱;ＷＢ４１０１拮抗ＮＥ缩血管效应的ＰＡ２值没有改变;ＢＭＹ７３７８的半效抑制浓度值明显降低;Ｓｅｒｔｉｎｄｏｌｅ的ｐＡ２值显著增大。     

缺氧大鼠心肌α1,β肾上腺素能受体的变化

为了探讨α_1、β肾上腺素能受体在大鼠缺氧性心脏肥大进程中的作用,本研究应用放射配基结合法观察了不同缺氧时间大鼠心室α_1、β肾上腺素能受体变化的动态过程,同时也观察了α_1、β受体阻断剂在预防缺氧性心肌肥大发生中的作用。缺氧10d后,测定右心室重量及组织学检查未见右心室肥大,但此时心室肌α_1受体数量从对照组的27.49±1.25增加到33.80±0.90fmol/mg蛋白(P<0.05);β受体从对照组的51.80±7.60下降到25.10±2.30fmol/mg蛋白(P<0.01)。缺氧20和30d后α_1受体进一步增加到40.70±1.43和32.30±1.96fmol/mg蛋白(P<0.05);β受体分别为27.90±2.30和42.80±1.70fmol/mg蛋白(P<0.05)。缺氧20和30d后右心室重量指数明显高于对照组,在整个缺氧过程中α_1、β受体的亲和性(K_d)未见明显变化,未见左心室肥大。缺氧同时应用α_1受体阻断剂(哌唑嗪4mg·kg~(-1)·d~(-1))30d,可明显预防缺氧所致的右心肥大;而β受体阻断剂(心得安10mg·kg~(-1)·d~(-1))没有此种作用。由此可见,在缺氧所致右心肥大之前,心肌α_1受体数量即明显升高,α_1受体阻断剂可以预防缺氧引起的右心肥大。     

神经肽Y可减轻大鼠血管α1肾上腺素受体亚型的脱敏作用

以离体大鼠主动脉与肾动脉对去甲肾上腺素（ＮＥ）的收缩反应分别代表α１Ｂ与α１Ａ亚型肾上腺素受体（ＡＲ）激动时的生物学效应。血管经ＮＥ１０μｍｏｌ／Ｌ温育２ｈ后,α１－ＡＲ介导收缩效应的敏感性显著降低,其中α１Ｂ亚型ＡＲ的脱敏程度显著大于α１Ａ亚型ＡＲ。上述经ＮＥ温育的血管,在神经肽Ｙ（ＮＰＹ）０．５μｍｏｌ／Ｌ存在时,α１Ｂ亚型ＡＲ的脱敏程度显著减轻。ＮＥ收缩主动脉的两时相分析表明,脱敏时主要表现为相性收缩时间延长,收缩幅度降低,而紧张性收缩并无显著改变;在ＮＰＹ存在时上述相性收缩改变消失。提示α１Ｂ亚型ＡＲ脱敏的机制主要与细胞内Ｃａ２＋动员减慢减少有关。     

肾上腺素受体的生物进化

肾上腺素受体在生物进化的过程中最先出现的是β－肾上腺素受体,此后才出现了α－肾上腺素受体。肾上腺素受体亚型的多样化分化是伴随大脑神经系统的发育而进行的,提示肾上腺素受体的各亚型的进一步分化很有胆对高级神经系统的精细调节功能不断趋于完善的一种适应,同时也预示可能还有其它肾上腺素受体亚型存在。     

自发性高血压大鼠血管对α_1肾上腺素受体自身抗体的血管收缩作用敏感性增强

自身免疫学机制在高血压的发生发展中具有不可忽视的作用.本研究组的前期研究表明,高血压患者血清中存在高水平的α1肾上腺素受体自身抗体(α1-AA),并对正常大鼠具有α1-AR激动剂样缩血管效应.本研究利用血管环张力测定技术观察并比较该抗体对自发性高血压大鼠(SHR)和Wistar-Kyoto(WKY)大鼠胸主动脉的收缩作用,分别采用酶联免疫吸附测定、免疫组化和免疫印迹技术观察主动脉中硝基酪氨酸和诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的表达情况.结果表明,自发性高血压大鼠胸主动脉对去氧肾上腺素(α1-AR特异性激动剂)与α1-AA(1 nmol/L~10μmol/L)的缩血管作用明显增强(P0.05);去除内皮或利用非特异性一氧化氮合酶阻断剂(L-NAME)后,α1-AA的缩血管作用明显增强(P0.05).iNOS特异性阻断剂1400W(10μmol/L)可以削弱上述WKY大鼠胸主动脉收缩的增强作用,而在SHR未观察到.SHR胸主动脉组织中硝基酪氨酸和iNOS的蛋白表达水平明显高于WKY大鼠.本研究结果表明,SHR对α1-AA的缩血管反应明显增强,这一变化与血管内皮功能障碍以及NO生物利用率降低有关,提示α1-AR自身免疫在高血压的发病机制和控制中,尤其是对α1-AA阳性的高血压患者发挥重要作用.     

