2009-2011年通州区食源性金黄色葡萄球菌的生物学及流行病学特征

目的 对北京市通州区2009-2011年食品中分离到的32株金黄色葡萄球菌(Staphlococcus aureus)进行研究,建立相关资料的数据库.方法 对32株食源性金葡菌进行耐热核酸酶检测、肠毒素检测、药敏检测和PFGE分型,并进行同源性比较.结果 32株食源性金葡菌中26株耐热核酸酶试验为阳性,有29株菌可以产生不同型别的肠毒素,以SEE型为主,占产肠毒素金葡菌的83％;有27株菌对检测的抗生素有耐药性,占金葡菌总数的84％;PFGE图谱分为17个带型.结论 在通州区食品中检出的金葡菌既具有致病性也具有耐药性.在不同的年份,既存在着拥有同源关系金葡菌的重复流行,也会有新的金葡菌株出现.本研究建立了通州区食源性金葡菌的生化性状和分子图谱数据,为今后预防和控制由金葡菌引起的是食源性疾患的发生奠定了基础.     

葡萄球菌肠毒素B诱导脐静脉内皮细胞凋亡机制的探讨

目的探讨金黄色葡萄球菌(金葡菌)肠毒素B诱导脐静脉内皮细胞凋亡的机制。方法将不同浓度金葡菌肠毒素B感染脐静脉内皮细胞8 h后,用流式细胞术检测细胞凋亡率,同时用比色法检测TNF-α、caspase-3及caspase-8的产生量,并检测加入TNF-α抗体、caspase-3和caspase-8抑制剂后的细胞凋亡率。结果不同浓度肠毒素B作用脐静脉内皮细胞8 h后均可诱导细胞凋亡,且TNF-α、caspase-3和caspase-8的产生量均高于对照组(P0.01);而加入TNF-α抗体、caspase-3和caspase-8抑制剂后凋亡率明显降低。结论金葡菌肠毒素B可以诱导脐静脉内皮细胞凋亡,其凋亡机制可能是通过TNF-α介导的caspase-8及caspase-3激活的外源性死亡因子受体途径。     

安徽不同地区奶站牛奶中金黄色葡萄球菌及其肠毒素污染状况评估

目的评定安徽地区各奶站牛奶中金黄色葡萄球菌以及肠毒素的污染情况。方法通过从安徽省不同地区30所奶站采集乳样,进行乳源性金黄色葡萄球菌的分离与生化鉴定,并采用PCR技术对分离出的菌株进行金黄色葡萄球菌肠毒素血清型鉴定。结果安徽省30个奶站中有4个地区奶站的牛奶中污染金黄色葡萄球菌;从污染牛奶中共分离出5株金黄色葡萄球菌,检出率为16.7%。经鉴定,所分离出的金黄色葡萄球菌中2株为肠毒素A型,1株为肠毒素C型,2株为同时产肠毒素A和肠毒素C。结论安徽省不同地区奶站中的牛奶污染的金黄色葡萄球菌产肠毒素类型以肠毒素A为主。     

葡萄球菌肠毒素A单克隆抗体的制造

<正>葡萄球菌属食物中毒是一种主要的公害,美国细菌引起的食物中毒占第二位。人们用特异抗体、通常是兔抗血清进行血清学反应来检测葡萄球菌肠毒素A、B、C、D、E(以下简称SEA、B、C、D、E)。检测这些葡萄球菌肠毒素最普通的方法包括使用微量凝胶扩散系统。自从这一检测系统建立以来,人们成功地使之用于食物中毒病例。     

肠道细菌耐热性毒素的分子序列

<正> 产肠毒素型大肠杆菌(ETEC)产生的两种类型耐热性肠毒素(STⅠ STⅡ)之化学与生物学特性均不相同。前者是低分子量的多肽,可刺激细胞内鸟苷酸环化酶而导致急性腹泻。对乳鼠有作用。后者的分子量约5000。它对离乳的小猪有作用,对乳 鼠无作用。我们与其它学者已分别阐明人株和人-牛、猪株STI产生两种(STh;STIb)及STP(STIa)的初级结构。我们也确定了小肠结肠耶氏菌、非OI群霍乱弧菌及摸似弧菌的ST之初级结构,见图1。     

蜡样芽孢杆菌主要毒素及检测方法的研究进展

蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)是一种普遍存在的食源性病原菌,可造成腹泻和呕吐两种类型的食物中毒和其他类型的疾病根据蜡样芽孢杆菌引起食物中毒的症状,其毒素可分为致腹泻型肠毒素和致呕吐型肠毒素,其中溶血性肠毒素BL、非溶血性肠毒素和细胞毒素K是引起腹泻型食物中毒的3种主要毒素,cereulide为致呕吐型肠...     

