吸烟小鼠呼吸道上皮细胞上皮钙粘附素表达的研究

通过免疫荧光法检测不同吸烟时间小鼠呼吸道上皮细胞上皮钙粘附素（Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ,Ｅｃｄ）表达的动态变化,并采用显微荧光光度术进行定量分析。结果表明,首次吸烟１ｈ后呼吸道上皮细胞Ｅｃｄ表达与正常对照组比较明显下调（Ｐ＜００１）,４６Ｗ后降到最低水平。以后逐渐上调,吸烟８Ｗ后Ｅｃｄ表达恢复正常,气管上皮细胞表达高于正常（Ｐ＜００１）。提示,Ｅｃｄ表达的动态变化在呼吸道上皮细胞损伤与修复过程中起重要作用     

上皮钙粘附素的表达与乳腺癌分化程度的关系

用免疫组织化学方法研究２１例新鲜乳腺浸润性导管癌标本中上皮钙粘附素（Ｅ－Ｃａｄ－ｈｅｒｉｎ,ＥＣＤ）的表达。结果发现ＥＣＤ在６２％（１３／２１例）乳腺癌中呈减少至消失表达;其中８３％（５／６例）高分化乳腺癌（Ⅰ级）呈保留表达,在８０％（１２／１５例）低分化乳腺癌（Ⅱ、Ⅲ级）呈异质性减弱至消失表达;ＥＣＤ表达与腺管形成程度成正相关,与核分裂数负相关。表明上皮钙粘附素的存在与否,可能决定着乳腺癌的分化程度。     

上皮钙粘附素—连环素复合体功能调控的研究进展

上皮钙粘附素－连环素复合体及其与细胞骨架蛋白的相互作用是维持上皮细胞极性和完整性的重要功能单位并在炎症、组织损伤后的修复及恶性肿瘤的浸润、扩散等过程中发挥重要作用。     

CD15s抗原、CD44v6和E-上皮钙粘附素表达与胆管癌生物学行为的关系

目的　探讨CD15s抗原、CD44v6和E 上皮钙粘附素 (E cadherin ,ED)表达与胆管癌生物学行为的关系。方法　应用催化信号放大免疫组织化学方法 ,检测 43例胆管癌组织中CD15s抗原、CD44v6和ED表达 ,综合分析了CD15s抗原、CD44v6和ED蛋白表达与胆管癌临床病理因素间的关系。结果　在胆管癌组织中 ,CD15s抗原、CD44v6和ED表达阳性率分别为 6 7 4%、 6 2 8%和 5 3 5 %。CD15s抗原和CD44v6呈高表达及ED呈低表达与胆管癌的TNM分期、分化程度和转移密切相关 (P <0 0 5 )。CD15s表达与CD44v6表达呈正相关 (r =0 49,P <0 0 0 1) ;CD15s抗原和CD44v6表达与ED表达呈负相关 (r =- 0 45 ,r=- 0 5 2 ,P <0 0 0 1)。结论　CD15s抗原、CD44v6和ED异常表达提示胆管癌生物学行为不良。     

Ⅰ型大肠杆菌粘附素的表达受环境因素影响的初步探讨

本文探讨了葡萄糖、半乳糖、麦芽糖、ＰＨ、温度因子对尿路感染Ⅰ型大肠杆菌粘附素表达的影响。结果发现葡萄糖、半乳糖和低温可使粘附素的表达减少,而且葡萄糖和半乳糖与低温因子累加可使细菌几乎完全不表达粘附素。另外分析了与此有关的一些现象。     

香烟烟雾和脂多糖对大鼠肺组织热休克蛋白70表达的影响

目的观察香烟烟雾和脂多糖对大鼠肺组织Hsp70表达的影响。方法48只成年雄性Wistar大鼠随机分为6组:健康对照30d组、健康对照3个月组、单纯薰香烟30d组、单纯薰香烟3个月组、单纯气管注入脂多糖组、薰香烟30d加气管注入脂多糖组,每组8只。采用SABC免疫组化法观察Hsp70在各组大鼠肺组织中的表达。结果(1)健康对照30d组、健康对照3个月组、单纯薰香烟30d组、单纯薰香烟3个月组Hsp70阳性产物的平均吸光度值分别为0·194±0·027,0·189±0·025,0·339±0·049,0·147±0·033。单纯薰香烟30d组与健康对照组30d相比大鼠肺组织Hsp70水平显著升高(P<0·05);单纯薰香烟3个月组与健康对照3个月组相比大鼠肺组织Hsp70水平显著降低(P<0·05);单纯薰香烟3个月组与单纯薰香烟30d组相比大鼠肺组织Hsp70水平显著降低(P<0·05)。(2)健康对照30d组、单纯气管注入脂多糖组、薰香烟30d加气管注入脂多糖组Hsp70阳性产物的平均吸光度值分别为0·194±0·027,0·285±0·059,0·143±0·024。单纯气管注入脂多糖组与健康对照30d组相比大鼠肺组织Hsp70水平显著升高(P<0·05);薰香烟30d加气管注入脂多糖组与健康对照30d组相比大鼠肺组织Hsp70水平显著降低,差异具有显著性(P<0·05);薰香烟30d加气管注入脂多糖组与单纯气管注入脂多糖组相比大鼠肺组织Hsp70水平显著降低(P<0·05)。结论香烟烟雾或脂多糖短期暴露使大鼠肺组织Hsp70表达升高;香烟烟雾长期暴露或香烟烟雾与脂多糖短期联合暴露使大鼠肺组织Hsp70表达降低。提示Hsp70可能与慢性阻塞性肺疾病的发病有一定关系。     