α1-肾上腺素受体亚型介导细胞内游离Ca2+增高的信号转导途径

本文探讨了α１ａ,α１ｂ,α１ｄ三种亚型肾上腺素受体激动时细胞内Ｃａ６２＋浓度升高的信号转导途径。在稳定表达三亚型α１－ＡＲ的ＨＥＫ２９３细胞２系中,用ｆｕｒａ－２方法细胞内Ｃａ＾２＋信号强弱的变化。结果显示,百日咳毒素对去甲肾上腺素激动三亚型α１－ＡＲ而引起的「Ｃａ＾２＋」ｉ升高无影响,Ｕ－７３１２２和ＰＭＡ明显抑制「Ｃａ＾２＋」ｉ升高．     

α1—肾上腺素受体的信号转导

α１－肾上腺受体可激活细胞内多种信号转导途径,除经典的磷酸肌醇－钙信号系统与二酰基甘油－蛋白激酶Ｃ信号系统外,还包括磷脂酶Ａ２－花生四烯酸信号系统,酪氨酸激酶磷酸化系统与腺苷酸环化酶－ｃＡＭＰ信号系统等。α１－ＡＲ所介导的诸多瀑布式的链级信号系统,呈网络状连接在一起,一种信号系统的激活可引发、加强或阻抑另一信号系统。这些信号系统参与α１－ＡＲ介导的一系列生理和病理生理过程。不同的α１－ＡＲ亚型所介     

α_1肾上腺素能受体介导去甲肾上腺素促大鼠培养心肌细胞蛋白质合成效应

在无血清和含１．０％、５．０％血清培养的新生大鼠心肌细胞标本上,去甲肾上腺素（ＮＥ,２．０μｍｏｌ／Ｌ）使细胞蛋白质含量（Ｌｏｗｒｙ法）分别比相应对照组增加４０％、２６％、１９％（Ｐ均＜０．０１）;细胞３Ｈ－亮氨酸参入量与ＮＥ浓度呈正性剂量依赖性,最大效应浓度为２０．０μｍｏｌ／Ｌ;无血清培养体系中,０．２、２．０、２０μｍｏｌ／Ｌ的ＮＥ使参入量分别比对照增加１７．８％、３５３％、３７．７％;１．０％血清培养体系中分别比对照增加１６．２％、２７．９％、３１．６％（Ｐ均＜０．０５）;哌唑嗪（２．０μｍｏｌ／Ｌ）可阻断ＮＥ的促蛋白质合成作用,心得安（２．０μｍｏｌ／Ｌ）则无此效应。提示在无血清或低浓度血清培养体系中,ＮＥ可促进心肌细胞蛋白质合成,增加细胞蛋白质含量,该作用可能是通过α１肾上腺素能受体介导。     

去甲肾上腺素对蟾蜍背根神经节细胞α-肾上腺素能受体的作用

在蟾蜍离体灌流背根神经节(DRG)标本上,用微电极进行细胞内记录。在51个细胞中A型神经元为46个,C型5个。此两类细胞的静息膜电位为60.06±1.34mV(x±SE)。当灌流液中滴加10~(-4)-10~(-3)mol/L去甲肾上腺素(NA)引起如下的膜电位改变:(1)超极化:幅值8.38±1.12mV(x±SE)(20/48);(2)去极化:幅值9.39±1.24mV(x±SE)(23/48);(3)无反应(5/48)。上述膜电位改变既不能由灌流液中滴加异丙基肾上腺素所拟似,也不能为心得安所阻断,因而排除了β-肾上腺能受体介导的可能性。加苯肾上腺素及可乐宁于灌流液,分别产生膜的去极化和超极化,而应用哌唑唪及育亨宾灌流,则分别阻断NA引起的膜去极化和超极化。因此认为:NA引起的DRG神经元的去极化和超极化反应分别是由胞体膜上之α_1-及α_2-肾上腺素能受体所介导的。