扣带素——调节血管内皮细胞屏障功能的新靶点

正血管内皮细胞间连接最顶端的紧密连接是构成旁细胞屏障的重要结构。紧密连接由跨膜蛋白和胞浆蛋白组成,其中胞浆蛋白作为桥梁连接跨膜蛋白和细胞骨架蛋白,因此在决定紧密连接结构的完整性中发挥了重要的作用。然而目前,关于血管内皮中特异性表达的重要胞浆蛋白的研究仍十分有限。扣带素(cingulin)是1988年发现的一种紧密连接胞浆蛋白,已有研究表明cingulin在上皮细胞中参与调控紧密连接跨膜蛋白的表达以及细胞的增殖能力。然而,cingulin在血管内皮中的作用     

紧密连接蛋白-1功能研究进展

紧密连接蛋白-1(claudin-1)作为紧密连接的主要组成蛋白之一,位于人染色体3q28区域,分子量为22.7 kDa,由211个氨基酸残基组成。Claudin-1在肠、食管、肺等组织中均有表达,尤其在肝脏、肾脏、皮肤等组织中表达较高。Claudin-1在细胞中主要定位于细胞膜、细胞核、细胞质以及双细胞的紧密连接等。Claudin-1是诱导上皮–间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)发生的重要蛋白之一,参与肿瘤细胞迁移与侵袭,并介导抗凋亡及细胞增殖。Claudin-1在炎症性肠病、肿瘤、哮喘等疾病的发生发展中扮演重要角色。故该文从claudin-1的分子生物学特性、组织表达及亚细胞定位、参与的重要生物学过程及相关疾病方面进行了综述。     

整肠生对溃疡性结肠炎 小鼠肠上皮屏障的保护作用

目的探讨整肠生对溃疡性结肠炎小鼠肠道紧密连接蛋白表达以及对氧化应激反应的影响。方法选用雄性8~10周龄C57BL/6小鼠40只,随机分为4组:对照组、模型组(3%DSS)、5-ASA组(3%DSS+5-ASA 200mg/kg灌胃)和整肠生组(3%DSS+联合整肠生及5-ASA灌胃),每组10只,造模7d。观察各组小鼠便血程度、组织学损伤情况,通过投射电镜观察各组肠道上皮间紧密连接改变情况,应用Western blot和RT-PCR的方法,检测小鼠结肠黏膜紧密连接蛋白Occludin、ZO-1、Claudin-2的表达情况。结果 (1)与模型组比较,5-ASA组和整肠生组小鼠便血程度明显减轻,DAI评分显著降低(P0.05)。整肠生组与5-ASA组比较,便血减轻,DAI评分降低(P0.05)。(2)电镜显示,对照组肠上皮间紧密连接呈一条致密条带,结构完整,见细胞桥粒,微绒毛光滑、排列整齐,细胞间隙狭窄;模型组肠上皮间紧密连接结构松散、模糊、密度降低,桥粒结构消失,微绒毛稀疏,短缩且长短不一,细胞间隙增宽;各治疗组的紧密连接的破坏情况较模型组有不同程度的改善,整肠生组紧密连接清晰,细胞间隙缩窄,微绒毛排列整齐,出现细胞桥粒。(3)应用Western blot和Real time-PCR法检测,与正常组相比,模型组Occludin、ZO-1蛋白和mRNA表达显著下降,Claudin-2表达显著上调(P0.05);各治疗组较模型组Occludin、ZO-1蛋白表达上调,Claudin-2蛋白表达下调(P0.05),整肠生组较单用5-ASA组更明显提高Occludin、ZO-1蛋白和mRNA表达。(4)与正常组相比,模型组MDA含量增高,SOD活性降低,与5-ASA组相比,整肠生组能更显著地降低MDA含量,提高SOD活性(P0.05)。结论联合应用整肠生通过调节紧密连接蛋白Occludin、ZO-1的表达和降低氧化应激反应,来改善溃疡性结肠炎小鼠肠上皮屏障功能。     

HPV16 E6通过影响外泌体中β-联蛋白和紧密连接蛋白1表达促进宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭

为探讨人乳头瘤病毒16(human papillomavirus 16,HPV16)E6癌蛋白对宫颈癌细胞的生物学行为及外泌体中β-联蛋白(β-catenin)和紧密连接蛋白(claudin-1)表达的影响，本研究利用RNA干扰技术建立HPV16 E6敲低细胞模型(shE6组),通过CCK8试剂盒、流式细胞仪、划痕实验和Transwell实验对细胞增殖、细胞周期、迁移和侵袭特征进行检测，发现shE6相对于对照组(NC组),细胞增殖速率减慢、细胞周期阻滞在G₀/G₁期向S期的过渡阶段，细胞迁移能力显著降低，侵袭能力下降。同时提取细胞上清液中外泌体，利用Western印迹对β-联蛋白和紧密连接蛋白-1表达量进行检测，发现相对于NC组，shE6组细胞内β-联蛋白表达量减少，但外泌体中β-联蛋白量增加，紧密连接蛋白-1在细胞内和外泌体中均增加。上述结果提示，HPV16 E6促进细胞恶性表型可能与E6蛋白能够抑制β-联蛋白以外泌体形式释放，从而增加其在细胞内的积累，以及抑制紧密连接蛋白-1在细胞内和外泌体中的积累有关。     

囊胚形成的基因表达与调控(英文)

囊胚形成是胚胎早期发育过程中一个重要阶段 ,涉及几个重要的生理事件 ,即细胞融合 (compaction ,亦称致密化作用 )、囊胚腔出现、囊胚腔扩张及滋养层和内细胞团的分化。在细胞间连接蛋白的作用下 ,各种细胞间连接方式逐步建立起来 ,在合子型基因组表达调控下 ,促进了最终囊胚的形成。细胞间连接蛋白和细胞粘附相关蛋白参与组建各种细胞间连接 ,参与细胞融合、囊胚腔形成、滋养层分化和囊胚扩张等过程。通过顶部的紧密连接、侧部的缝隙连接和桥粒 ,建立起细胞的连接复合体。在人胚胎 8 细胞之前 ,卵裂球细胞界限明显 ,可能以中间连接方式相互作用 ;8 细胞期发生致密化作用 ,通过紧密连接将细胞分成顶部和基部 ,使得胚胎处于半封闭状态 ,促进胚胎内部积液 ,形成囊胚腔。细胞融合的同时也产生缝隙连接。桥粒最初出现在人胚胎达到 3 2 细胞阶段 ,桥粒连接参与囊胚腔形成以及在囊胚扩张时维持滋养层的稳定性。桥粒由一些跨膜粘蛋白组成 ,包括参与细胞内粘附的桥粒子和桥粒球以及一些细胞质内蛋白 (如desmoplakins,plakoglobin ,plakophilin) ,由细胞内蛋白质形成空斑结构并介导细胞角蛋白丝固定。对植入前牛胚胎的研究表明 ,只有DcII,DcIII和plako三种桥粒蛋白参与桥粒组建。在鼠囊胚中DcII的表达部位位于     

Gap Junction——洞隙连接

Gap Junction一词首先由Revel,J.P.等人于1967年所创用。当时他们发现,在连接处两个细胞的并列质膜间有20 宽,能渗入镧的缝隙(gap),质膜外层上有六角形排列的结构单元,称为连接单元(connexon,CX)。由于这种连接的明显特点是在并列质膜间具有缝隙,故将其称为gap junction,GJ,以区别于紧密连接(tight junction)。1977年Caspar,P.L.D.等人利用X光衍射法证明,CX是由6个连接     

金鱼精巢支持细胞间连接和血睾屏障

本文主要采用冷冻断裂-蚀刻方法,同时结合超薄切片和镧标记实验,研究金鱼精巢内的支持细胞间连接特点及血-睾屏障的形成。结果发现:1)金鱼精巢内支持细胞间连接呈紧密连接、桥粒和间隙连接同时存在的形式。2)各种连接的数量、面积、分布密度会随着小囊内生精细胞的发育而改变。3)紧密连接在精子发生过程的各个阶段都存在,但在形态上表现为Ⅰ型和Ⅱ型两种。4)血-睾屏障是在粗线期精母细胞期后形成,它是Ⅰ型紧密连接发育为Ⅱ型紧密连接的结果。     

黑斑蛙胃上皮细胞紧密连接的冰冻蚀刻电镜观察

冰冻蚀刻技术能使细胞连接立体地显示出来,比用超薄切片技术或镧渗透法获得的结果更容易分析,而且更接近于生活状态,所以被广泛地用于研究动物、植物、微生物的细胞膜和细胞间的连接装置。动物多细胞间保持一定的连接关系,细胞连接在维持机体的正常活动中起着重要作用。胃上皮细胞排列紧密,连接装置特别丰富,因此是研究紧密连接几何形状较好的材料。本文初步报道黑斑蛙胃上皮细胞紧密连接的形态结构。材料和方法黑斑蛙(Rana nigromaculata)采自成都平原。取样按常法进行。实验前,用两栖类生理盐水将组织条洗1至2次后,置于30%的甘油两栖类生…     