肺炎克雷伯菌菌毛粘附素克隆表达及其对体外培养细胞的粘附活性

摘要：【目的】肺炎克雷伯菌(K.pn)与宿主细胞的粘附是致病的首要条件,粘附过程主要通过菌毛粘附素MrkD蛋白介导。为了进一步分析MrkD蛋白与宿主细胞间的粘附机制,进一步确定MrkD蛋白的粘附阻断作用。【方法】构建肺炎克雷伯菌菌毛粘附素融合蛋白原核表达质粒pGEX-4T-mrkD,转入大肠杆菌BL21,优化诱导表达条件,表达产物经亲和层析纯化、凝血酶切除融合蛋白GST标签后,进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。激光共聚焦显微镜定位MrkD蛋白在宿主细胞上的结合部位;通过粘附活性试验与粘附动力学实验研究了MrkD蛋白的生物活性。【结果】实验得到了分子量为35 kDa的MrkD蛋白,定位了MrkD蛋白在宿主细胞上的结合部位,并证明了MrkD蛋白可以显著影响肺炎克雷伯菌对宿主细胞的粘附力。【结论】本试验首次证实了MrkD蛋白的粘附阻断作用并观察到了其与宿主细胞的作用位点,为研究肺炎克雷伯菌的致病机制,寻找粘附素功能表位奠定了基础。     

蒺藜提取物对小鼠损伤睾丸细胞凋亡的影响

目的观察蒺藜提取物对小鼠损伤睾丸细胞凋亡的影响,探讨蒺藜对小鼠损伤睾丸的保护修复作用。方法健康雄性小鼠30只,随机分为对照组、模型组和给药组,每组10只;建立睾丸热损伤模型,给予治疗剂量的蒺藜提取物;TUNEL法检测凋亡细胞,激光共聚焦扫描显微镜观察;电镜标本制备,透射电镜观察。结果模型组与对照组相比凋亡细胞明显增多,细胞结构改变;给药组与模型组相比凋亡细胞明显减少,细胞结构基本正常。结论蒺藜提取物对小鼠损伤睾丸具有保护修复作用。     

TGF-β1对人正常胎盘滋养层细胞表达E-钙粘素的调节

E-钙粘素是在胚胎发育中最早表达的分子之一,它可以与Catenin家族成员形成钙粘素/Catenin复合物参与多种细胞功能,对于胚胎植入和胎盘发生具有重要作用.通过RT-PCR、免疫组织化学、细胞粘附分析等方法,在人正常妊娠和输卵管妊娠母胎界面上,发现E-钙粘素主要定位于绒毛细胞滋养层细胞和滋养层细胞柱,从滋养层细胞柱近端向远端,其蛋白质水平逐渐降低.正常胎盘组织中E-钙粘素水平在妊娠早期较高,妊娠中期直至分娩期均维持低水平.在体外培养的人正常胎盘细胞滋养层细胞系(NPC细胞)中,转化生长因子β(TGFβ1)显著上调E-钙粘素蛋白和mRNA的表达,并呈现时间和剂量依赖性,同时,TGFβ1促进NPC细胞之间的粘附.上述结果表明,胎盘中存在E-钙粘素的旁分泌调节机制,E-钙粘素可通过调节滋养层细胞粘附而参与细胞侵润的有节制调控.     

五倍子小鼠肝脏毒性的基因表达谱分析

昆明种小鼠（雄性,体重20±2g）随机分为正常对照组和五倍子给药组。给药组每日灌胃五倍子提取物（0．2mL／10g体重,相当于8g五倍子生药／1kg体重）一次,连续给药30天。对照组灌胃等量生理盐水。之后分别提取两组小鼠的肝组织总mRNA,经反转录分别用Cy3,Cy5荧光标记．制备用于芯片杂交的cDNA探针。两种探针等量混合后与小鼠全基因组寡核苷酸芯片杂交．杂交信号经芯片扫描仪获取并用GenePix Pro4．0软件分析。结果表明,五倍子给药组中有461条基因差异表达,其中上调基因267条,下调基因194条,功能已知基因373条,功能未知基因88条。通过对这些差异表达基因的生物学功能及生物通路分析,它们主要涉及代谢、DNA结合与转录、蛋白质合成与修饰、细胞骨架及黏附因子、细胞周期与分化、离子通道与受体、信号转导、免疫、细胞凋亡等。上述研究结果对分析五倍子肝损伤机制可能具有十分重要的作用。     

