癸培养基的研制及在小麦花药培养中的应用研究

在多年的小麦(Triticum aestivum L.)花药培养育种及对多种培养基应用研究的基础上,从调整培养基的大量元素和微量元素入手,建立了癸培养基。经过L_(16)(4~5)正交实验,筛选出NH_4N0_3、KNQ_3、MgSO_4、MnSO_4在培养基中较优的配比。在培养基对比实验中,癸培养基的愈伤组织平均诱导率分别比C_(17)、W_(14)、N_6培养基提高了30.31％、50.60％和57.96％,且对不同的杂交组合都能表现出优越性。在癸培养基中附加0.9mg/L REA(rare eaxth addition,稀土元素附加剂),可使小麦花药愈伤组织诱导率提高54.25％～64.07％,并对愈伤组织的生长有促进作用。     

应用花药培养途径筛选小麦耐盐变异体

“京花1号”小麦的花药培养在含不同 NaCl浓度,附加 2mg/L 2,4-D和0.5mg/L KT的N_6培养基上,确定筛选浓度。0.3％、0.4％和0.5％ NaCl逆境下,接种经γ射线辐照的和未辐照的“京花1号”小麦花药,诱导愈伤组织,并在同样NaCl逆境下分化,获得6株花粉植株。其中经γ辐照,0.5％NaCl下获得的1株,得到1粒种子。经无盐条件下繁殖后,γH_3(照射第3代)种植在中等盐渍地,在0.29％含盐量土壤中生长正常。γH_4代按单株作进一步盐渍地、盐池和水培鉴定,有3个株行其耐盐力明显高于亲本“京花1号”。     

小麦花药培养力的遗传研究概况

50年代末期,胡萝卜根的悬浮细胞被诱导分化成 完整的小植株,此后,虽然各种植物的离体培养不断获 得再生植株,但是,进展比较缓慢,尤其是禾本科作物 的花药培养,其根本原因可能是基础研究薄弱。本文 就小麦花药培养力（Anther Culture Responce,记作 ACR）的研究进展作一介绍。     

小麦花药培养中激素对离体小孢子发育的影响

朱至清等分别对小麦花药培养中离体小孢子的发育过程,作了详细研究。但在不同的时期调整外源激素,对花粉愈伤组织诱导有什么效果?对离体小孢子发育又有什么影响?迄今还不清楚。1983—1984年我们采用花药漂浮培养,分期附加外源激素的方法,并结合对离体小孢子发育的观察,探讨了这个问题。     

不同基因型小麦花药培养过程中药壁变化的研究

在相同的培养条件下,比较了不同基因型小麦花药培养过程中药壁变化的差异。组织切片观察表明：易诱导材料花药培养过程中,药壁细胞发育充实,活力强,降解衰退较难诱导材料有所延缓;两种材料的花药刚离体时绒毡层就存在着明显的差异。     

不同基因型小麦花药培养过程中药壁变化的研究

在相同的培养条件下 ,比较了不同基因型小麦花药培养过程中药壁变化的差异。组织切片观察表明 :易诱导材料花药培养过程中 ,药壁细胞发育充实 ,活力强 ,降解衰退较难诱导材料有所延缓 ;两种材料的花药刚离体时绒毡层就存在着明显的差异     

利用花药培养快速创制小麦条锈病和黄矮病抗性新种质

利用中间偃麦草与普通小麦杂交育成的部分双二倍体－中５为外源抗性基因供体,通过花药培养途径,在它与几个冬小麦品种的５个杂交组合中,诱导出试管花粉绿苗１４４株,移栽加倍后,形成了４９个加倍单倍体株系。通过小麦条锈病和黄矮病抗性鉴定获得了几个高抗黄矮病或者对条锈病近免疫的新材料。其中ＤＨ７２８对条锈病菌近免疫,２ｎ＝４４,减数分裂构型为０．７０１Ｖ＋０．０３５ＩＩＩ＋２１．５７９ＩＩ＋０．４５６Ｉ,为双     

小麦不同基因型材料花药培养中雄核发育的研究

对小麦离体花药中花粉发育的调查表明：难诱导材料花药在培养初期,花粉退化快,大量小孢子败育,多细胞(核)花粉出现晚、频率低;而易诱导材料花药培养初期,花粉退化相对延缓,多细胞(核)花粉出现早且频率高,这些内在的优势使得更多的小孢子有可能转向孢子体发育,从而获得较高的出愈率。     

小麦不同基因型材料花药培养中雄核发育的研究

对小麦离体花药中花粉发育的调查表明 :难诱导材料花药在培养初期 ,花粉退化快 ,大量小孢子败育 ,多细胞 (核 )花粉出现晚、频率低 ;而易诱导材料花药培养初期 ,花粉退化相对延缓 ,多细胞 (核 )花粉出现早且频率高 ,这些内在的优势使得更多的小孢子有可能转向孢子体发育 ,从而获得较高的出愈率。     

八倍体小偃麦与普通小麦杂交后代花药培养的研究

本试验研究了八倍体小偃麦与普通小麦杂交后代愈伤组织的诱导频率、雄核发育和秋水仙碱诱导小孢子染色体加倍的效果。结果表明:八倍体小偃麦与普通小麦杂种F_1愈伤组织的产量具有明显的杂种优势;其雄核发育存在均等分裂和不均等分裂等类型,这与小麦中的观察结果相似;在培养基中加入秋水仙碱可以有效地诱导小孢子第一次有丝分裂时染色体加倍。     

