应用r－GT酶活性评价PA－MSHA菌苗抗瘤疗效研究

应用ｒ－ＧＴ酶活性评价ＰＡ－ＭＳＨＡ菌苗抗瘤疗效研究大连医科大学大连１１６０２３于丽华,于芒以往的研究表明,肿瘤组织中和血清中ｒ－ＧＴ酶活性与肿瘤发展进程有关,即ｒ－ＧＴ活性上升与肿瘤的进展和死亡有关。ｒ－ＧＴ活性下降表明治疗效果良好,据此,本研究以...     

PA－MSHA菌苗抗噪声作用的研究

ＰＡ－ＭＳＨＡ菌苗抗噪声作用的研究大连医科大学物理教研室谭耀东大连医科大学菌毛室于芒大连电车公司医务室曾淑萍以往的研究表明，麻纺噪声能影响小鼠形成干扰素的活力。本文着重探索了麻纺噪声对小鼠脾脏ＮＫ细胞的杀伤活性及脾细胞增殖反应的影响，并应用ＰＡ－ＭＳ...     

转WMV—2CP基因黄瓜植株的再生

以黄瓜无菌苗子叶切段为外植体,通过叶盘转移化法与根瘤农杆菌进行共培养建立了黄瓜的转其因系统。农杆菌菌株为ＬＢＡ４４０４,内含双元载体ｐＢＰＭＷＭＶ。该质粒载体带有一个ｎｐｔ－Ⅱ基因（筛选具有卡那霉素抗性的植株）和一个ＷＭＶ－２ＣＰ基因。抗卡那霉素（Ｋａｎ＾ｒ）的黄瓜植株经ＤＮＡ分子点杂交、ＰＣＲ检测以及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ证实,外源的ＷＭＶ－２ＣＰ基因确实已导人瓜细胞且能稳定地遗传到子一代。     

决明组织培养的研究

以草决明无菌苗子叶为外植体,接种于７类诱导愈伤组织的培养基上：Ａ．ＭＳ＋２．０２,４－Ｄｍｇ／Ｌ（以下单位省略）＋０．３ＢＡ＋０．２ＮＡＡ．Ｂ．ＭＳ＋０．２２,４－Ｄ十０．２ＢＡ＋２．０ＮＡＡ．Ｃ．ＭＳ＋１．０２,４－Ｄ＋０．５ＢＡ＋０．２ＫＴ．Ｄ．ＭＳ＋０．７ＢＡ＋１．５ＮＡＡ＋０．１ＫＴ．Ｅ．ＭＳ＋１．５２,４－Ｄ＋０．７ＢＡ十０．２ＭＡＡ．Ｆ．ＭＳ＋０．４２．４－Ｄ＋１．０ＮＡＡ＋０．１ＫＴ．Ｇ．ＭＳＢ（ＭＳ的无机成份和Ｂ５有机成分）＋０．１５ＮＡＡ＋ＢＡ,ＫＴ和ＺＴ各０．５。８～１５天后分别有９０～９９．６％的子叶片被诱导出愈伤组织,并且Ｆ．与Ｃ．类培养基对诱导愈伤组织比较理想,放于Ｇ培养基上的愈伤组织有９．２～３０．２％的芽分化率。芽在生根培养基１／２ＭＳ＋０．２ＩＢＡ中、９８％生根,形成完整的再生植株。     