快速检测金黄色葡萄球菌肠毒素A基因方法的建立与应用

目的建立一种快速准确定量检测金黄色葡萄球菌肠毒素A的方法。方法以femB、SEA基因分别作为金黄色葡萄球菌菌株、肠毒素A的靶序列,设计合成引物和TaqM an探针;收集腹泻患者大便标本分离的金黄色葡萄球菌68株,并定量检测其肠毒素A。结果TaqM an探针荧光聚合酶链反应检测金黄色葡萄球和肠毒素A的灵敏度均为1.0×102拷贝。68株金黄色葡萄球菌中检出产肠毒素A菌株11例(16.2%,11/68),CT值为13.5~20.6。结论TaqM an探针荧光聚合酶链反应能够准确快速检测金黄色葡萄球菌肠毒素A。     

肠毒素C2中Met24对其超抗原活性无重要作用

目的:分析金黄色葡萄球菌肠毒素C2的T细胞受体结合区域α3结构中,第24位甲硫氨酸对其超抗原活性的影响作用.方法:应用定点突变技术对金黄色葡萄球菌肠毒素C2的Met24进行无意义突变,获得突变蛋白SEC2(M24A),对突变蛋白和野生型蛋白的体内、体外超抗原活性进行比较.结果:分别对野生型蛋白及突变蛋白的免疫刺激活性、肿瘤抑制活性、体内致热毒性进行了比较,发现突变蛋白的增值指数(PI)、抑瘤率、热源效应与野生型相比无显著差异(P＞0.05),这表明对第24位甲硫氨酸的替换没有对金黄色葡萄球菌肠毒素C2的超抗原活性造成明显影响.结论:在金黄色葡萄球菌肠毒素C2的α3结构中,Met24并不是决定其超抗原活性的重要氨基酸残基.     

大肠杆菌和霍乱弧菌肠毒素的进化起源

<正> 产毒性大肠杆菌(ETEC)产生两种不同型肠毒素:不耐热毒素(LT)和耐热毒素(ST)。LT具有与霍乱弧菌肠毒素(霍乱毒素,CT)共同的结构和功能的特征,因抗原决定簇不同又可分为两型(i)LTp,由使小猪致病的ETEC所产生。(ii)LTh,由使人致病的ETEC产生。STI也有两个     

金黄色葡萄球菌C_1、C_2型肠毒素的提纯及某些理化性质的鉴定

金黄色葡萄球菌能产生多种胞外毒性物质,易引起人和少数动物的胃肠炎。故称做肠毒素。按照它们同特异性抗体的反应分为六个血清型:A、B、C、D、E和F.由于等电点的不同,C型又分为C_1及C_2型。C_1型由Borja(1965)首次提纯。C_2型由Avena等提纯。提纯方法是离子交换层析和凝胶过滤。近来还报道了用     

奶牛源MRSA肠毒素基因、耐药基因及分子分型分析

为了解宁夏地区奶牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的肠毒素基因和耐药基因分布及其分子流行病学特征,本研究通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)技术对前期分离于宁夏地区的9株奶牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)进行了18种肠毒素基因和16种耐药基因的检测,同时采用脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis, PFGE)、正向重复序列(direct-repeat unit, dru)和辅助基因调节因子(accessory gene regulator, agr)分子分型技术对MRSA菌株进行分型研究。结果显示所有MRSA菌株均携带经典型肠毒素基因和新型肠毒素基因,共检出12种肠毒素基因,其中selk基因的检出率最高,达到了100%,未检出see、selj、selo、selp、ser和selu基因;11种耐药基因被检出,其中norA、gyrA、grlA和blaZ 4种基因的检出率均达到了100%,未检出tet (O)、optrA、Lin (A)、fexA和cfr基因。PFGE分型结果显示受试菌株间亲缘关系较近;dru分型检出dt11v和dt10a两种型,其中以dt11v(77.8%, 7/9)为主;agr分型主要为agr-Ⅰ型(88.9%, 8/9),agr-Ⅱ型仅有1株。研究表明宁夏地区奶牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中的肠毒素基因和耐药基因分布广泛,菌株间亲缘关系较近,agr-Ⅰ-dt11v为MRSA菌株中的流行基因型。这为以后宁夏地区奶牛源MRSA的产毒性、耐药性和分子流行病学特征的进一步研究提供理论依据。     

噬菌体对产肠毒素大肠杆菌菌型的鉴别

从上海近郊采集的82份污水中,分离到产肠毒素(LT、ST、LT+ST)大肠杆菌噬菌体46株,根据噬菌体的特性,选择19株,试用为产肠毒素大肠杆菌菌型的鉴别,对世界卫生组织、卫生部药品生物制品检定所提供的产肠毒素大肠杆菌75株和福建省卫生防疫站提供的产肠毒素大肠杆菌51株进行了型别的分析,总分型率达98.41％。并研究排除分型试验中可能出现的假阳性结果。     

