重症急性呼吸系统综合症的研究现状与展望

重症急性呼吸系统综合症(SARS)的突然出现和在全世界的迅速传播,促使全球科学家正以前所未有的方式团结起来,舍力破解SARS病原并寻求预防和治疗SARS的方法。综述了SARS出现以来的最新研究并展望相关研究前沿。     

肿瘤患者血清中SARS-CoV抗体阳性原因分析

探讨SARS冠状病毒(SARS—CoV)抗体在SARS病原学诊断中的特异性及其在肿瘤患血清中的假阳性问题。应用ELISA和荧光定量RT-PCR技术检测了111例正常对照和40例肿瘤患血清中SARS—CoV抗体的阳性率。在111例正常对照中,IgM抗体均阴性,IgG抗体的阳性率为3．6％(4／111);IgG抗体诊断SARS的特异性为96．4％,两种抗体同时阳性诊断SARS的特异性为100％。40例肿瘤患中,IgM抗体均阴性,IgG抗体阳性率17．5％(7／40)。经RT—PCR检测,上述肿瘤患阳性病例均为阴性。结果表明,同时测定SARS—CoV的两种抗体可降低诊断的假阳性率,提高诊断的特异性。用非纯化SARS—CoV抗原制备的ELISA试剂盒测定肿瘤患的SARS—CoV抗体,可能出现假阳性。在肿瘤患中出现假阳性的原因可能与包被的抗原有关。     

SARS冠状病毒在中国SARS流行中的分子进化

SARS最早出现在中国广东,紧接着SARS冠状病毒(SARS-Cov)被确定为致病原。找出SARS病毒基因组的变异与生物学之间的关系仍具有挑战性。最近,通过分子流行病学研究鉴别了传播中SARS-Cov的特征性变异序列。事实证明SARS-Cov是非人源的。     

特异性鸡卵黄免疫球蛋白（IgY）抗SARS-CoV作用的研究

制备了抗SARS CoVIgY ,探讨了该IgY中和SARS CoV的作用。灭活的SARS CoV免疫产蛋母鸡 ,水稀释法提取IgY。建立ELISA检测IgY结合SARS CoV的效价 ,采用病毒中和试验测定IgY的抗SARS CoV的作用。灭活SARS CoV免疫的母鸡可产生高效价的抗SARS CoVIgY ,该IgY中和SARS CoV的中和效价为 1∶5 12。因此 ,抗SARS CoVIgY可用于预防SARS CoV的感染及阻止SARS病毒的传播。     

SLE患者血清中SARS—CoV抗体阳性原因分析

为了探讨严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS—CoV)抗体测定在系统性红斑狼疮(SLE)患者中的假阳性问题,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量RT—PCR技术检测了66例正常对照和31例SLE患者血清中SARS—CoV抗体的阳性率。结果,66例正常对照中,IgM抗体均阴性,IgG抗体的阳性率为3．0％(2／66);31例SLE患者中,IgM抗体和IgG抗体阳性率分别为29％(9／31)和58．1％(18／31),IgG抗体和IgM抗体同时阳性为22．6％(7／31)。经RT—PCR检测,上述阳性病例均为阴性。结论：用非纯化抗原制备的ELISA试剂盒测定SLE患者的SARS—COV抗体,可能出现假阳性,两种抗体同时测定可降低诊断的假阳性率,提高诊断的特异性。在SLE患者中出现假阳性的原因可能与包被的抗原有关。     

惠普—岱嘉联合解决非典型肺炎影像诊断数字传输

非典型肺炎(“严重呼吸系统综合症”SARS)作为一种危害很大的新发疾病,目前对它的控制和预防难度都较大。世界卫生组织建议,医护人员在接诊可疑SARS病人时,必须严格采用预防空气传播、飞沫传播和接触传播的各种措施来隔离和护理SARS病人,以尽量减少传染给其他待诊病人和医务人员的可能性。 迄今为止,胸部常规X线影像检查是较为有效的确诊方式,但隔离区内通过人工传递的影像检查     

逆转录套式PCR检测粪便样本中的SARS冠状病毒

为了观察SARS冠状病毒在SARS患者粪便中的存在规律,建立了检测SARS冠状病毒RNA的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,并应用该方法检测了241份SARS患者粪便样本。部分PCR产物应用测序技术进行验证。RT-PCR的灵敏度为10^-10稀释度的病毒原液(原液为10^8TCID50／ml)。241份粪便样本的总体检出率为24．1％(58／241),其中发病后的前10d和20d的检出率均为50．0％。随着发病时间的延长,阳性检出率呈下降趋势。应用RT-PCR从粪便中检测SARS冠状病毒是可行的,在发病50d以后仍有17．0％左右的阳性检出率,提示SARS恢复期患者具有排毒的可能性,给后续的卫生防疫措施提供了一定的参考数据。     