Ang Ⅱ 对培养新生大鼠心肌成纤维细胞增殖及丝裂素活化蛋白激酶的影响

本研究目的在于探讨丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）是否在ＡｎｇⅡ（１０－８ｍｏｌ／Ｌ）诱导的培养新生大鼠心肌成纤维细胞（ＦＢ）的增殖反应中起重要作用。实验以ＦＢ数目和ＤＮＡ合成速率（３Ｈ－胸腺嘧啶掺入率）为增殖指标,［γ－３２Ｐ］ＡＴＰ掺入法和免疫印迹法分别测定ＦＢＭＡＰＫ的活性和含量,结果发现（１）ＡｎｇⅡ处理ＦＢ２４ｈ后,ＤＮＡ合成速率和细胞数比对照组分别增加６０％和３９％;（２）ＡｎｇⅡ处理ＦＢ５ｍｉｎ后,ＭＡＰＫ活性比对照组增高２０３％;（３）培养新生大鼠ＦＢ含有两个ＭＡＰＫ同型体－ｐ４４ｍａｐｋ和ｐ４２ｍａｐｋ,其中ｐ４４ｍａｐｋ含量高于ｐ４２ｍａｐｋ,分别为总量的５８％和４２％。ＡｎｇⅡ处理５ｍｉｎ后,ＭＡＰＫ蛋白含量（ｐ４４＋ｐ４２〕增高４２９％,其中ｐ４４ｍａｐｋ的增加明显大于ｐ４２ｍａｐｋ的增加,分别比相应对照增高４８６％和３４９％。以上结果表明,ＡｎｇⅡ诱导的ＭＡＰＫ活性和含量的增加,参与了ＦＢ的增殖反应,其中ｐ４４ｍａｐｋ的作用较为显著     

重组人骨形态发生蛋白－2成熟肽在大肠杆菌中的表达及其诱导成骨活性

报告了人骨形态发生蛋白－２（ＢＭＰ－２）成熟肽的基因克隆,及其在大肠杆菌中的表达。用ＡｆｌⅡ酶剪除ＢＭＰ－２ｃＤＮＡ中的信号肽及前肽部分的序列,将编码成熟肽的ｃＤＮＡ３′端０．３６ｋｂ基因片段克隆于大肠杆菌表达载体ｐＭＸ－１质粒的ＡＴＧ下游,受控于ＰＬＰＲ启动子。重组子以大肠杆菌ＤＨ５α为宿主细胞进行温度诱导表达。工程菌经４２℃６ｈ诱导后,在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上出现一条新蛋白带,分子量约为１２ｋＤ,约占菌体总蛋白的２０％。主要以包涵体形式存在的表达产物经初步纯化后,可获得纯度较高的重组人骨形态发生蛋白－２成熟肽（ｒｈＢＭＰ－２ｍ）。小鼠肌肉植入试验发现。ｒｈＢＭＰ－２ｍ植入后的不同时间,在局部出现间质细胞的聚集和增生、软骨细胞及软骨基质的生成和硬质骨的形成,证明ｒｈＢＭＰ－２ｍ具有明显的诱导新骨形成的作用。     

脑膜炎球菌菌苗的发展现状及展望

根据荚膜多糖的结构及抗原性不同,将奈瑟氏脑膜炎双球菌分为１２个血清群。绝大多数的脑脊髓膜炎是由Ａ、Ｂ和Ｃ群流脑球菌所引起。Ａ、Ｃ群流脑多糖菌苗自１９６９年研制成功后,在世界范围内迅速得到广泛使用,对防止由Ａ、Ｃ群流脑球菌引起的暴发性脑脊髓膜炎起到了重要作用。由于Ｂ群流脑多糖抗原对人体缺乏免疫原性,外膜蛋白（ＯＭＰ）及脂多糖（ＬＰＳ）被用作研制Ｂ群菌苗的目的抗原。目前使用的多糖菌苗或ＯＭＰ菌苗都存在一定的局限性。将Ａ、Ｃ群多糖抗原结合到蛋白载体上对成人免疫取得了很好的结果,可望弥补多糖抗原对低年龄组儿童免疫效果不佳的缺点。新的多渠道的尝试,如多价ＯＭＰ菌苗、抗遗传基因型菌苗等或许能在不远的将来制备出全面的、有效的流脑菌苗。     

