青霉的液体悬浮培养法——对初中观察青霉实验的改进

青霉的观察是初中植物教学必做的实验之一。现行教材的操作方法是:将长有青霉的桔子皮在载玻片上涂抹,效果不理想。大学实验中采用的是玻璃纸半透膜培养等方法,在中学受条件限制也不理想。针对上述问题,笔者通过实验,在方法上加以改进,获得较为满意的效果。具体方法如下: 首先,用桔子皮(或旧皮革)按常规方法培养,获得成熟的青霉孢子。然后,按下面步骤进行:①将马铃薯或苹果等合适材料切碎,研磨,加适量清水(笔者采用材料:水=1:10的比例),用脱脂棉过滤,除去较大的材料团块,避免影响观察效果。②在大试管中加少量制得的研磨液,用接种环刮取成熟的青霉孢子,接入大试管中,充分振荡,     

青霉浅谈

青霉(Penicillium)是世界分布最广的几类真菌之一,对人类非常重要。为配合中学《植物学》“菌类植物”一章的教学,使学生在掌握菌类植物的形态,结构,生活特点等有关知识的基础上,对与人类生活关系密切的菌类有所了解,本文着重对青霉的生活习性、形态、生活史和分类,以及与人类的关系作一叙述。(一)生活习性青霉通常在柑桔及其他水果上,冷藏的干酪及被它们的孢子污染的其他食物上均可找到,其分生孢子在土壤内、空气中及腐烂的物质     

电穿孔介导马尔尼菲青霉转化体系的建立和优化

目的 建立和优化马尔尼菲青霉电穿孔转化体系,为其基因功能研究提供良好平台.方法 直接使用马尔尼菲青霉缺陷株SPM4（pyrG-,niaD-）萌发孢子进行电穿孔转化,并通过改变孢子龄、孢子萌发时间、质粒浓度、电场强度等影响因素对体系进行优化.结果 适合SPM4电穿孔转化条件为：孢子龄为6d,孢子萌发时间为4h,电场强度为5 kV/cm.上述条件下分别使用1 μg环状或线性化质粒DNA转化SPM4,平均可得到21个和13个转化子.结论 马尔尼菲青霉电穿孔转化效率高,重复性好,针对SPM4萌发孢子,环状质粒较线性化质粒电穿孔转化效率高.     

青霉属的三个新种

本文报导青霉属的三个新种,它们不同于此属已发表的诸种.异型青霉(Penicillium heteromorphum Kong et Qi),根据帚状枝的结构和分生孢子的某些特征,近于两型孢青霉(Penicillium dimorphosporum Swart),但此种在查氏琼脂上生长很稀疏,并有两种大小的分生孢子,大分生孢子直径可达10 pm,壁光滑,在观察菌落期间,有时大分生孢子落在基质上,很快萌发生长成简单的分生孢子结构,这些特征易于与后者区分.结节青霉(Penicillium nodulum Kong et Qi)在某些方面类似纠缠青霉(Penicilliumimplicatum Biourge),此新种的菌落特征,柄顶端膨大似顶囊,呈结节状膨大的营养菌丝等特征而不同于纠缠青霉.神农架青霉(Penicillium shennong jianum Kong et Qi)和毡毛青霉(Penicillium velutinum van Heyma)相近,而新种在多种培养基上生长都局限,菌落面呈带褐的橄榄色,分生孢子壁光滑等特征可与毡毛青霉区分开来.     

三种来自土壤的有应用前景的拟青霉

从我国新疆和云南土壤中分离到两个拟青霉新记录种,念珠藻状拟青霉(Paecilomyces nostocoides)和雪白拟青霉(P.niveus)。它们的鉴别特征是,前者像念珠藻一样,在同一分生孢子链中具有大小差别十分明显的两类孢子。后者耐高温,菌落白色并有光滑的厚垣孢子。基于rDNA部分序列测序提供的分子证据,将膨大拟青霉大孢变种(P.inflatusvar.major)重新组合为大孢拟青霉(P.major)。     

马尔尼菲青霉凸玻片小培养方法

马尔尼菲青霉是免疫受损人群常见的一种机会性感染真菌,在我国卫生部颁发的真菌危险度分级中属于2类菌,在缺少防护设备的一般真菌实验室是限制操作的[1]。本实验室使用凸玻片小培养观察马尔尼菲青霉生长形态,该方法不仅操作简单、方便、省时,还保证实验人员的安全,也避免实验室污染。现介绍如下。     

