赤霉素A_4、A_7的发酵研究

初选藤仓赤霉菌(Gibberella fujikuroi)农大17菌株为赤霉素A_4、A_7(GA_4、GA_7)的生产菌,该菌株GA_(4+7)的积累量,除与营养条件有关外,温度和pH是极为重要的因子,随着发酵温度从28℃上升至32℃,GA_(4+7)的产量由21μg/ml增至81μg/ml,GA_3由702μg/ml降至328μg/ml。pH回调至中性,GA_(4+7)的产量由75μg/ml增至180μg/ml,GA_3由322μg/ml降至211μg/ml。此外,设法延长发酵周期也是增加GA_(4+7)的一个因素。综合上述条件,即发酵过程中,发酵液的pH由48h前的4回调并维持在6.7左右,温度由28℃上调并控制在32℃,摇瓶培养12天,GA_(4+7)的产量达890μg/ml,20—600L发酵罐发酵240h,GA_(4+7)产量达680μg/ml左右。GA_(4+7)浓度的测定亦作了简化处理,发酵液不经提取,可直接用硅胶板G薄层层析(TLC)后进行荧光比色,产品测定宜采用高效液相色谱法(HPLC)。按照上述条件培养的农大17菌株,产生GA_3、GA_7和GA_4的比例为23.131:16.105:31.258,GA_4高于有关报道。     

赤霉素A9检定方法的建立和发酵的初步研究

通过对50株野生型藤仓赤霉菌的筛选,获得一株GA9组分较高而GA3、GA+7组分较低的菌株农大201(ND-201),然后通过多次紫外诱变,使其产量从原来的34μg／ml提高到260μg／ml。当发酵条件采用变温培养(培养72h后由28℃转到34℃、调节pH值(72h后pH由4．5调到6．2)．产量可达300μg／ml。在培养基接最佳组分配制后,GA9的产量可达350μg／ml。发酵产物经提取、层析并经气相色谱-质谱联机(GC-MS)鉴定确证为GA9。硅胶G薄层层析和荧光光度法可简便地对GA9进行定量测定。HPLC法可测得GA9组分的比例含量。     

赤霉素A4,A7的研究进展

赤霉素Ａ＿４、Ａ＿７的研究进展颜方贵,秦杰,何增国,李季伦（北京农业大学生物学院,北京１０００９４）赤霉素Ａ＿３（ＧＡ＿３）是目前应用最广的植物生长激素之一。随着研究的深入,对该族的其它同系物,特别是ＧＡ＿４、ＧＡ＿７越来越受到重视,这是由于ＧＡ＿４...     

赤霉酸产生菌UF456发酵条件的研究

筛选出赤霉酸产生菌UF456的发酵培养基配方,研究了各种碳源、氮源、碳氮比和不同微量元素对赤霉酸发酵的影响.结果表明:最佳碳源为玉米淀粉,含量为12.5%;最佳氮源为黄豆饼粉和花生饼粉,含量分别为0.3%和1.2%;微量元素Fe^(2+)、Cu^(2+)和Zn^(2+)对赤霉酸发酵具有促进作用,其中Fe^(2+)尤为重要,三种元素不同的组合对赤霉酸发酵的促进作用都具有累加效应.     

苯丙氨酸代谢途径关键酶:PAL、C4H、4CL研究新进展

主要阐述了苯丙氨酸代谢途径中三种关键酶:苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂酸4-羟基化酶(C4H)、4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL)的研究进展,希望能为研究植物次生代谢途径的研究工作者提供一些帮助。     

BRD7结构功能域Bromodomain的研究以及一个新的BRD7交互作用蛋白的鉴定

溴区包含蛋白7(BRD7)是采用cDNA代表性差异分析方法克隆的一个新基因.研究证实了BRD7能够与乙酰化的组蛋白3结合,其识别位点在组蛋白3的14位氨基酸;并且证实了溴区结构域(Bromodomain)缺失型的BRD7突变体失去了与乙酰化组蛋白3的结合能力.Bromodomain是在进化上高度保守的功能结构域,该结构域在空间构象上具有鲜明的特征:包括4个左手、呈反向平行排列的“螺旋(αz,αA,αB,αC)”以及2个“连结环”(ZAloop,BCloop).通过生物信息学等综合分析,预测BRD7可能具有上述特征.依据上述分析结果,构建了BRD7的Bromodomain相关缺失突变体,通过肽段结合实验分析上述突变体与乙酰化组蛋白3结合的能力.结果表明,ZAloop与BCloop的完整性对于BRD7结合乙酰化的组蛋白3有着重要的意义.同时通过免疫荧光分析,证实了ZAloop与BCloop的完整性能够影响BRD7的亚细胞定位.最后,证实了BRD7与CBP可能存在交互作用.CBP不仅具有乙酰化转移酶活性(HATs),能够对组蛋白末端进行乙酰化修饰,并且作为一种重要的细胞转录因子广泛参与细胞的各种生物学活动.     

