雌激素β受体和疼痛

雌激素因具有广泛的生物学效应,而日益成为研究的热点。目前已经清楚雌激素通过雌激素α受体所发挥经典作用,但雌激素β受体的具体作用及机制尚不明晰。通过对雌激素β受体的研究发现,其在性别分化、学习和记忆、情绪调控、内分泌,以及生殖行为中均具有重要作用。本文就雌激素β受体与疼痛相关的研究进展作一综述。     

雌激素受体α和β在不同雌激素干预大鼠骨代谢中的表达

应用雌性大鼠的骨质疏松模型,通过骨密度(BMD)检测、RT-PCR和Westernblot等技术观察去卵巢(Ovariectomy,OVX)、结合性雌激素(ConjugatedEquineEstrogens,CEE)和戊酸雌二醇(EstradiolValerate,EV)对大鼠松质骨骨量以及松质骨中雌激素受体(ER)α和βmRNA和蛋白表达的影响,探讨两受体亚型在介导雌激素参与松质骨代谢的不同作用机制以及不同来源雌激素对ERα和ERβ表达的差异性调节。40只7-8周龄的雌性Sprague-Dawley大鼠,在观察动情周期后随机分成四组:对照组(Control,n=10)、去卵巢组(Ovariectomy,OVX,n=10)、去卵巢后结合性雌激素治疗组(CEE,n=10)和去卵巢后戊酸雌二醇治疗组(EV,n=10)。对照组大鼠行假手术,其余三组行去卵巢手术。术后48天(12个动情周期),对照组和OVX组用生理盐水喂养12天(3个动情周期),CEE组和EV组分别用药物的生理盐水溶液喂养12天。结果显示:在对照组中,大鼠松质骨ERα的蛋白表达水平显著性高于ERβ蛋白表达水平,而ERα的mRNA表达水平显著性低于ERβmRNA水平。与对照组相比,OVX组大鼠松质骨中ERα的蛋白表达水平显著性降低,ERαmRNA表达水平显著性增加,而ERβ蛋白和mRNA的表达水平均显著性增加。与OVX组相比,CEE组大鼠松质骨中ERβ蛋白和mRNA的表达水平均显著性下降,而EV组大鼠松质骨中ERα蛋白表达显著性上升,ERαmRNA表达显著性下降,ERβ蛋白表达显著性下降。此外,OVX大鼠松质骨的骨密度下降均可通过应用CEE和EV得到显著性改善。上述结果提示:⑴ERα可能是大鼠松质骨中优势表达的受体亚型,在介导雌激素参与松质骨代谢中起着主导作用。⑵不同来源雌激素可能侧重不同的ER亚型途径产生骨保护效应。     

雌激素受体参与疼痛调控的研究进展

雌激素受体属转录因子核受体超家族成员。雌激素受体的两个亚型ERα和ERβ都有类似于核受体超家族成员的调节结构,介导雌激素参与生理和病理过程中的多种效应。ERα和ERβ广泛分布于神经系统中疼痛调节相关的区域,大量动物实验及临床研究资料证实ERα和ERβ参与急、慢性疼痛的调控。本文拟对雌激素受体的特性及其在疼痛调控中的作用予以阐述。     

雌激素受体β与乳腺癌

雌激素受体β(ERβ)与雌激素受体α(ERα)的结构相似,是一类配体调节的转录因子,属于核受体超家族,分布于乳腺等多种组织中,具有重要的生理病理学意义。本文简要综述雌激素受体β的基因结构、剪接变体、转录调节机制及其在乳腺癌发生发展、治疗预后和抗雌激素耐受中的意义。     