冠状病毒是引起广州地区严重急性呼吸综合征(SARS)的主要病因

为查找引起广州地区流行的严重急性呼吸综合征(SARS)的病原体,采集患者漱口液及尸解标本,用组织培养法接种人胚肺细胞、MDCK细胞、Hep-2细胞和鸡胚分离病毒,用间接免疫荧光法检测患者恢复期血清lgG抗体,确定分离的病原是SARS的主要病因,再用套式RT—PCR、免疫电镜法鉴定病原。结果用人胚肺、Hep-2细胞在75份漱口液和3例尸解组织中分离出13株病原体,经套式RT—PCR扩增出110bp的特异产物,经测序证实为冠状病毒。制备冠状病毒的抗原,检测30份SARS病人恢复期血,其中26份血清lgG抗体阳性。同时检测30份普通发热病人血清作对照,IgG抗体全部阴性。由此证明,经组织培养分离到的病原体是引起SARS的致病因子,用分子生物学方法测序后证实为冠状病毒。     

SARS和生物恐怖威胁

SARS风波在近几个星期,正值“联军”在伊拉克针对萨达姆及其所谓的大规模杀伤性武器进行摧毁和屠杀时,一种SARS流行病就像分子集束炸弹一样,通过航空旅客传播到世界各地。SARS(重症急性呼吸综合症)是一种全新的传染性疾病,它通过人的亲密接触传播,并造成约4%的死亡,这种流行病起源于中国南部的广东省,在去年11月就已经发生。今年3月,一个参与SARS病人救治的64岁医学教授刘建林(音译)从广东到香港参加一个婚礼,在到达后不久病倒住院,他要求隔离治疗,但是没被采纳,医院也没有通知接触者,结果在同一旅馆的9个人染病并传播到新加坡、加拿…     

SARS冠状病毒病毒样颗粒疫苗的研究进展

2003年严重急性呼吸综合征(SARS)大流行之后,研究人员为防控SARS冠状病毒(SARS-CoV)的传播研制了多种不同形式的候选疫苗,大多是利用SARS-CoV表面的一种或多种结构蛋白制备的。SARS-CoV病毒样颗粒是具有较好的应用前景的一种候选疫苗,现将其制备方法及免疫原性做简要综述。     

严重急性呼吸综合征患者血清特异性抗体消涨规律的长期追踪研究

目的:追踪检测SARS冠状病毒(SARS-CoV)抗体在严重急性呼吸综合征(SARS)患者血清中的产生及其转归规律,为SARS诊断及防治提供依据。方法:对41例临床诊断SARS患者的血清进行了连续3年的检测,分别应用间接免疫荧光(IFA)检测患者血清特异性IgG抗体平均滴度,应用双抗原夹心ELISA法检测患者血清核衣壳蛋白(N蛋白)抗体的平均滴度,绘制消涨曲线,得出消涨规律。结果:应用IFA检测患者血清特异性IgG抗体与应用双抗原夹心ELISA法检测N蛋白抗体所得到的消涨规律不同,前者测得康复者血清IgG抗体滴度维持在较低水平,但后者检测35例康复者血清N蛋白抗体仍维持在较高水平。结论:SARS-CoV的N蛋白是免疫原性较强的抗原,感染3年后仍存在高滴度抗体;抗原夹心ELISA检测SARS-CoV N蛋白抗体的灵敏度较IFA方法高。     

中国科学家在野生蝙蝠体内发现“SARS病毒”

据《科学》杂志在线报道,在2002年至2003年冬季暴发的SARS曾造成全球700多人死亡,并且导致8000多人被传染。研究发现,在中国南方动物市场上贩卖的一种与黄鼠狼类似的动物——果子狸可能与SARS的最初发病有关。然而研究人员怀疑,果子狸仅仅是SARS传播中的一个环节,但并不是SARS病毒的真正宿主,这是由于在生活于养殖场或野外的果子狸体内并没有发现SARS病毒。为了找到SARS病毒的真正宿主,中国香港大学(HKU)的微生物学家袁国勇(Kwok-yung Yuen)和同事对猴子、啮齿动物以及生活在香港郊区的几种蝙蝠进行了采样分析。在中国蹄鼻蝠的…     

SARS病毒来源仍待解

中国农业大学动物医学院教授杨汉春介绍说 ,该课题组采用国际通用的基因检测方法 ,即反转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)技术 ,对 732份样本 (76份果子狸样本、6 5 6份其他野生动物和家养动物样本 )进行了冠状病毒和 SARS病毒基因检测。在所有样本中 ,均未检测到 SARS病毒。这表明 ,目前没有科学证据确认这些动物是 SARS病毒的来源。据了解 ,中国农业大学在动物病毒学领域具有多年经验。据该校校长陈章良介绍 ,为了较全面地采集到动物样本 ,该校副校长孙其信亲自到深圳、香港等疫区进行协调 ,找到了广州佛山第一例 SARS患者的家属 ,根…     