太谷核不育小麦对花药培养的反应

本文通过对太谷核不育小麦杂交一代可育株和不育株,及二、三、四代可育株花药的离体培养,结果表明：(1)不育株单核早期花药培养能够获得再生植株;(2)杂交一代的可育株花药出愈率最高,分化率亦最高;(3）基因型对花药出愈率和分化率有明显的影响。     

小麦花药培养后代和杂交后代中高分子量麦谷蛋白亚基变异分析

通过对Alondra、Orofen等5个小麦品种进行花药培养,同时以新春9号、京771、CB037等9个高分子量麦谷蛋白亚基组成不同的小麦品种相互间配制24个正、反交组合,分析小麦加倍单倍体无性系和品种间杂交后代中高分子量麦谷蛋白亚基变异,探讨利用花药培养和杂交手段改良HMW-GS组成的可能性。SDS-PAGE电泳分析发现,小麦加倍单倍体无性系中HMW-GS发生了频繁变异,Alondra加倍单倍体中变异率最高(61.8%),Verry加倍单倍体次之(16.7%),均出现了原始材料中所不具备的亚基类型;HMW-GS在部分F1杂种中呈现不完全共显性、亚基表达沉默和正、反交亚基表达不一致现象,宁春4号/CB037、京771/宁春4号2个组合中出现了双亲所不含有的亚基;通过连续自交和对新出现亚基的跟踪选择,获得了表达新亚基的高代株系。研究结果对于改良小麦加工品质,加深了解小麦HMW-GS编码基因的遗传特性、结构特性等具有一定理论意义和实践价值。     

表油菜素内酯和水杨酸对小麦花药培养的影响(简报)

在W14培养基中添加0．02mg·L－1表油菜素内酯或2．0mg·L-1水杨酸后,愈伤组织的分化率分别提高30％和24％,前者还能降低白苗分化率18％。水杨酸对绿苗分化率无影响,但可增加白苗分化率50％。     

杨树花药培养筛选耐盐变异体的研究

以杨树花药为外植体诱导单倍体愈伤组织,进行耐氯化钠和碱性盐（模仿天然盐碱土成份配成的几种盐的混合物）变异体的筛选。结果表明,不同的杨树品种对这两种选择剂的耐性是不同的,分化态愈伤组织比脱分化态愈伤组织显示更强的抗性,不同的花氏愈伤组织无性系间在抗盐能力上也存在差异,对再生植株的叶子和愈伤组织进行过氧化物同工酶分析,发现耐盐变异体与对照的酶谱是有差异的,前者比后者在相同带区常常多出一条谱带。     

一个适于小麦花药培养的合成培养基

在通过花药培养产生花粉植株、建立花粉 单倍体育种法的研究中,如何不断改进培养基、 提高花粉植株的诱导频率,是一个十分重要的 间题。1977-1978年我们对一个小麦花药合成 培养基— 麦基一号培养基［cal做了一些改进试 验,获得显著效果。现将试验情况和结果简要 介绍如下。     

紫外光照射小麦花药的研究

紫外光照射小麦花药进行组织培养,通过2年的试验结果初步表明:紫外光对诱导愈伤组织和分化绿苗有一定的作用,从多数试验材料的愈伤组织诱导率与绿苗分化率,照射1秒的比照射2秒、6秒、8秒和未照射的对照高。     

基因型和培养条件对大麦花药培养的影响

不同基因型大麦(Hordeum vulgare)的花粉愈伤组织诱导率不同。带大麦黄花叶病抗性基因的品种。品系或F1杂种的诱导率(8.83—14.21%)高于不带抗性基因的材料(1.04—6.25%)。 MS基本培养基添加草2,4—D.1 mg/L,Kt0.1 mg／L,BA0.2mg／L,生物素0.1mg, 其诱导率(平均11.09%)高于MS添加2,4—D3mg／L和Kt0.1 mg／L的诱导率(6.33%)及MS添加2,4—D1mg／L 和Kt 0.1 mg／L的诱导率(8.21%)。接种后先15℃暗培养5天,再转入25℃暗培养,其产生愈仿组织的高峰期推迟2—4天,但诱导率却从对照的5.84%提高到11.59%;25℃暗培养与25℃光 — 暗交替培养,诱导率无显著差异。     

红掌花药培养

研究了发育时期、基因型、培养基、低温预处理等因素对红掌花药愈伤组织诱导的影响.结果表明,小孢子中晚期是红掌花药培养的适宜时期;基因型对花药膨大率有显著的影响;不同培养基上的Sweet Dream和Jungle Bush的花药膨大率差异显著;低温预处理明显提高Sweet Dream的花药膨大率.从Sweet Dream花药诱导出致密和疏松两种愈伤组织,两种愈伤组织芽分化率和生根率存在明显差异,致密愈伤组织的小苗生根率为95.00%,而疏松愈伤组织的小苗生根率为30.00%.Sweet Dream的花药再生植株与叶片再生植株在形态特征上有差异,染色体鉴定结果表明,花药再生植株均是二倍体.