大鼠杏仁基底外侧核腹侧部向杏仁中央核的纤维投射──HRP逆行示踪结合免疫组织化学法研究

本实验采用ＨＲＰ逆行示踪结合免疫组织化学方法,对大鼠杏仁底基底外侧核腹侧部向中央杏仁核的纤维投射特征及其化学特性进行了研究。一侧杏仁中央核（Ｃｅ）内注射ＨＲＰ后,于双侧杏仁基底外侧核腹侧部（ＢＬＶ）观察到大量ＨＲＰ标记神经元,以对侧为主;在杏仁基底外侧核前（ＢＬＡ）、后（ＢＬＰ）部及梨状皮质内侧部（ＰＣＭ）第Ⅱ、Ⅲ层仅观察到少量ＨＲＰ标记神经元。当注射范围局限于杏仁中央核内侧部（ＣｅＭ）,ＢＬＶ的标记神经元相对多．当注射范围局限于杏仁中央核外侧部（ＣｅＬ）,ＢＬＶ的标记神经元相对少。将有ＨＲＰ标记神经元的切片分别与生长抑素（ＳＯＭ）、脑啡呔（ＥＮＫ）、Ｐ物质（ＳＰ）抗血清按ＡＢＣ法完成免疫组织化学反应,结果在ＢＬＶ、ＰＣＭ第Ⅱ、Ⅲ层观察到ＨＲＰ－ＳＯＭ免疫阳性双标记神经元,但未发现ＨＲＰ－ＳＰ、ＨＲＰ－ＥＮＫ免疫阳性双标记神经元;在ＢＬＡ和ＢＬＰ未发现ＨＲＰ－ＳＯＭ、ＨＲＰ－ＥＮＫ、ＨＲＰ－ＳＰ免疫阳性双标记神经元。本文着重讨论了ＢＬＶ与内脏功能活动的关系,认为ＢＬＶ不同于ＢＬＡ与ＢＬＰ,它参与“内脏环路”。此外,还分析了ＰＣＭ投射到Ｃｅ的神经元的功能学意义。     

溪黄草的化学成分研究(Ⅱ)

从中药溪黄草〖Ｒａｂｄｏｓｉｎ ｓｒｒａ（Ｍａｘｉｍ．）Ｈａｒａ〗中又得到一和睦无定形固体Ａ和一种无色针状晶体Ｂ,Ａ经不谱数据分析鉴定为正十六酸（１）,Ｂ经ＧＣ－ＭＳ分析确定为３种甾醇,２４－甲基胆甾醇（Ⅱ）,豆甾醇（Ⅲ）,β－谷甾醇（Ⅳ）,其中化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ系首次从溪黄草〖Ｒａｂｄｏｓｉａ ｓｅｒｒａ（Ｍａｘｉｍ（Ｈａｒａ〗中分离得到。     

人乙型肝炎病毒前表面抗原（preS）基因的突变及其在家蚕细胞中影响 …

为探讨人乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前表面抗原（ｐｒｅＳ）基因的表达调控机理,以实现高效表达,利用ＰＣＲ方法在克隆的ｐｒｅＳ基因的第２、３位密码子引入同义突变。消除存在于５端编码区保守的反向重复序列,将ｐｒｅＳ基因及其突变形式（ＭｐｒｅＳ）分别重组到转移载体ｐＢＭ０３０,获得ｐＢＭ－ｐｒｅＳ和ｐＢＭ－ＭｐｒｅＳ。将ｐＢＭ－ｐｒｅＳ和ｐＢＭ－ＭｐｒｅＳ分别与野生型家蚕核型多角体病毒（ｂｍＮＰＶ）ＤＮＡ共转     

2,5—KDG还原菌Ⅱ基因的克隆和在大肠杆菌中的表达

参照文献上的２,５－二基－Ｄ－葡萄糖酸还原酶Ⅱ基因序列,合成两个引物序列并在两端加上ＥｃｏＲＩ和ＢａｍＨＩ两个酶切位点,抽提棒状杆菌ＳＣＢ３０５８菌株的染色体灯反进行ＰＣＲ反应,克 得到２,５－ＤＫＧ还原酶Ⅱ基因,酶切验民预期的结果相符合。将此片段克隆到ＰＧＥＭ－Ｔ载体上保存将２,５－ＤＫＧ还原酶Ⅱ基因用ＥｃｏＲⅠ和ＢａｍＨＩｍ内切酶切下,连接到ＰＢＶ２２０载体上,构建成表达载体,４２℃诱导不能得     

