用日立835-50型氨基酸分析仪测定色氨酸方法的试验报告

<正> 色氨酸是蛋白质的重要成分,是人和各种动物生长发育不可缺少的必需氨基酸之一,在营养代谢中起着重要作用。因此,准确测定食品及饲料中的色氨酸含量有着重要意义。由于色氨酸在酸水解中破坏较大,所以酸水解法不适于色氨酸测定,须用碱水解法单独测定,因色氨酸在碱水解中比较稳定。但以往所采用的碱水解法是以淀粉作保护     

稻米色氨酸测定方法的改进

<正> 色氨酸是动物和人体中八种必需氨基酸之一,它对人和动物的生长发育、新陈代谢起着重要的作用,被称为第二必需氨基酸。目前测定蛋白质的氨基酸多采用氨基酸分析仪及气相色谱法测定其水解产物,这种方法需要昂贵的仪器,且在水解过程中色氨酸完全被破坏,尤其是象水稻这些含碳水化合物高的粮食作物,水解时即使采取了添加保护剂的办法,色氨酸的破坏仍是严重的,     

用碱水解的方法测定蛋白质的消光系数

在蛋白质结构与功能的研究中,有时蛋白质溶液的浓度是一个重要的参数.紫外吸收法是测定蛋白质溶液浓度最为常用的方法,而已知蛋白质的消光系数是用紫外吸收法准确测定蛋白质溶液浓度的前提条件.在0.1 mol/L NaOH溶液中,蛋白质发生碱性水解,因而蛋白质溶液可以看作是色氨酸和酪氨酸的二元体系.以此为依据,给出了用碱水解的方法测定蛋白质消光系数的方法.这一方法操作步骤简便易行,蛋白质消光系数的计算公式简单明了.用这一碱水解的方法分别测定了几种氨基酸组成不同的蛋白质的消光系数,与文献数据对照,得到了令人满意的结果,测定误差均小于±5％.     

微波高压水解罐的研制及在测定色氨酸方面的应用

<正> 测定食物蛋白中色氨酸含量需先将蛋白质水解,常用的水解方法有酶法和碱法,后者近来已被美国公职分析家协会定为正式分析方法。两种方法通常需耗时4～20小时。在先前的工作中,我们已成功地用微波—NaOH在5分钟内快速水解了纯蛋白溶菌酶以及3份食品标样,并准确地测定了     

木瓜蛋白酶在谷物色氨酸测定上的应用

目前测定谷物色氨酸的方法操作繁琐,费用昂贵,准确性也差,为了适应在普通实验室条件下进行大批样品的测定,我们采用木瓜蛋白酶水解玉米粉等谷物的蛋白质,然后用对二甲胺基苯甲醛(DAB)显色法进行比色测定,方法简单、快速,可达到上述测定目的。     

用Beckman 121MB型氨基酸分析仪快速分析含硫氨基酸和色氨酸

蛋白质中胱氨酸、蛋氨酸和色氨酸在用盐酸水解时损失较大,常用过甲酸氧化法和碱水解法处理。采用文中方法分析时间短,分辨率高,半胱磺酸、甲硫氨酸砜和色氨酸的保留时间分别为５．３、１１．６和２０．４分钟。每分析一个样品需２６分钟,且基线平稳、重复性好、色谱图清晰。     

应用磺酸水解法进行人血白蛋白氨基酸组成分析

磺酸对色氨酸无破坏作用,因此,磺酸水解蛋白质可以同时测定出色氨酸。但,磺酸溶液制备比较繁琐,因此,至今在我国尚无人使用。本文用对甲苯磺酸法水解人血白蛋白,用氨基酸自动分析仪进行其氨基酸组成分析,其结果与理论值基本相符。     

应用两种不同的酸水解方法水解纯蛋白质、食物和饲料时氨基酸的测定

<正> 为比较快速酸水解(由Gehrke推荐)和经典的酸水解方法,对含有不同量的蛋白质与非蛋白质组分的十五种动物和植物来源样品,用6N HCl 110℃24小时和145℃4小时两种酸水解方法进行了氨基酸测定。因高温、短时水解(HTST)方法曾仅用于纯蛋白质,此项工作的目的是证实这一水解方法能够应用于任何物质,特别是食物和饲料,     

