云南温泉高温菌的研究VII.腾冲酸性高温温泉中的极端嗜热性芽孢杆菌

从腾冲县4个酸性(pH 3.0—5.0)高温(85--96℃)温泉中分离到16株极端嗜热性芽孢杆菌。经鉴定,10株为嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stear6thermophilus),2株(YN86317和YN86326)为高温凝结芽孢杆菌(Bacillus thermoaoagulans sp. Nov.),4株(YN86325、YN86344、YN86344-2和YN86345)为 Baaillus spp.。     

保山地区碱性温泉中的高温菌

保山地区位于云南省西部,是全省温泉分布比较密集的地区之一。温泉作为地热资源已引起有关部门的重视,70年代已进行了地热资源的调查和开发利用研究。但是对于温泉中潜在的高温菌资源,尚未进行过系统考察、研究。现将我们对于保山地区pH8.0以上的高温温泉中的高温菌研究结果报告于后。       

嗜极菌的极端酶

近年来,嗜极菌极端酶的分离鉴定以得了很大进展,本文简述了极端酶的分离纯化及其某些生化特性,极端酶的稳定因素和应用。极端酶的发现与研究,拓宽了传统的生物催化及应用的范围,但是,关于极端酶的稳定机制及其工业应用,仍有许多难题需要解决。     

嗜热脂肪芽孢杆菌高温蛋白酶分解毛发角蛋白的研究

本文研究了嗜热脂肪芽孢杆菌 (Bacillusstearothermophilus)WF - 1 4 6高温蛋白酶对毛发角蛋白的水解作用。结果表明 ,在体积分数为 2 %的巯基乙醇存在的条件下 ,WF - 1 4 6高温蛋白酶对毛发角蛋白有明显的水解作用。对酶解液氨基酸分析表明 ,酶解液中含有对照液中没有的游离蛋氨酸和亮氨酸 ,且游离氨基酸总量是对照样品的 2 .4倍 ,达 1 5 8mg·L-1 。此外 ,酶解液中含有大量的肽     

表面活性剂对嗜热脂肪芽孢杆菌产高温蛋白酶的影响

研究了表面活性剂对嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillusstearothermophilus)WF146产胞外高温蛋白酶的影响。结果表明,表面活性剂Tween80在0.05%～0.1%(体积比)浓度范围内对WF146产酶有一定的促进作用。在培养基中添加0.1%Tween80可使发酵液酶活提高12.7%,Tween20和TritonX100则抑制嗜热脂肪芽孢杆菌WF146产酶。另外,TritonX100抑制嗜热脂肪芽孢杆菌WF146生长,而Tween80和Tween20不抑制其生长。     

极端嗜热古菌的热休克蛋白

随着生物工程产业对于耐高温酶和菌体的需求, 极端嗜热古菌热休克蛋白(heat shock proteins, HSPs)的研究更受重视, 其热休克蛋白体系非常简洁, 不含HSP100s和HSP90s, 就是HSP70(DnaK)、HSP40、(DnaJ)和GrpE等嗜温古菌可能含有的在极端嗜热古菌中几乎不含有, 即仅包括HSP60, sHSP, prefoldin和AAA+蛋白四大类, 因此对其结构、功能和作用机制的研究在理论和实践上都特别有意义。系统地介绍了这四大类组分的结构、功能和作用机制和协同作用的研究进展, 论述了极端嗜热古菌热休克蛋白的系列研究难点和困惑, 展望了进一步的研究方向和重点。     

嗜热脂肪芽孢杆菌高温蛋白酶的产生条件及酶学性质

对嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillusstearothermophilis)WF146的产蛋白酶的条件进行了研究,在58℃条件下,WF146在pH值为75的Fd培养基中振荡发酵培养48h后,发酵液中高温蛋白酶产量可达600u/mL以上。对该酶性质的研究表明,酶分子量为34kD,最适作用pH为80,最适作用温度为80℃,具有良好的pH稳定性及热稳定性。Ca2+对该酶的稳定性具有重要影响,PMSF、DFP及IAA能强烈抑制酶活力,而DTT对该蛋白酶活力无影响     

嗜热脂肪芽孢杆菌质粒的分离

从堆肥和污泥中分离到一批抗药性高温细菌,经电泳检查,发现6株高温细菌细胞中有质粒存在。其中,嗜热脂肪芽孢杆菌T653的细胞DNA提取液电泳图谱上,有三条非染色体DNA条带,用电镜直接观察,证明它们是T653细胞中的三个质粒。测得两个较小质粒的分子量分别为3.6×10~6和45×10~6道尔顿。研究了嗜热脂肪芽孢杆的T653的温度生长条件与其细胞中质粒的关系。T653细胞中三个质粒的明确功能有待进一步探讨。     

嗜热脂肪芽孢杆菌DNA解链蛋白1的纯化及性质

以嗜热脂肪芽孢杆菌为材料,通过ＰｏｌｙｍｉｎＰ沉淀,硫酸铵分级及Ｐｈｅｎｙｌ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ,ＤＥＡＥ纤维素,磷酸纤维素,ＦＰＬＣ ＭｏｎｏＱ,ＦＰＬＣ Ｓｕｐｅｒｏｓｅ１２等柱层析,得到部分纯化的ＤＮＡ解链蛋白１。ＢｓｔＨ１具有依赖ＤＮＡ和Ｍｇ＾２＋的ＡＴＰ酶活力,不同类型的核酸对ＢｓｔＨ１的ＡＴＰ酶活力的促进作用不同。     