冻干口服霍乱rBS—WC菌苗安全及保护效果评价的小鼠模型探讨

本文仿照人口服免疫程序用小鼠为模型对冻干口服霍乱ｒＢＳ－ＷＣ菌苗制品进行了安全及保护率评价。给ＫＭ小鼠口服三种不同剂量的ｒＢＳ－ＷＣ菌苗后,无发病,无体重减轻,无死亡现象,表明该菌苗安全,无毒副作用。免疫组与安慰剂组小鼠用肠结扎攻毒试验评价保护效果,两组小鼠用吴江－２及滨－４３活菌攻击后,免疫组显示良好保护作用（Ｐ＜０．０５）。此法可以用于口服型ｒＢＳ－ＷＣ菌苗的评价,但也存在需要动物数较多,个体间差异较大,手术较麻烦的问题。     

两种新紫杉烷类二萜化合物的研究

从云南红豆杉（ＴａｘｕｓｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓＣｈｅｎｇ ｅｔＬ．Ｋ．Ｆｕ）的树皮中分离鉴定了５ 种化合物。通过理化常数及ＩＲ、ＭＳ、１Ｈ－ＮＭＲ、１３Ｃ－ＮＭＲ分析,鉴定为７－表－紫杉醇Ｂ（Ⅰ）、１,１３－二乙酰基－１０－去乙酰基巴卡亭Ⅲ（Ⅱ）、紫杉醇Ｃ－７－木糖甙（Ⅲ）、紫杉醇（Ⅳ）和３－表－熊果酸（Ⅴ）。其中,Ⅰ和Ⅱ为新化合物     

海边香豌豆胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚发生

将生长１４ｄ的海边香豌豆（Ｌａｔｈｙｒｕｓ ｍａｒｉｔｉｍｕｓ（Ｌ．）Ｂｉｇｅｌ）无菌苗下胚轴切成０．５ｃｍ左右的片段,置于含有１ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ,０．５ｍｇ／Ｌ ＢＡ和０．５％ＮａＣｌ的ＭＳ培养基中,２８ｄ后诱导出胚性愈伤组织。将其转入含有适当浓度２,４－Ｄ的ＭＳ培养基上,又２８ｄ后可得到大量球形胚和心形胚以及极少量鱼雷胚和子叶胚。诱导体细胞胚适合的２,４－Ｄ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ。较高浓度的２     

沙蒿组织培养植株再生

沙蒿种子灭菌后,接入ＭＳ无激素培养基得到无菌苗。取２０天无菌苗子叶切成小块,接入含２,４－Ｄ的ＭＳ培养基诱导愈伤组织,并在同样培养基上进行继代增殖。愈伤组织在含６－ＢＡ,ＮＡＡ的ＭＳ培养基上分化得到芽。将芽转至含ＩＡＡ的１／２ＭＳ培养基上形成根,从而得到完整植株。同时对影响沙蒿组织培养的一些因素进行了研究。结果表明培养基中２,４－Ｄ含量（０．５－２ｍｇ／Ｌ）越高,沙蒿愈伤组织生长越快,而褐化发生时     