PT-C_(18)小柱在食物氨基酸分析中脱色效果观察

<正> 在进行食物样品的氨基酸组分和含量分析时,需用盐酸水解处理,在此过程中,由于色氨酸和碳水化合物的破坏,产生有颜色的分解产物,从而干扰了正常的氨基酸分析,尤其是当水解样品中颜色较深而氨基酸含量较低时,影响更为明显。因此,对水解样品脱色引起人们的十分关注,很多学者在     

蛋白质酸水解25分钟色氨酸的回收率

<正> 在蛋白质和多肽的氨基酸分析中,水解条件起着非常重要的作用。同时,已知在酸水解过程中,某些氨基酸会受到不同程度的破坏,特别是色氨酸,在110℃用6MHC1水解超过24小时,几乎全部破坏。另外,由于疏水性肽键的抗水解作用,在通常水解条     

生物样品中色氨酸荧光测定法的改进

<正> 色氨酸是必需氨基酸之一,也是普遍食物中或日常膳食的主要限制氨基酸,食品中色氨酸的含量是评价其营养价值的重要指标。色氨酸对酸不稳定,当用酸水解蛋白质时,往往被破坏,所以不能用氨基酸分析仪按一般程序和其他氨基酸同时被分析定量,     

水解蛋白注射液中色氨酸测定方法的比较

本文对水解蛋白质注射液中色氨酸比色测定的方法进行了比较研究,结果表明用N-1一萘基乙二胺方法比对二甲氨基苯甲醛法具有灵敏度高(约相当于20倍),精密度好(前法的变异系数为1.7%,后法为13.1%)等优点,两法的平均回收率均为97%。另外,还测定了上述二法的吸收曲线和应用两法对武汉地区用不同工艺生产的水解蛋白注射液进行了实际考察。结果表明用酶法生产的水解蛋白,其色氨酸含量可达550μg/ml。     

牛乳铁蛋白素及其衍生物的研究进展

牛乳铁蛋白素是牛乳铁蛋白经胃蛋白酶水解后释放出来的一段小肽,是牛乳铁蛋白的活性中心。通过对不同动物来源乳铁蛋白素活性的研究发现牛乳铁蛋白素的抗菌活性最强。进一步的丙氨酸突变实验研究表明,在牛乳铁蛋白素活性最强的15个氨基酸序列中,色氨酸在抗菌过程中起着重要作用。牛乳铁蛋白素正是因为含有两个色氨酸,其活性才会比只含有一个色氨酸的其它来源的乳铁蛋白素活性要高。很多实验室围绕着牛乳铁蛋白素中的色氨酸、碱性氨基酸和其他一些芳香族氨基酸展开了一系列的突变研究,本文综述了这些研究及在氨基酸改变后活性的变化,为以后研究及开发牛乳铁蛋白素提供理论基础。     

蛋白质碱水解管的制作

测定蛋白质中的色氨酸时,常要用LiOH、NaOH、Ba(OH)_2等作水解(催化)剂.如用一般玻璃管封口来水解,会产生很多硅酸盐,其中有些是溶于水的,如Na_2SiO_3等,它将污染分离柱中的离子交换树脂,使分离率下降.水解管普遍推荐使用聚四氟乙烯材料制作,但要解决好以下两点:一是在高温下必须密封良好.二是水解前后的样品要便于转移.我们设计了一种水解管,能满足上述要求.该管由管体、锥形垫圈、盖三部分组成(图1).因聚四氟乙烯材料硬度较高,可购棒料用车床加工制成.     