雌激素和多巴胺对大鼠垂体组织中雌激素受体基因表达的影响

目的研究雌激素和多巴胺激动剂对雌激素受体在大鼠垂体组织表达的作用。方法20只成年雌性Wistar大鼠,切除卵巢后,随机分2组：（1）对照组（n=5）,皮下植入空白硅胶管;（2）雌激素组（n=15）皮下植入含有乙烯雌酚的硅胶管,8周后,两组各处死5只大鼠,雌激素组剩余大鼠（n=10）取出硅胶管,随机再分2组,安慰剂组（n=5）给予自来水灌胃,多巴胺组（n=5）给予溴隐亭（多巴胺激动剂）灌胃,用药4周后处死动物。放免法测定血清PRL水平,用反转录一聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测ERs在各组垂体组织中的表达,以β-actin作为内参照,借助于计算机凝胶成像系统分析表达量。结果ERa,ERβ以及TERP在各组大鼠垂体组织均有表达,其中ERα和TERPmRNA水平在雌激素组明显高于对照组（P〈0．001）,在安慰剂组和多巴胺组的表达无明显差别。结论大鼠垂体组织中存在ER的表达,雌激素对ERα和TERP的表达具有升调节作用,多巴胺不影响雌激素受体的表达。     

雌激素受体β与相关肿瘤研究进展

雌激素通过与特定的雌激素受体相互作用发挥重要的细胞生长和分化作用。雌激素受体是属于细胞核受体超家族的配体依赖性的反式作用子。尽管最初认为雌激素由单一的受体,即传统的雌激素受体,现称为ERα介导其作用,第二个ER新亚型,现称为ERβ,1996年被发现,并由此引发了一场对于雌激素在正常生理学和疾病过程的作用重新评价。自从发现ERβ以来,其作为相关肿瘤的预警因子以及其潜在的作为药物介入的新靶点的价值成为研究热点。在过去的10年中,我们对雌激素信号的理解有很大改变。现在,已知ERα和ERβ组织细胞分布和功能不同。ERβ存在于许多正常和疾病组织中,包括生殖系统和其他组织器官的恶性肿瘤,如乳腺、子宫内膜、卵巢、前列腺和结肠直肠癌以及其他肿瘤。因此,ERβ在这些肿瘤的发生发展和治疗方面的作用引起了人们越来越多的关注。现就ERβ在雌激素相关肿瘤的发生、发展、预后评估以及治疗意义进行综述。     

雌激素受体β的研究进展

雌激素受体β（ERβ）属于核受体超家族成员,是一类配体调节的转录因子。ERβ与ERα的结构相似,但在组织学分布、生物学功能等方面不尽相同,具有重要的生理学和病理学意义。本文就ERβ的基因结构、分子生物学特性、组织分布、转录调控的分子机制以及与肿瘤发生、发展的关系作一综述。     

大豆异黄酮对老龄大鼠雌激素水平和子宫雌激素受体表达的影响

目的探讨大豆异黄酮（soy isoflavones,SIF）对老龄大鼠雌激素水平和雌激素受体表达的影响。方法将40只16月龄雌性SD大鼠随机分为高、中和低剂量大豆异黄酮3个实验组（H-SIF,M-SIF和L-SIF）和1个对照组,每天分别按1005、0和25 mg/（kg.bw）剂量的大豆异黄酮进行灌胃,对照组灌服生理盐水。42 d后称重,股动脉放血处死动物收集血清、摘取子宫称重并冷冻保存。采用放射免疫法测定血清中雌二醇（E2）、睾酮（T）、泌乳素（PRL）、促黄体生成素（LH）和促卵泡激素（FSH）的含量;RT-PCR检测子宫雌激素受体α（ERα）基因的表达。结果与对照组相比,3个实验组血清中E2和PRL都升高,LH和FSH都降低,其中高剂量组差异有显著性（P〈0.05）;子宫重量无明显差异;子宫ERα表达呈下降趋势,但无统计学意义。结论大豆异黄酮能调节老龄大鼠血清中的雌激素水平,且有剂量依赖性;大豆异黄酮对老年大鼠子宫重量和子宫ERα的表达无影响。     