蜻蜓拟青霉多型性的扫描电镜观察及RAPD分析

通过电镜扫描观察,清楚地显示了蜻蜓拟青霉（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ ｏｄｏｎａｔａｅ Ｌｉｕ,Ｌｉａｎｇ ＆ Ｌｉｕ）的两种类型产孢结构,即拟青霉型椭圆形分生孢子的链状排列和枝顶孢霉型柱状分生孢子头状排列,同时将椭圆形分生孢子和柱状分生孢子进行单孢分离,对各单孢株作了培养特征观察,形态学观察和ＤＮＡ随机片段扩增分析。结果表明,在形态学上两种孢子单孢子株之间的培养特征和显微特征均无明显差异,同时具有     

分离自赤豆的青霉新种

本文报道青霉属一个新种,分离自赤豆,特点是分子孢子无色,命名为无色青霉模式和自模式的活培养物都保存在中国科学院微生物研究所。     

蜻蜒拟青霉多型性的扫描电镜观察及RAPD分析

通过电镜扫描观察,清楚地显示了靖蜒拟青霉（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ　ｏｄｏｎａｔａｅ　Ｌｉｕ,Ｌｉａｎｇ＆Ｌｉｕ）的两种类型产孢结构,即拟青霉型椭圆形分生抱子的链状排列和校顶孢霉型柱状分生抱子头状排列。同时将椭圆形分生孢子和柱状分生孢子进行单孢分离,对各单孢株作了培养特征观察,形态学观察和ＤＮＡ随机片段扩增分析。结果表明,在形态学上两种孢子单孢子株之间的培养特征和显微特征均无明显差异,同时具有相同的ＤＮＡ随机扩增片段电泳谱。     

紫外线照射对玫烟色拟青霉产孢子能力的影响

目的:探讨紫外线照射对玫烟色拟青霉产孢子能力的影响.方法:利用20W紫外 灯对玫烟色拟青霉的原生质体悬浮液进行了不同照射时间、对孢子悬浮液进行了不同照射距 离和时间组合的紫外线照射处理.结果:紫外灯下30cm照射原生质体90 s及紫外灯下20cm照射孢子20min两个处理中,菌落直径最大菌株的菌丝生长速度显著高于出 发菌株,产孢量也分别是出发菌株的1.4及1.6倍.结论:适宜的紫外线照射处理可以提高玫烟色拟青霉的产孢子能力.     

青霉TS67菌株活性产物的抗真菌作用

本文初步探讨了青霉TS67(Penicillum sp.)的发酵活性产物对植物病原真菌的抑制作用机理,实验结果表明,用其50%的发酵液分别处理玉蜀黍平脐蠕孢菌(Bipolarismaydis)和大豆尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)120 h后,菌丝生长的抑制率分别为77.78%和70.30%,对孢子产生的抑制率分别达58.8%和73.5%:同时发现用50%发酵液处理病原茵的无性繁殖孢子12 h后,孢子萌发抑制率分别达78.3%和62.O%.经显微镜观察抗菌活性物质处理后的菌丝体,发现菌丝体表面瘤状畸形、菌丝生长顶端不规则膨胀、内部发生原生质浓缩,初步推测青霉TS67主要通过影响植物病原真菌的细胞壁而实现抑制作用.     

拟青霉属一嗜热新种,短链拟青霉Paecilomyces curticatenatus

从福建福州荔枝根际土样中分离到一嗜热单瓶梗拟青霉新种,短链拟青霉。其主要鉴别特征为:在查氏培养基上,35℃,14天,菌落边缘浅波浪状,灰褐色;分生孢子梗缺乏或简单,瓶梗直接单生于气生菌丝上,偶而在简单的分生孢子梗上着生有由2~3个瓶梗组成的轮生体;分生孢子微粗糙,大多近球形至椭圆形,少数梭形;分生孢子链短,常由3~6个孢子组成。     

拟青霉属一嗜热新种,短链拟青霉Paecilomyces curticatenatus

从福建福州荔枝根际土样中分离到一嗜热单瓶梗拟青霉新种,短链拟青霉。其主要鉴别特征为:在查氏培养基上,35℃,14天,菌落边缘浅波浪状,灰褐色;分生孢子梗缺乏或简单,瓶梗直接单生于气生菌丝上,偶而在简单的分生孢子梗上着生有由2~3个瓶梗组成的轮生体;分生孢子微粗糙,大多近球形至椭圆形,少数梭形;分生孢子链短,常由3~6个孢子组成。     