胎脑提取液对衰老小鼠大脑皮质神经元的影响

目的 观察胎脑提取液对衰老小鼠大脑皮质神经元酸性磷酸酶(ACP)活性和尼氏体含量的影响,探讨胎脑提取液的抗衰老作用。方法 选用健康昆明种小白鼠30只,随机分为3组;采用D-半乳糖制备亚急性衰老模型;组织化学方法显示大脑皮质神经元内的酸性磷酸酶(ACP)和尼氏体;显微图像分析仪进行定量分析。结果 衰老模型组与正常对照组相比,小鼠大脑皮质神经元ACP活性明显升高,尼氏体含量明显减少;给药组与衰老模型组相比,小鼠大脑皮质神经元ACP活性明显降低,尼氏体含量明显增加。结论 胎脑提取液可以稳定大脑皮质神经元的内环境,减少神经元的损伤,促进神经元蛋白质的合成,具有一定的抗衰老作用。     

褪黑素对胃癌小鼠Survivin表达的影响

目的探讨褪黑素对胃癌小鼠Survivin表达的影响。方法选用6-8周龄SPF级615近交系小鼠,接种胃癌MFC细胞,建立荷瘤小鼠模型并给予不同剂量的褪黑素处理,用Real-time PCR法和Western blot法检测肿瘤组织中Survivin mRNA和蛋白的表达。结果 Real-time PCR和Western-blot检测显示褪黑素各干预组小鼠胃癌组织中Survivin基因的表达水平下降且随褪黑素剂量增大而降低。结论褪黑素具有下调survivin的作用。褪黑素降低survivin的表达,可能是褪黑素抑制肿瘤的作用机制之一。     

胎脑提取液对衰老小鼠海马神经元酶活性影响的实验研究

目的 观察胎脑提取液对衰老小鼠海马神经元酸性磷酸酶（ACP）和琥珀酸脱氢酶（SDH）活性的影响,探讨胎脑提取液的抗衰老作用。方法 选用健康昆明种小白鼠30只,随机分为3组;采用D-半乳糖制备亚急性衰老模型;酶组织化学方法结合显微图像分析。观察各组小鼠海马神经元ACP和SDH的活性。结果 衰老模型组与正常对照组相比,小鼠海马神经元ACP活性明显升高,SDH活性明显降低;给药组与衰老模型组相比,小鼠海马神经元ACP活性明显降低。SDH活性明显升高。结论 胎脑提取液可以延缓海马神经元的衰老进程,具有一定的抗衰老作用。     

胎脑提取液对衰老小鼠肝细胞酶活性影响的实验研究

目的：观察胎脑提取液对衰老小鼠肝细胞琥珀酸脱氢酶(SDH)和酸性磷酸酶(ACP)活性的影响,探讨胎脑提取液的抗衰老作用。方法：选用健康昆明种小白鼠30只,随机分为3组;采用D-半乳糖制备亚急性衰老模型;酶组织化学染色观察各组小鼠肝细胞SDH和ACP的活性。结果：衰老模型组与正常对照组相比,小鼠肝细胞SDH活性明显降低,ACP活性明显升高;给药组与衰老模型组相比,小鼠肝细胞SDH活性明显升高,ACP活性明显降低。结论：胎脑提取液可以延缓肝细胞的衰老进程,具有一定的抗衰老作用。     

褪黑素对小鼠H22细胞增殖及pRB和E2F-1表达的影响

目的探讨褪黑素(melatonin,MLT)对小鼠H22细胞增殖的影响及其抗肿瘤作用机制.方法在Balb/c小鼠腹腔中复苏H22细胞,体外培养,分为3组进行试验:生理盐水组、10-6mol/L MLT组和10-9mol/L MLT组,每12h加药一次.采用MTT法分析MLT对小鼠H22细胞增殖的影响;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞周期时相分布;免疫组织化学方法检测体外培养H22细胞株和移植瘤组织pRB和 E2F-1的蛋白水平.结果 1.MTT法表明MLT对小鼠H22细胞增殖有明显的抑制作用,并有剂量依赖性;2.FCM显示MLT可引起H22细胞G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例降低;3.免疫组织化学分析显示MLT处理H22细胞使pRB水平降低, E2F-1水平升高.结论 MLT可抑制H22细胞的增殖,其机理可能是通过上调E2F-1、下调pRB,将细胞周期阻滞在G0/G1期.     

禁食对小鼠体重、SOD和丙二醛含量的影响

给小鼠禁食4天后观察体重、肝SOD和心肌丙二醛的影响。结果表明,禁食期间小鼠的体重明显减轻,复食后体重很快恢复;肝脏SOD的活性明显提高,心肌丙二醛的含量显著下降。提示短期禁食具有抗衰老的效应,可提高机体的生存能力。