交配行为对雄性棕色田鼠雌激素及雌激素β受体在相关脑区的影响

应用行为观察、放射免疫分析和免疫组织化学相结合的方法,研究了雄性棕色田鼠在交配后血清中的雌二醇(E)、与交配行为有关的脑区E免疫阳性细胞数目(E-IRs)、雌激素β受体(ERβ)免疫阳性细胞数目(ERβ-IRs)的变化.将睾丸下降的成年雄性棕色出鼠分成3组:(1)对照组:嗅闻24h新鲜锯木.(2)暴露组:嗅闻24h动情期雌鼠底物.(3)交配组:与动情期雌鼠交配24h.放射免疫榆测血清中的E浓度,交配组比暴露组、对照组显著增高,暴露组和对照组无显著差异.通过免疫组化检测与性行为有关的脑区:弓状核(ARC)、终纹床核(BST)、隔外侧核(LS)、杏仁内侧核(ME)、内侧视前区(MPO)、下丘脑腹内侧核(VMH)E-IRs和ERβ-IRs,E-IRs在交配组比对照组和暴露组各区域都显著增多,暴露组比对照组在隔外侧核显著增多外,其他区域无显著差异.     

雌激素受体相关受体亚型在鼻咽癌中的表达及分析

目的:探讨雌激素受体相关受体(estrogen receptor related receptors,ERR)α、β、γ亚型表达与鼻咽癌的关系.方法:随机抽取健康体格合者40人为时照组,鼻咽癌患者40例为试验组,采用RT-PCR方法检测ERRs家族各亚型的mRNA表达,采用Westston Blot印迹方法检测ERR各亚型在鼻咽癌组织中的表达.结果:RT-PCR及Western Blot蛋白印记检测显示ERR-α在对照组低表达、在实验组高表达,两组患者外周血及鼻咽组织中ERR-B表达差异无统计学意义,ERR-γ在对照组高表达、在实验组低表达.结论:ERR-α和ERR-γ在鼻咽癌患者体内表达异常,其可能与鼻咽癌的发生发展相关.     

雌激素对成年和老年雌性大鼠血管平滑肌细胞雌激素受体α表达的影响及其机制

目的探讨雌激素对成年和老年雌性大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)雌激素受体α(ERα)表达的影响及其机制。方法采用RT-qPCR、Western blot及重硫酸盐修饰后测序(BSP)的方法,检测体外培养的3-4代成年(2-3月龄)和老年(≥20月龄)雌性SD大鼠VSMC在无或有生理剂量(10-10 mol/L、10-8 mol/L)17β-雌二醇(E2)存在下,ERα的表达及其启动子区CpG岛甲基化水平的变化。结果成年雌性大鼠VSMC无论在有或无雌激素存在时均表达ERα,且表达水平随雌激素浓度增加而上升。而老年雌性大鼠VSMC无论是在mRNA水平还是蛋白质水平几乎检测不到ERα表达,即使补充雌激素达最高生理剂量也无法诱导ERα的重新表达,其ERα基因启动区CpG岛呈现高水平甲基化。结论成年大鼠VSMC表达ERα,且生理剂量雌激素对其表达具有诱导作用。而老年大鼠VSMC ERα基因由于CpG岛已发生高度甲基化而抑制,生理剂量雌激素对ERα表达的诱导作用丧失。     

交配行为对雄性棕色田鼠雌激素及雌激素β受体在相关脑区的影响(英文）

应用行为观察、放射免疫分析和免疫组织化学相结合的方法,研究了雄性棕色田鼠在交配后血清中的雌二醇（E）、与交配行为有关的脑区E免疫阳性细胞数目（E-IRs）、雌激素β受体（ERβ）免疫阳性细胞数目（ERβ-IRs）的变化。将睾丸下降的成年雄性棕色田鼠分成3组：(1) 对照组：嗅闻24 h新鲜锯木。(2) 暴露组：嗅闻24 h动情期雌鼠底物。(3) 交配组：与动情期雌鼠交配24 h。 放射免疫检测血清中的E浓度,交配组比暴露组、对照组显著增高,暴露组和对照组无显著差异。通过免疫组化检测与性行为有关的脑区：弓状核(ARC)、终纹床核（BST）、隔外侧核（LS）、杏仁内侧核（ME）、内侧视前区（MPO）、下丘脑腹内侧核（VMH）E-IRs和ERβ-IRs,E-IRs在交配组比对照组和暴露组各区域都显著增多,暴露组比对照组在隔外侧核显著增多外,其他区域无显著差异。ERβ-IRs在这3组之间均无显著差异,而且ERβ免疫阳性细胞颜色浅淡。结果表明：雌激素对雄性棕色田鼠的交配活动起一定的作用,但可能通过其他受体,ERβ在雄性棕色田鼠的交配活动中可能未起重要作用。     