用氯仿-甲醇抽提法测定鱼体脂肪含量的研究

脂肪含量的测定,是鱼类能量学及营养学的重要环节1。目前最常用的测定方法,是用氯仿一甲醇(2:1)混合液(下面简称C-M液)抽提1。这一方法的基本步骤见图1。不同研究者采用的具体步骤有所差异。如崔奕波1引用的方法系将样品用C-M液匀浆后直接离心,而Hopkins等2对样品不匀浆,仅用C-M液浸泡半小时后离心。这一方法最初是用于医学检验;在生态学研究中。常需要测定大量样品,故方法的简化尤为重要。本研究的目的是探讨不同抽提步骤对测定结果的影响,以期对原方法进行简化;同时将C-M抽提法与我国常用的索氏乙醚抽提法进行比较。       

血清中甲_2巨球蛋白对胰蛋白酶抑制活力测定

甲_2巨球蛋白(简称α_2M)是存在于人和动物血清中一种广谱蛋白酶抑制剂。实验利用α_2M对蛋白酶的特殊抑制原理:α_2M通过包陷蛋白酶去抑制蛋白酶对天然蛋白质的水解作用,但不破坏蛋白酶活化中心,因而仍保留对小分子合成底物的水解,释放显色基团,在分光光度计上比色,达到测定目的。本实验用人和大鼠正常混合血清作样品,对实验方法和测定系统中选择样品和试剂量作较详细介绍。方法灵敏,血清量少。为实验室和临床检验提供测试方法。     

兔肌醛缩酶中色氨酸残基的分布及其作用

在不同条件下,用NBS修饰兔肌醛缩酶的色氨酸残基。pH4.0时测定到全酶分子的总色氨酸残基数为12,用邹氏图解法求得其中2个色氨酸残基为表现活性所必需。而在pH7.5条件下,仅鉴定出2个色氨酸残基。这些实验表明此2个色氨酸残基很可能就位于分子表面。此外,紫外光谱和萤光光谱指出,pH4.0时,NBS引起酶构型的较大的变化,而在pH7.5时仅引起较轻微变化。这些结果认为:醛缩酶的四个亚基对整个分子构象的贡献是不完全相同的,同时醛缩酶整个分子也是不对称的。     

荧光法测定羽毛中的色氨酸含量

本文探讨了羽毛中色氨酸的荧光分析方法,将２～５ｍｇ的羽毛样品置于聚四氟乙烯管中,用１ｍｌ含０．５％可溶性淀粉的５ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＯＨ为水解液,以纯氮为保护气体,在１１０℃水解２０小时,水解产物用６ｍｏｌ／ＬＨＣｌ中和,然后用Ｎａ２ＨＰＯ４－ＮａＯＨ的缓冲溶液（ｐＨ１１）稀释５倍,在激发波长２８０ｎｍ,发射波长３６２ｎｍ测定荧光强度及其浓度。经多次试验,结果较为满意,重现性较好,其相对标准偏差为０．６１％～３．００％。样品的回收率为９５．３％～１０２．１％。此法快速、简便,适用于各种羽毛的例行分析。     

改进色氨酸前处理方法的试验报告

<正> 色氨酸是生物体主要的必需氨基酸之一,在营养代谢中起着重要作用,因而准确测定有一定意义。但由于色氨酸前处理方法较复杂,分析比较困难,导致目前国内外开喂该项目的不多。我所于83年曾进行了用日立835—50型氨基酸分析仪测定色氨酸方法的试验,并取得了较好效果。但为了更好     

一种简便适用的蛋白质水解方法

进行蛋白质的氨基酸的组成分析时,蛋白质水解液的制备是十分重要的一步。样品水解的好坏直接影响测定结果的准确性。经典水解条件是:6N HCI,110℃在封管条件下恒温水解24小时。在这条件下进行水解,蛋白质分子中的Ser,Thr,Trp,Cys,Tyr,Met仍可能因氧化、降解等反应影响回收率。为此,要求在封管时减压或充氮以提高回收率,但这又需要特殊装置,国内一般实验室不具备这样的条件。我们试用1.5ml聚丙烯带盖的离心管代替玻璃指管进行蛋白质水解。实验结果表明用这二种管子水解结果相同,而使用聚丙烯离心管可以免去加热封管等步骤,减少了样品的损