金铁锁皂甙的研究

从金铁锁(Psammoslene tunicoides)根中分离到二个新的齐墩果烷型五环三萜皂甙Ⅰ、Ⅱ,经光谱测定和化学降解证明它们的化学结构为齐墩果烷-3α,16α-二羟基-12烯-23-酸-28-O-β-D-葡萄吡喃糖基(1—3)-β-D-葡萄吡喃糖基(1—6)-β-D-葡萄吡喃糖甙(Ⅰ)和齐墩果烷-3α,16α-二羟基-12烯-23-酸-28-O-β-D-葡萄吡喃糖基1—6[-β-D-葡萄吡喃糖基1—3]-β-D-葡萄吡喃糖甙(Ⅱ)。上述两个化合物的母核配基均为同一的物质,差异是糖的连接位置不相同。     

产毒金黄色葡萄球菌鉴定及在百叶中生长与产毒特性分析

从生鲜食品中分离鉴定得到产肠毒素SEA的金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus）菌株,研究金黄色葡萄球菌在百叶中的生长变化及产肠毒素特性。将不同浓度的金黄色葡萄球菌同时接种到减菌（样品组）和未减菌（对照组）百叶中,高、低初始接种量分别控制在4.0 lg(cfu/g)和2.0 lg(cfu/g)左右,并定时追踪不同储存温度条件下百叶中金黄色葡萄球菌的活菌数及产毒情况。金黄色葡萄球菌肠毒素的检测采用商业化的ELISA试剂盒。在37 ℃储存过程中,金黄色葡萄球菌在样品组中不但能生长良好并在18 h后菌落数可达到7.0 lg(cfu/g)并被检测出肠毒素,对照组中金黄色葡萄球菌生长良好菌落数可达到7.0 lg(cfu/g)却未检测出产肠毒素。在25、15和5 ℃储存过程中,样品组和对照组百叶都未检测出肠毒素。温度对金黄色葡萄球菌在百叶中是否产肠毒素具有决定性的作用,且百叶中本身存在的杂菌可能可以抑制金黄色葡萄球菌产肠毒素。     

产肠毒素型大肠杆菌F41黏附素是染色体编码并与K88在遗传学上相关

<正> 产肠毒素型大肠杆菌(ETEC)寄居人类及动物宿主的小肠,产生肠毒素导致液体与电解质的分泌。是通过一种命名为黏附素(adhesin)的繖状结构的细菌蛋白介导寄居于小肠。人与动物ETBC黏附素有几种不同的抗原型。表达这些黏附素的菌体细胞有凝集各种动物红细胞的能力。并与黏附素抗原型有关。黏附素对确定菌株致病性起一定作用。黏附素表达的遗传学基础是与这些抗原型相关的质粒。 最近已确定F41是对牛及猪有致病性的ETEC黏附素。θ9及0101血清型ETEC菌株的另一种黏附素K99的产生与其有关,但最近提及的某些菌株不产K99也产F41。F41在甘露糖存在的条件下可介导凝集人红细     

建国以来我国自建的一些细胞株或系(六)

分泌霍乱弧菌肠毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞系本细胞株建于1984年,并于同年6月通过鉴定。用霍乱弧菌(569B)肠毒素免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与SP_2/0小鼠骨髓瘤细胞融合。用PHA和ELTSA检测抗体并进行克隆化培养,建立了17株分泌霍乱弧菌肠毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞系。在体内外培     

不同种源的葡萄种子休眠及其解除的研究

为探讨葡萄种子休眠与解除的规律, 我们选择起源于东亚、北美–中美、欧洲–中亚3个分布中心的不同种类及其杂种的20个品种, 研究了它们成熟种子的外部形态与萌发行为, 种子的休眠特性与休眠解除的方法, 并模拟四季温度的交替变化研究了环境温度对种子休眠的影响。结果表明, 不同起源的各类葡萄种子的休眠类型均为生理休眠, 但其休眠程度不同, 休眠解除方式也存在差异。其中欧亚种和东亚种的种子休眠较浅, 美洲种种子休眠较深; 杂交种比亲本所属类别的种子休眠程度浅。对于欧亚种、东亚种及其杂交种(欧山杂种)而言, 5ºC冷层积和变温层积(即20ºC (14 h) /10ºC (10 h)和30ºC (14 h) /20ºC (10 h))2个月能够有效地或部分解除它们的种子休眠; 但对美洲种和欧美杂种而言, 仅5ºC冷层积且层积时间需要延长至6个月才能解除其休眠, 变温层积和25ºC暖层积都不能解除休眠。四季温度的交替变化模拟实验进一步证明了不同起源的葡萄种子的休眠程度不同。这些休眠特性及其解除方式反映了不同起源葡萄种类的环境适应性。本文研究结果为葡萄资源的引种和育种提供了参考数据。     