哺乳期接触双酚A对子代雄鼠睾丸结构及雌激素受体β表达的影响

目的研究哺乳期接触双酚A(BPA)对雄性小鼠睾丸结构及雌激素受体β(ERβ)表达的影响。方法 20只妊娠母鼠,待分娩后随机分为高、中、低剂量组,BPA染毒剂量为100、50、5 mg/(kg.d)和对照组,母鼠分娩后第2天开始每天灌服BPA,仔鼠通过乳汁暴露于BPA,一直持续到第22天断奶,研究其成年后睾丸组织形态学改变,并用免疫组织化学、RT-PCR和Western blot方法研究BPA对其成年后睾丸内ERβ表达的影响。结果睾丸形态学分析表明BPA处理组睾丸发育受到严重影响,生精细胞排列紊乱,支持细胞和各级生精细胞生长受到不同程度的抑制;免疫组化、RT-PCR及Western blot均显示,高、中、低剂量组雄鼠成年后睾丸组织中ERβ的表达均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论哺乳期接触BPA影响雄鼠睾丸发育,改变其成年后睾丸形态,提高睾丸组织内ERβ表达,提示BPA可能通过改变雌激素受体表达从而影响睾丸发育。     

原因不明月经过少子宫内膜雌激素受体β表达

探讨原因不明月经过少子宫内膜雌激素受体β（estrogen receptorβ,ERβ）表达。从两组人群中分别选取原因不明月经过少子宫内膜组织40例,月经量正常子宫内膜组织40例。通过逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）和Western印迹法检测ERβ表达。分析实验组与对照组ERβ-mRNA及蛋白质的表达情况,将不同年龄、人流次数子宫内膜ERβ-mRNA及蛋白质的表达进行比较。实验组ERβ-mRNA表达量为0.6457±0.2957,对照组为0.9637±0.3621,实验组ERβ-mRNA比对照组表达下调,差异有统计学意义（t=-6.589,P〈0.001）。实验组ERβ蛋白质表达量为347.37±30.35,对照组为445.21±45.67,实验组ERβ蛋白质比对照组表达下调,差异有统计学意义（t=-4.353,P〈0.001）。两组人群不同年龄、人流次数ERβ表达比较,差别无统计学意义。原因不明月经过少患者ERβmRNA及蛋白质在子宫内膜中的表达低于月经量正常子宫内膜,其可能与月经量减少有关。原因不明月经过少患者子宫内膜ERβ的表达与年龄、人流次数无关。     

香猪雌激素受体α、β基因cDNA的克隆及分析

本文采用RT-PCR技术,分别从香猪的子宫和卵巢总RNA中扩增了雌激素受体α和β(Erα、Erβ)两种cDNA,分别长1788 bp和1581 bp,包括起始密码子和终止密码子,碱基序列与大白猪的Erα、Erβ基因的相似性为99.3%和99.6%.Erα、Erβ两个基因编码595、526个氨基酸,N-末端的20、24个氨基酸残基为信号肽,成熟肽序列与大白猪之间均有4个氨基酸不同.三维结构分析发现,与大白猪相比,香猪Erα成熟肽第192、231位氨基酸由Ser、Met变为Gly、Thr,位于DNA结合结构域,成熟肽438位氨基酸由Val变为Gly,位于Erα的配体结合结构域;Erβ成熟肽中,167位和360位氨基酸由Asp和Phe变为Glu和Pro,位于受体的DNA结合域和配体结合域,这五个位点的氨基酸替代可能影响Ers蛋白与雌激素受体应答元件、雌激素等配体的结合,改变相关基因的转录效率,并可能影响香猪的卵巢、子宫等繁殖系统的发育,与香猪的低繁殖力有关     