雅致枝霉TE7—15发酵生产γ—亚麻酸的实验研究

研究了温度、时间、碳源和氮源对雅致枝霉诱变株ＴＥ７－１５的菌体生长、油脂积累ＧＬＡ合成的影响,确定了ＴＥ７－１５菌株适宜的摇瓶发酵培养条件,使其菌体生物量达到１９．０４ｇ／Ｌ,ＧＬＡ产量达到１０７９．９５ｍｇ／Ｌ,可以满足工业化生产的要求。     

子宫内膜异位症患者血清可溶性B7-H4的水平及意义

目的:探讨子宫内膜异位症患者血清可溶性B7-H4(sB7-H4)的水平及其临床意义。方法:用ELISA夹心法检测43例子宫内膜异位症患者术前血清sB7-H4的水平及40例子宫内膜异位症患者术后血清sB7-H4的水平,同时选取30例体检健康妇女血清sB7-H4水平作为对照。结果:子宫内膜异位症患者血清sB7-H4水平为(36.23±5.67)μg/L,体检健康者血清sB7-H4水平为(31.24±4.56)μg/L,两者比较差异有统计学意义(P0.01)。手术前,子宫内膜异位症患者血清sB7-H4水平为(36.23±5.67)μg/L,明显高于术后(32.54±4.27)μg/L(P0.05)。子宫内膜异位症患者血清sB7-H4水平与CA125水平呈显著正相关(r=0.531,P0.01)。结论:血清可溶性B7-H4可能与子宫内膜异位症的发病有关,检测血清中可溶性B7-H4水平对内异症的辅助诊断和疗效观察可能具有一定的临床意义。     

抗人细胞角蛋白7(CK7)单克隆抗体的制备及鉴定

用KLH偶联合成细胞角蛋白7(CK7)优势表位多肽片段（C14）免疫小鼠,经细胞融合技术制备CK7单克隆抗体（mAb）,并收集临床组织进行免疫组化鉴定。C14多肽作为抗原具有良好的免疫反应性。本研究共获得了3株能稳定分泌抗CK7抗体的单克隆细胞株,选择亲和力较好的7A8单克隆抗体进行免疫组化鉴定,结果表明,本研究筛选的7A8单克隆抗体的质量浓度为0.49μg/mL时,与收集的临床标本均有良好的特异性反应,低于医院常用CK7检测试剂盒中抗体质量浓度2～5μg/mL,表现出较高的灵敏度。本研究筛选的7A8单克隆抗体为研发CK7快速诊断试剂提供了关键的原材料。     

赤霉素产生菌——藤仓赤霉菌融合重组的研究

以一对营养互补的缺陷型突变株作为亲本,酶法去除细胞壁制成原生质体,以等量相混,用30%PEG 4000诱导融合,在最低营养再生培养基上直接选择原养型融合重组子,重组频率约为10~-,同时产生一定数量的不稳定异核体,频率约为10~(-5)—10~(-6).融合重组导致色素产生和菌丝形态及赤霉素产生能力的多种变异.融合重组子中赤霉素产量的正变率为15.3%.其中RN2和RG14菌株的赤霉素产量比原养型出发菌株207提高25%以上.     

EXTRACTIVE FERMENTATION OF GIBBERELLIC ACID WITH FREE AND IMMOBILIZED Gibberella fujikuroi

Gibberelic acid fermentation using extractive methods was carried out in the presence of corn oil and Alamine 336. Gibberella fujikuroi fungus (NRRL 2278) was used to produce gibberellic acid. Oleyl alcohol was a diluting agent for Alamine 336. The effects of oleyl alcohol (100%, v/v), corn oil (5–25%, v/v), the concentration of Alamine 336 in oleyl alcohol, and feeding air were examined in this study. According to the results, oleyl alcohol was not effective on the production. On the other hand, oleyl alcohol solutions containing 15–30% (v/v) Alamine 336 showed effects as a toxic substance. In order to reduce solvent toxicity, corn oil was used. Addition of corn oil increased the concentration of gibberellic acid 1.3-fold compared to the control. Then the effects of immobilization and co-immobilization on extractive gibberelic acid fermentation were investigated. The highest total gibberellic acid concentration of 158.9 mg/L was produced with immobilized cells and feeding air by using extractive fermentation. The yield of gibberellic acid increased about 2.6-fold compared with the shake-flask fermentation (60.5 mg/L) without organic solutions.     