有尾类原肠形成过程中外胚层的细胞连接

用冰冻蚀刻和超薄切片的方法研究了蝾螈早期原肠胚外胚层细胞间的细胞连接。内陷开始时的原肠胚,外胚层细胞已具有相当发达的紧密连接,由三到四以至十几条封闭条索组成。在紧密连接的内方有间隙连接,它们和前者距离或远或近,根据颗粒的排列判断,可能还没有功能。桥粒在早期原肠胚还没有出现,到原肠形成即将结束时才开始发育起来,直到神经胚,在腹方表皮中才出现发育完善的桥粒。根据桥粒发育的情况,讨论了在原肠形成的外包运动中,很可能主要是紧密连接起着使外胚层细胞连成一片的作用。     

植物微管结合蛋白AtMAP65-1在拟南芥气孔保卫细胞中的定位(简报)

植物细胞微管骨架的不同排列方式对细胞的生长分化及形态建成具有重要意义,微管的这种动态组织行为不仅需要自身的组成蛋白-微管蛋白(tubulin),还要有微管辅助蛋白MAPs(Microtubule-associated proteins)的参与[1,2]。即MAPs是一类能够与微管骨架特异结合并调节其动态装配过程及其结构、进而影响微管功能的蛋白大分子。其中,MAP65是最先在烟草悬浮细胞BY-2中纯化出来的、分子量约为65KDa的一个微管结合蛋白家族。     

蛋白磷酸酶2A的亚基功能

蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)是一种由催化亚基C、结构亚基A和多种功能特异的调节亚基B组成的全酶复合物,其在基因表达、细胞增殖分化和信号转导等方面有重要调控作用.各种不同亚基组成功能各异的PP2A全酶,调控不同的细胞功能.各亚基在PP2A功能调控中均起关键作用.本文重点介绍PP2A各个亚基在PP2A生物学功能实现中的作用.     

小鼠紧密连接蛋白ZO-2 真核表达载体的构建和表达

目的:克隆小鼠紧密连接蛋白ZO-2(zonula occludens protein2)基因构建其真核表达载体,并验证其在293T细胞系中的表达,为进一步研究其功能奠定基础。方法:从小鼠淋巴结来源的cDNA中分三段分别扩增,通过基因克隆方法获得紧密连接蛋白ZO-2基因全长,连接至pMD-18T载体中,酶切测序正确后,插入pEGFP-C2载体中,构建真核表达载体pEGFP-C2-ZO2。酶切正确后,瞬时转染入293T细胞中,48h后荧光显微镜观察其绿色荧光GFP融合蛋白的表达,并用Western blot检测其在转染细胞中的蛋白水平表达。结果:通过酶切鉴定和测序结果证明成功克隆了ZO-2基因,western blot结果表明成功构建了真核表达载体pEGFP-C2-ZO2。结论:小鼠紧密连接蛋白ZO-2基因的获得和真核表达载体pEGFP-C2-ZO2的成功构建为下一步研究其生物学功能奠定了基础。     

基于TurboID的植物蛋白邻近标记实验方法

邻近标记作为近些年发展起来的一项检测活细胞内蛋白互作关系和亚细胞结构蛋白组的新型技术,已成功应用于多种动植物体系的研究。该技术通过给诱饵蛋白融合一个具有特定催化连接活性的酶,在酶的催化作用下将小分子底物(如生物素)共价连接到酶邻近的内源蛋白,通过富集和分析被标记的蛋白可获得与诱饵互作的蛋白组。经定向进化产生的生物素连接...     

Occludin 蛋白与细胞间紧密连接关系及其临床意义

细胞间紧密连接(tight junctions)广泛存在于上皮细胞及内皮细胞之间,其作用是保持细胞间结构的完整性,确保其功能的正常发挥,紧密连接上有很多种蛋白,occludin蛋白是其中主要蛋白之一,occludin蛋白的结构发生变化会导致紧密连接结构及功能的改变,而紧密连接结构与功能的紊乱是很多临床疾病共同的病理生理学特点,如肿瘤、中风及炎症性肺疾病。Occludin蛋白的结构及功能的改变受很多机制的调控,本文主要对occludin蛋白的结构、功能、调控机制及其与紧密连接之间的关系进行叙述。     