中草药对SARS病毒感染的抑制作用

[目的]严重急性呼吸综合征(Severe Acute Respiratory Syndrome,SARS)是一种有很高病死率的传染性非典型性肺炎。SARS的病原体是SARS轮状病毒(SARS-Cov)。我们建立了SARS-Cov S/HIV假型(SHP)病毒系统和细胞融合检测系统,以检测抑制SARS-Cov入侵情况。[资料和方法]将pCMV△R8·2,pHR’CMV-Luc和pCMV/R-SARS-S或pMDG质粒转染到293T细胞构建SHP和VSV-G病毒(VHP)系统。每个感染加5ng SHP或VHP病毒的p24。选取12种被证实有效治疗SARS病人的中药,并通过提取制备药物。利用细胞记数kit-8试剂盒进行药物的毒性分析…     

SARS病毒N蛋白、E蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定

本研究通过RT-PCR反应获得了SARS冠状病毒核衣壳蛋白(N)和膜蛋白(E)基因,将n基因和e基因克隆到大肠杆菌表达载体pGEX KG上,并在大肠杆菌中以可溶形式获得高效表达,表达产物经亲和层析纯化.重组蛋白N与SARS病毒抗体呈现特异性的反应,为进一步研究SARS病毒感染免疫应答机制和早期诊断奠定基础     

SARS病毒快速检测膜研制

建立一种快速检测严重急性呼吸综合症冠状病毒(SARS-CoV)的方法。从SARS冠状病毒刺突蛋白基因中扩增出羧基端片段,克隆并表达。用经Ni-NTA树脂纯化的表达蛋白作为抗原包被硝酸纤维素膜,捕获感染SARS病人血清中的抗体。抗原抗体通过渗滤在膜上反应,5min肉眼即可观察到结果。通过比较不同试剂用量条件下的结果确定检测抗原的最佳浓度。通过本产品检测已经过ELISA验证的50份血清样品证明两种检测结果无显著性差异(P>0.05)。与ELISA相比,该检测方法特异性、灵敏性几乎相当,但具有简单、快速、成本低廉等ELISA所无法比拟的优点,适合于初步诊断和流行病学调查。     

SARS病毒N蛋白、E蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定

本研究通过RT-PCR反应获得了SARS冠状病毒核衣壳蛋白(N)和膜蛋白(E)基因,将n基因和e基因克 隆到大肠杆菌表达载体pGEX-KG上,并在大肠杆菌中以可溶形式获得高效表达,表达产物经亲和层析纯化。重 组蛋白N与SARS病毒抗体呈现特异性的反应,为进一步研究SARS病毒感染免疫应答机制和早期诊断奠定基础     

基于BP神经网络的SARS传播预测

政府的控制措施作为影响SARS传播的因素,利用BP网络,对SARS的传播规律进行预测.以北京市的SARS数据来进行验证,结果显示,该方法准确率非常高.     

22例SARS感染愈后连续5年特异性IgG抗体随访分析

为分析SARS冠状病毒(SARS-CoV)IgG抗体在SARS感染康复者体内的持久性与变化,本研究自2004年3月开始,每年采集北京地区SARS感染康复者血清标本,采用商品化的冠状病毒(变异株)IgG抗体间接ELISA检测试剂盒,对其中22名SARS康复者中的SARS-CoVIgG抗体进行连续五年随访检测与分析。结果表明:在愈后第1年,所有血清SARS-IgG抗体皆为阳性。第2、3年处于平台期,滴度仍维持较高的水平。第4年抗体滴度有明显下降趋势。第5年IgG抗体基本转阴。研究发现SARS-CoVIgG抗体可维持3年以上,第4年之后明显下降。本研究为SARS感染诊断与防治、免疫应答及疫苗效力评价等提供了重要依据。     

血中检测SARS冠状病毒N蛋白在SARS实验室早期诊断中的作用

为明确严重急性呼吸综合症(SARS)冠状病毒N蛋白在SARS实验室早期诊断中的作用,通过微量中和试验及酶联免疫方法、间接免疫荧光法检测疑似病人恢复期血清(大于28天)中SARS-IgG抗体,确诊SARS患者。同时收集发病不同时期SARS及普通发热病人血清,利用酶联免疫方法检测SARS-CoVN蛋白,并与荧光定量PCR早期诊断方法相比较。共检测：广州地区2003年12月～2004．年1月新发4例确诊SARS患者不同时期的血液和咽漱液标本;恢复期血清SARS-CoV中和抗体阳性病人不同时期的血清46份;广州地区2003年1月～4月临床确诊SARS患者159例的血清和56例疑似患者血清;非SARS普通发热病人血清97份;正常人体检血清100份。结果：4例新发SARS患者的不同时期标本中,3例患者急性期血均检出N蛋白,优于常用的荧光定量PCR检测方法。46份SARS-CoV中和抗体阳性的血清标本,N蛋白检出率为100％。159例临床确诊病例中,发病早期5天以内SARS-CoVN蛋白的检出率为92．3％,随后呈现逐步下降的趋势,在发病第18天仍可检出。56例临床疑似患者发病早期也有23．2％检出率。而97例普通发热病人及100份正常人血清中均未能检测出SARS-CoVN蛋白。表明在血清中检测SARS冠状病毒N蛋白的方法敏感性和特异性都好,对SARS实验室早期诊断具有重要作用。