同工酶研究在嗜热脂肪芽孢杆菌分类中的应用

嗜热脂肪芽孢杆菌是一个尚未被严格定义的种,它几乎包括芽孢杆菌属内所有能在65℃以上生长的细菌。用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法对151株嗜热脂肪芽孢杆菌的9种酶(G6PDH、LDH、MDH、IDH、AlaDH、LeuDH、过氧化氢酶、过氧化物酶、酯酶)的酶谱进行测定分析。根据其酶谱的差异,可将151株菌株分成两个类型。两型之间8个酶的13或14个基因产物的相异度约为91.8％,两型间的标准遗传距离是2.55。因此这两种类型的细菌也许可以被看作为两个不同的种。     

嗜热芽孢杆菌XJT—9503高温中性蛋白酶的研究

嗜热芽孢杆菌ＸＪＴ－９５０３菌的发酵液经硫酸铵和丙酮分级沉淀分离纯化得到聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的高温中性蛋白酶制品。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ则得酶分子量为３００００。当以酪蛋白为底物时,酶反应最适温度为６５℃,最适ＰＨ为７,在ＰＨ６．５－９范围内稳定。在６５℃、０．０２ＭＰＨ７．５的磷酸缓冲液中的半衰期为５４ｍｉｎ。金属离了铜、汞、铝强列抑制酶活,钙离子、镁离子对酶活有促进作用     

嗜热脂肪芽孢杆菌的表观群与亲缘群的关系

用DNA-DNA体外杂交的方法考察了嗜热脂肪芽孢杆菌的表观群菌株的亲缘关系。按DNA同源性％形成三个亲缘群。亲缘群并不与表观群十分吻合,却与DNA的G+C含量更相关。同一亲缘群菌株DNA的G+c含量相近,然而DNA的。+。含量相近的并不一定属于同一亲缘群。 表观群中各菌株的中心株距离也与DNA的G十。含量相关。。州“的G+C含量接近中心株的菌株,则它与中心株距离也相对地接近。结果表明嗜热脂肪芽孢杆菌是一个异源性的种。本文结果支持Brenner的主张：将表观特征和遗传特征结台作为种的定义。     

嗜热脂肪芽孢杆菌HY—69耐热中性蛋白酶的性质研究

嗜热脂肪芽孢杆菌ＨＹ－６９的耐热中性蛋白酶已纯化。研究了纯酶的性质,该酶分子最为２４ｋｄ,由６个构成一个六聚体。酶的等电点９．１５。最适作用ｐＨ为７．５,最适作用温度为８５℃;该酶具有很好的耐热性,９０℃时酶活半寿期为２２ｍｉｎ,８０℃保温３小时,酶活仍保持６３％;酶的ｐＨ稳定性也好,该酶是金属蛋白酶,活性中心含锌离子,酶的热稳定性依赖于钙离子。测定了酶的氨基酸组成和Ｎ末端氨基酸序列。     

高温锻炼定向选育病毒唑高产菌的研究

利用嗜热脂肪芽孢杆菌酶促法生产病毒唑,经高温锻炼,得６５℃最适生长菌群Ｇ０,它对肌苷的病毒唑产率为原菌株的８倍。初筛后ＧＦ２０株病毒唑的产率达６２．２５％,为原菌株的２７倍。     

极端嗜热古菌尿嘧啶DNA糖苷酶的研究进展

高温会加快碱基脱氨基反应形成损伤碱基的速率,进一步对脱氨基的碱基进行复制会导致突变。因此,极端嗜热古菌基因组的稳定性面临着其生存高温环境的挑战。胞嘧啶脱氨基形成尿嘧啶,是常见的脱碱基类型,复制DNA中尿嘧啶会造成GC→AT的突变。尿嘧啶DNA糖苷酶(Uracil DNA glycosylase,UDG)是修复DNA中尿嘧啶的关键酶。基于识别底物的特异性,UDG分为6个家族,广泛分布在细菌、古菌、真核生物以及一些病毒中。基因组序列显示,极端嗜热古菌至少编码一种UDG。目前,对于细菌和真核生物的UDG已进行了大量的研究,但是关于极端嗜热古菌UDG的研究相对较少,尚处于初期阶段。本文综述了极端嗜热古菌UDG的研究进展,并对今后的研究提出了展望。     

嗜极菌的极端酶

近年来,嗜极菌极端酶的分离鉴定取得了很大进展。本文简述了极端酶的分离纯化及其某些生化特性、极端酶的稳定因素和应用。极端酶的发现与研究,拓宽了传统的生物催化及应用的范围。但是,关于极端酶的稳定机制及其工业应用,仍有许多难题需要解决。     

极端嗜热古菌核酸内切酶Ⅲ的研究进展

胸腺嘧啶乙二醇(thymine glycol,Tg)是常见的氧化性DNA损伤碱基之一。DNA中的Tg能够分别阻止DNA聚合酶和RNA聚合酶进行DNA复制和转录,导致相应的生物学过程终止,进而会引起细胞的死亡,因此DNA中的Tg需要被修复。核酸内切酶Ⅲ(endonuclease Ⅲ,EndoⅢ)是一种双功能DNA糖苷酶,能够切除DNA中的Tg,从而启动碱基切除修复途径进行修复DNA中的Tg。细菌、古菌和真核生物的基因组序列中均存在有EndoⅢ蛋白的编码基因。目前,源自于细菌和真核生物的EndoⅢ已有较多的研究,而古菌EndoⅢ的研究相对较少。基于目前已有的极端嗜热古菌EndoⅢ的研究报道,本文综述了极端嗜热古菌EndoⅢ的研究进展,并展望了今后的研究方向。