雌激素受体在人舌鳞癌中的表达及β-雌二醇对其增殖的影响

目的：观察雌激素受体（ER）在人舌鳞癌Tca8113细胞系细胞上的表达,研究β－雌二醇（estrabiol,E2)对培养的舌癌细胞增殖的影响。方法：用免疫细胞化学方法和RT－PCR方法检测雌激素受体在人舌鳞癌细胞上的表达,将β－雌二醇（β－E2）作用于体外培养的人舌鳞癌细胞,测定^3H-TdR掺入量,并用流式细胞仪测定细胞周期。结果：经免疫细胞化学和RT－PCR方法可检测到ER－α和ER－β在人舌鳞癌细胞上均有表达,其中ER－β表哒相对较弱。不同浓度的β－E2可增加^3H-TdR掺入量,并存在着剂量效应。106-6mol/L的β－E2能使人舌鳞癌细胞处于G1期的细胞比例从对照组的76．5％下降至62．3％,而处于S期和G2期的细胞比例从23．5％上升至37．7％,细胞的DNA合成增加,促进细胞的增殖。β－E2对舌癌细胞的促增殖作用可被Tamoxifen阻断。结论：在人舌鳞癌细胞上有雌激素受体的表达,且β－E2在体外能明显促进培养的人舌鳞癌细胞的增殖。     

雌激素受体β表达载体的构建及其转录活性测定

为探索雌激素受体B(ERβ)在乳腺癌形成过程中的分子机制,构建出带HA标签的ERl3真核表达载体。首先将PCR扩增出的带HA标签的DNA片段连接到pcDNA3载体中,得到重组质粒pcDNA3-HA。再将ERβ完整编码区序列克隆到pcDNA3-HA中,得到重组质粒pcDNA3-HA—ERβ。Western印迹结果表明,转染pcDNA3-HA-ERβ重组质粒的293T细胞表达了与预期大小一致的HA—ERβ。用含雌激素应答元件的报告基因系统检测ERβ的转录活性表明。HA—ERβ在293T细胞中的表达激活了报告基因的表达。ERβ表达载体的成功构建为深入研究其生物学功能打下了坚实的基础。     

雌激素相关受体 ERR 的功能及其调控

雌激素相关受体 (estrogen -related receptor , ERR) 属于核受体超家族,是第一个发现的孤儿核受体,包括 ERRα, ERRβ和 ERRγ . ERR 的生物学功能主要体现在以不同的方式参与雌激素信号途径, ERR 与雌激素受体 (estrogen receptor , ER) 在骨骼组织和乳腺组织中拥有共同的靶基因,其中 ERRα和 ERRγ的表达状况还可作为乳腺癌诊断标志 . 另外, ERR 还在代谢调控中起重要作用 . 由于至今未在体内找到 ERR 的小分子配体,因而找到 ERR 活性调节因子对理解与雌激素相关的疾病如骨质疏松症、乳腺癌和糖尿病等将是非常有用的 .     

益坤宁对围绝经期大鼠下丘脑雌激素受体表达的影响

目的检测益坤宁对围绝经期大鼠下丘脑雌激素受体（estrogen receptor,ER）表达的影响,探讨益坤宁治疗围绝经期综合征的作用机制。方法采用自然衰老的围绝经期大鼠,随机分为围绝经期对照组、西药对照组和中药实验组;另取5月龄青年雌性大鼠做青年对照组。各组大鼠分别连续灌胃给予生理盐水、利维爱、中药益坤宁和生理盐水4周。通过免疫组化观察大鼠下丘脑ER蛋白的表达部位;Western blot定量检测大鼠下丘脑ERα和ERβ蛋白表达。结果ERα、ERβ蛋白主要表达于细胞胞质中。围绝经期对照组与青年组相比,ERa、E邓蛋白表达量明显下降（P〈0．05,P〈0．01）;中药实验组与围绝经期对照组比较,ERα、ERB蛋白表达量均明显增多（P〈0．05,P〈0．01）;西药对照组与围绝经期对照组相比,ERα、ERβ蛋白表达量增多（P〈0．05）。结论益坤宁通过提高围绝经期大鼠下丘脑组织中ERα、ERβ蛋白表达水平,使ER的合成增加,从而提高雌激素靶组织中ER的含量以增强雌激素的生物活性而发挥治疗作用。