动纤毛轴丝的分子组装

纤毛/鞭毛是从细胞膜表面突出的真核细胞器,它能调节细胞运动及细胞周围液体流动,或者参与机体的感知功能,其异常会引发多种人类纤毛病。作为最早被发现的细胞器之一,纤毛一直是细胞生物学领域的重点研究对象,但是因结构大且复杂,其分子组装机制的揭示长期以来一直是个难题。近些年,随着冷冻电镜技术的发展,多个课题组先后报道了从衣藻到哺乳动物精子鞭毛的轴丝各部分高分辨率结构。该文综述了动纤毛的结构组成和最新的分子组装研究进展,重点描述了轴丝各个组成部分包括双联微管(DMT)、内外动力臂(IDA和ODA)、辐条结构(RS)、中央微管对(CP)和连接复合物(N-DRC)的蛋白组成和分布,为深入理解纤毛的组装过程和功能调节提供了科学依据。     

2004年第15届国际生物学奥林匹克竞赛理论试题A(2)

问题59)下面哪张图显示了细胞吞噬时细胞器间的相互关系。(1分)问题60)在后生动物中,相临的细胞互相连接形成组织和器官。下列哪种细胞间的连接不是实际情况?(1分)A.紧密连接B.斑块连接C.联系D.桥粒E.间隙连接问题61)细胞器可按功能分成组,下列哪个功能组是正确的?(1分)A.核、微丝和原生质膜调节细胞结构和运动B.内质网,高尔基体和线粒体维持膜功能和分泌     

Ezrin与肿瘤的侵袭和转移

Ezrin是细胞骨架与细胞膜连接的特定蛋白之一,它有助于细胞内摄作用、细胞胞吐作用及跨膜信号发放的途径.研究表明,Ezrin在不同肿瘤组织中表达异常,推测它可能参与肿瘤的侵袭转移,其通过改变肿瘤细胞极性及细胞运动、调节肿瘤细胞间黏附及细胞与细胞外基质黏附、参与肿瘤细胞内信号转导而影响恶性肿瘤转移.本文主要介绍了Ezrin生物学特性、与CD44相互关系以及目前在肿瘤研究中的现状.     

紧密连接蛋白claudins应用于肿瘤治疗的进展

Claudins蛋白家族是组成紧密连接(Tight junctions,TJs)必不可少的骨架蛋白,在维持上皮和内皮细胞中的细胞极性、细胞间的粘附固定、细胞旁路的离子运输等发挥重要作用。近年来大量的研究结果证明,claudins在许多人类恶性肿瘤中异常表达。因此,claudins也被作为癌症治疗的潜在靶标。文中就claudin蛋白家族在肿瘤中的表达情况及其相关药物的研究进展进行阐述。     

紧密连接的构成、装配及其调控研究进展

紧密连接(TJ)是存在于所有上皮或内皮细胞连接最顶端的大分子复合物,主要由胞浆蛋白和跨膜蛋白构成,是物质旁细胞转运途径和细胞极性维持的结构和功能基础.此外,TJ双向参与细胞信号的调控,不仅接收来自细胞内部的信号,调控TJ蛋白的装配和成熟;还可传递外来信号到细胞内部调控细胞的增殖、迁移、存活和分化.本文重点介绍了细胞TJ的分子构成、装配和功能调控方面的最新进展,并综述了TJ在肿瘤发生和发展、丙肝病毒感染和遗传性耳聋中的功能,以期为防治与TJ改变相关的上皮疾病提供理论指导.     

隐睾不育的分子基础

隐睾症或热局部处理猴和大鼠睾丸, 能引起可逆性生精细胞凋亡, 出现少精或无精现象. 43℃局部热浴猴睾丸可引起精液中精子数量发生可逆性减少. 睾丸支持细胞为生精细胞提供结构支持与营养供给. 生精上皮中支持细胞间以及支持细胞和各级生精细胞间的特殊连接在精子发生中起着至关重要的作用. 本研究组发现, 热处理后紧密连接分子, 如occludin, zonula occludens-1 (ZO-1)在24~48 h表达明显下降, 血睾屏障(blood-testis barrier, BTB)发生了可逆性破坏. 该过程还伴随着TGF-β2和TGF-β3表达增高, p38 MAPK和ERK/MAPK信号通路激活. 由此推测, 热激可能通过引发TGF-bs增高, 下调紧密连接相关蛋白的表达, 导致细胞连接减弱, 从而引起BTB结构发生可逆性紊乱. 此外, 本文还综述了成年小鼠实验性隐睾睾丸中总基因的表达变化, 成功克隆了几个生理功能显著, 与精子发生特异相关的新基因.