影响稻恶苗菌分生孢子萌芽管融合的环境因子研究

本文报导温度、光照、几种营养物质和pH值对稻恶苗菌[Gibberella fujikuroi(sacc.)wr.]分生孢子萌芽管融合频率的影响。试验结果证明温度为28℃,光照为完全黑暗下,pH值为中性偏碱性的PD培养液中,稻恶苗菌分生孢子萌芽管融合频率最高。     

自养黄杆菌合成羟基丁酸和羟基戊酸共聚体的发酵研究

采用本实验室从土壤中分离到的一株自养黄杆菌进行了羟基丁酸和羟基戊酸共聚体〔P(HB-co-HV)〕的发酵试验。实验结果表明,该菌株是自养黄杆菌葡萄糖运输突变株,可以葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、乙酸盐、乳酸盐和苹果酸盐作为唯一碳源,尤以葡萄糖和果糖效果最佳。硫酸铵、氯化铵和蛋白胨等不同氮源不影响其生长,却影响细胞中P(HB-co-HV)的含量和P(HB-co-HV)中HV/HB的比例。应用两阶段控制方式,经42h的补料分批发酵,细胞浓度达34.9g·L~(-1),P(HB-co-HV)浓度达25.28g·L~(-1)。细胞和P(HB-co-HV)生产速率系数分别为0.83g·L~(-1)”·h~(-1)和0.61g·L~(-1)·h~(-1)。以基质为基准的细胞得率系数(Yx/s)、产物得率系数(Yp/s)和以干细胞为基准的产物得率系数(Yp/x)分别为0.283(g/g)、0.174(g/g)和0.73(g/g)。改变培养基中碳氮源组分可将P(HB-co-HV)中HB的含量调节在24％～78％之间。     

白茎绢蒿化学成分的研究

采用乙醇提取,硅胶柱层析分离和波谱方法鉴定结构,从白茎绢蒿(Seriphidium terrae-albae(Krasch)Poljak)中初步分离鉴定出9个化合物：α-山道年(a-santonin,1),蒲公英赛醇(taraxerol,2),蒲公英甾醇乙酸酯(taraxasteryl acetate,3),乌苏酸(ursolic acid,4),β-谷甾醇(β-sitosterol,5),胡萝卜甙(daueosterol,6),二十五烷酸-α-单甘油酯(pentacosanoic acid 2′,3′-dihydroxypropyl ester,7),硬脂酸(steraric acid,8)和二十四烷酸(tetracosanoic acid,9),这些化合物均为首次从该植物中分离得到。     

中药王不留行化学成分的研究

从河北产麦蓝菜(Vaccaria segetalis(Neck)Garcke.)的种子王不留行中分离得到5个化合物,经波谱分析和化学方法分别鉴定为:Tetracosanoic acid(1),E-3-phenyl-2-Propenoic acid(2),stigmast-7,22-dien-3-ol(3),stigmast-7,22-dien-3-ol 3β-O-[β-D-glucopy-ranoside](4),9,12-octadecadienoic acid N-(2-hydroxyethyl)(5)。以上各化合物都是首次从该植物中分得。化合物5为首次从天然界分得。     

瓣结鱼的年龄和生长的研究

瓣结鱼全年均可形成新轮,新轮出现高峰期为４月。其生长特点是属于均匀生长类型,体长与鳞长呈直线关系,体长和体重指数关系,回归求得Ｂｅｒｔａｌａｎｆｆ个体生长方程参数Ｌ∞,Ｗ∞,Ｋ,Ｔ０分别为７０,４３,５９６１．５０,０．２２３１,０．０２２４,体重生长拐点年龄为４．９５龄,该拐点体重为１７６８．２３ｇ,瓣结鱼第１,２龄生长较为迅速。     

草兔繁殖生物学的初步研究

本文分析了１９９１年１－１０月获自山西省东南部丘陵山区以及１９９０－１９９３年１０月至翌年１月获自该省各地草兔的有关繁殖特征。草兔的繁殖季节为１－９月,雄性进入性活动的时间早于雌性。生殖腺测度有明显的季节变化,其峰值在４月和５月。当年兔３－４月龄时性可成熟,但达到性成熟月龄的当年兔只有５１．７％在７、８月参加繁殖。怀孕个体见于２－９月,３月怀孕率最高,此后逐渐下降。胎仔数１－７只,５月最多,年均值３．６只,每只雌兔年产幼兔１２．９只。     

粉红粘帚霉菌丝体化学成分研究*

用柱层析色谱进行分离,光谱和化学方法进行结构鉴定,从一种明显促进花叶开唇兰Anoectochilus roxburghii (Wall.)Lindl.生长的粘帚霉属真菌——粉红粘帚霉Gliocladium roseum (Link) Bani.的菌丝体分离鉴定了1,3-二棕榈酰基-2-(4,4-二甲基庚二酸单酰基) 甘油酯(I),4,4-二甲基庚二酸(II)等4个化合物。其中,I为新化合物, II 为首次从本属分离得到的天然产物。