抗性砧木对赤霞珠葡萄叶片白藜芦醇合成过程及含量的影响

为了明确不同抗性砧木对赤霞珠葡萄叶片白藜芦醇含量及其合成过程中前体物质和相关代谢酶活性的影响,分析不同抗性砧木与白藜芦醇合成的关系,以获得提高接穗品种赤霞珠葡萄叶片白藜芦醇含量的抗性砧木。该研究选择弗卡(Fercal)、5C、140R、3309M、3309C、SO4、抗砧3号(Kangzhen3)、5BB为砧木与赤霞珠(CS)葡萄进行嫁接,以赤霞珠自根苗为对照(CK),采用高效液相色谱技术,测定成熟葡萄叶片白藜芦醇以及合成白藜芦醇前体物质苯丙氨酸、肉桂酸、香豆酸含量,并对合成白藜芦醇相关代谢酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂酸-4-羟化酶(C4H)、4-香豆-辅酶A连接酶(4CL)、过氧化物酶(POD)以及多酚氧化酶(PPO)的活性进行测定。结果表明:(1)不同砧木均能提高接穗赤霞珠葡萄叶片白藜芦醇含量11%~46%。(2)在各砧穗组合中,CS/140R嫁接苗叶片的白藜芦醇含量最高达到18.24μg/g,其合成白藜芦醇前体物质苯丙氨酸和香豆酸含量也最高,分别达到38.61和1.06μg/g。(3)在各砧穗组合中,白藜芦醇相关代谢酶PAL活性以CS/3309C嫁接苗叶片最高;嫁接苗叶片代谢酶C4H和4CL活性均高于赤霞珠自根苗;POD和PPO活性均以CS/Fercal的接穗赤霞珠叶片最强。研究发现,不同抗性砧木能显著提高赤霞珠葡萄叶片白藜芦醇含量,相关代谢酶C4H活性对葡萄白藜芦醇的合成至关重要,PPO活性与葡萄叶片白藜芦醇合成也密切相关,CS/140R是8个砧穗组合中提高赤霞珠葡萄叶片白藜芦醇含量最具优势的砧穗组合。     

鄂尔多斯盆地三叠系原油葡萄藻母质输入的生物标志物特征

鄂尔多斯盆地西南部西峰油田三叠系延长组烃源岩和原油的有机地球化学研究显示,原油和烃源岩正构烷烃多表现出双峰型特征,且多以低碳数前峰群为主,主峰碳在nC15-nC20之间;规则甾烷相对丰度C28 C27＞C29,且R构型C27、C28和C29规则甾烷分布表现出各种不对称的"V"字型特征;指示了以藻类为主的混合型母质输入特征.所有原油中均检出丰富的两环萜烷(C12-C16)和短链至长链(C15-C34)的单甲基支链烷烃生物标志化合物,本地区主要烃源岩延长组长73-长72段也普遍检出与原油具有相同碳数分布和结构特征的两环烷烃和单甲基支链烷烃,在一定程度上指示了油源对应关系.前人研究表明,葡萄藻(Botryococcus braunii)可能是地质体中两环倍半萜和单甲基支链烷烃的重要母质来源.而西峰地区延长组的微体古生物学研究,恰好在长73-长72段发现丰富的葡萄藻化石.因此.延长组原油和烃源岩中两环倍半萜和单甲基支链烷烃的出现,不仅指示葡萄藻可能是该地区烃类形成的重要母质来源之一,而且指示葡萄藻有机质可能提供了这些标志物的先驱.主要烃源岩中富含葡萄藻化石及其降解形成的无定形有机质,进一步证明葡萄藻可能是鄂尔多斯盆地三叠系陆相石油藻类母质的重要组成.     

黄金色葡萄球菌抗体在诊断金黄色葡萄球菌L型败血症中的意义

目的：探讨测定金黄色葡萄球菌（简称金葡萄）抗体在金葡萄菌Ｌ型败血闰中的意义。方法：金葡萄Ｌ型败血症的细菌诊断组３８例,临床诊断组４６例及对照组４１例的血表做试管定量凝集反应测定其效价。并以金葡萄细菌型和Ｌ型分别感染动物,停止感染两个月后测定抗体滴度。结果：以１：８０以上作为阳性,阳性率细菌诊断组９４．７％、临床诊断组８６．９％、而对照组仅１４．６％。细菌诊断组及临床诊断组均明显高于对照组（Ｐ〈０．