香石竹的叶片培养及植株再生

１植物名称香石竹（Ｄｉａｎｔｈｕｓｃａｒｙｏｐｈｙ－ｌｌｕｓ）,别名康乃馨。２材料类别无菌苗叶片。３培养条件以ＭＳ为基本培养基。分化培养基附加：（１）６－ＢＡ１．０ｍｐ·Ｌ－１（单位下同）＋ＮＡＡ０．３;（２）６－ＢＡ１．０＋ＮＡＡ０．１;（３）６－ＢＡ１．０＋ＮＡＡ０．０５。增殖培养基附加６－ＢＡ０．５＋ＮＡＡ０．１。分化和增殖培养基均加蔗糖３％、琼脂０．７％,ｐＨ５．８。生根培养基为１／２ＭＳ附加ＮＡＡ０．１,蔗糖２％,琼脂０．６％,ｐＨ５．８。培养温度为（２５±１）℃,光照１２ｈ·ｄ－１,…     

鼻咽癌组织中Epstein－Barr病毒潜伏感染膜蛋白基因片段的克隆及分析

从两例鼻咽癌（ＮＰＣ）病人的活检组织切片中,用ＰＣＲ方法扩增出ＥＢ病毒潜伏感染膜蛋白（ＬＭＰ）基因的ＥｘｏｎⅠ、ＩｎｔｒｏｎⅠ、ＥｘｏｎⅡ和ＩｎｔｒｏｎⅡ共５００ｂｐ的片段,克隆入载体ｐＧＥＭ－３ｚｆ（＋）′,测定核苷酸序列,其中有一个样品所测序列段与台湾株相似,另一个样品则与Ｅ９５－８极为相似。由此可知,中国大陆南方的ＮＰＣ组织中ＥＢＶ－ＬＭＰ基因存在不同的变异。     

百脉根愈伤组织原生质体再生植株

百脉根无菌苗幼茎在含２．０ｍｇ／Ｌ－,２,４－Ｄ,０．１ｍｇ／Ｌ２－ｉｐ的ＭＳ培养基上诱导和继代培养愈伤组织。选取绿色松散颗粒愈伤组织分离原生质体。原生质体培养在调整珠ＫＭ８Ｐ,Ｖ－ＫＭ,ＭＳ和ＳＨ培养基上「含３００ｍｇ／Ｌ,ＣＨ,２％ＣＷ,２％蔗糖,６％葡萄糖,２．０ｍｇ／Ｌ,２,４－Ｄ,０．５ｍｇｇ／Ｌ,ＢＡ,５ｍｍｏｌ／Ｌ ＭＥＳ」,原生质体再生细胞均能分裂,并形成小愈伤组织,但以ＫＭ８０为     

辣椒转基因植株再生

用改建的农杆菌转化辣椒,已建立有效的转化两再生系统。辣椒无菌苗（１２天苗龄）子叶在再生培养基（ＭＳ＋３ｍｇ／Ｌ ＢＡ）上预培养２天,再用农杆菌感染,共培养２天,再转入含Ｋｍ（１００μｇ／ｍｌ）的再生培养基中培养２－３周后,子叶基部有多丛芽形成。分切多丛芽,将芽转选择性的芽伸长培养基（ＭＳ基本成分＋Ｂ５维生素类＋２ｍｇ／Ｌ ＢＡ＋７５μｇ／ｍｌ）上,待芽长至２－３ｃｍ后,切下并转入生根培养基（ＭＳ＋     

朝鲜淫羊藿的化学成分（Ⅱ）

从朝鲜淫羊藿的地上部分分离到七个成分（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ）。经ＵＶ,ＩＲ,＾１Ｈ－ＮＭＲ,＾１３Ｃ－ＮＭＲ,ＭＳ及化学方法鉴定了它们的结构,分别是ｉｃａｒｉｔｉｎ－３－Ｏ－ａ－Ｌ－ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ（Ⅰ）,ｓａｇｉｔｔａｔｏｓｉｄｅ Ａ（Ⅱ）,ｓａｇｉｔｔａｔｏｓｉｄｅ Ｂ（Ⅲ）,３,５,７－ｔｒｉｈｙｄｒｏｘｙｌ－４＾１－ｍｅｔｈｏｘｙ１－８－ｐｒｅｎｙ１－ｆｌａｖｏｎｅ－