拟青霉属一嗜热新种,短链拟青霉Paecilomyces curticatenatus

从福建福州荔枝根际土样中分离到一嗜热单瓶梗拟青霉新种,短链拟青霉。其主要鉴别特征为:在查氏培养基上,35℃,14天,菌落边缘浅波浪状,灰褐色;分生孢子梗缺乏或简单,瓶梗直接单生于气生菌丝上,偶而在简单的分生孢子梗上着生有由2~3个瓶梗组成的轮生体;分生孢子微粗糙,大多近球形至椭圆形,少数梭形;分生孢子链短,常由3~6个孢子组成。     

马尔尼菲青霉基于pkuB基因缺失的高效基因打靶系统构建

马尔尼菲青霉是温度依赖双相性条件性致病真菌,可感染免疫缺陷人群,区域流行于东南亚和我国南方。马尔尼菲青霉已成为研究真菌双相形态转换和病原-宿主相互作用分子机制的模式系统。功能基因组学研究为深入探讨马尔尼菲青霉双相转换和致病分子机制提供了线索,大量的候选基因功能需要高通量的基因修饰方法验证。在许多真菌中已建立基于阻断DNA非同源重组修复途径提高基因打靶效率的实验研究模型。本文报道在马尔尼菲青霉中通过缺失马尔尼菲青霉非同源重组修复途径的关键组分PKUB同源基因pkuB构建了一个高效基因打靶系统。结果表明,以pkuB基因缺失菌株(△pkuB)为出发菌株能降低外源DNA片段的非同源末端连接重组的概率而显著提高基因打靶效率,pkuB基因缺失不影响菌落形态和双相转换能力。高效基因打靶分子遗传实验模型的建立为大规模进行马尔尼菲青霉基因功能研究提供了有力的工具。     

玫烟色拟青霉北京变种

1980年,自北京农家温室内,温室白粉虱(Trialeurodes vaporartorum)上分离到玫烟色拟青霉(Paecilomyces fumosoroseus)的若干菌株。用13号菌株的典型培养与本菌的原种做比较,发现在形态上与原种相似,但菌落色泽、生长速度及形成孢梗束的能力不同。故定名为玫烟色拟青霉北京变种(P.fumosoroseus var.beijingensis Fang et Q.T.Chen n.var.)。     

蛹虫草(Cordycepsmilitaris)无性型的多型现象

在萨氏琼脂和PDA上,蛹虫草Cordycepsmilitaris（Vuill）Fr.无性型,蛹草拟青霉Paecilomycesmilitaris(Kob）Br.＆Sm．的一些单孢子株可自发产生突变,基于多型现象及其它形态特征可分三种类型：（1）具野生型菌株特征;产孢结构拟青霉型（Paecilomyces－type）,稳定,菌落通常不自发产生角变,大多数单孢子株属此类群。（2）属此类群的单孢子株,在PDA上可形成亮褐色至橙黄色的角变,它们典型的产孢结构为瓶梗轮生,分生孢子常聚集成头状的轮枝孢型（Verticillium－type）。在查氏培养基上则相反,拟青霉型的产孢结构占优势。单孢子株Cm-71是这一类群的代表。（3）单孢子株Cm－42是在所观察单孢子株中形态特征独特的菌株。在PDA上菌丝生长纤细,蛛网状,产孢结构轮枝孢型。蛹草拟青霉对氯酸钾（KClO3）不敏感,在浓度为6％（W／V）的KMM培养基上,23～24℃14天菌落的直径仅1～2cm,无气生菌丝生长。各单孢子株形成的不利用硝酸盐突变株（nit突变株）的途径和形态特征,也可分成类似于粉被虫草CordycepspruinosaPeteh不利用硝酸盐突变株（nit突变株）的三种类型。     

蛹虫草(Cordyceps militaris)无性型的多型现象*

在萨氏琼脂和PDA上,蛹虫草Cordycepsmilitaris（Vuill）Fr.无性型,蛹草拟青霉Paecilomycesmilitaris(Kob）Br.＆Sm．的一些单孢子株可自发产生突变,基于多型现象及其它形态特征可分三种类型：（1）具野生型菌株特征;产孢结构拟青霉型（Paecilomyces－type）,稳定,菌落通常不自发产生角变,大多数单孢子株属此类群。（2）属此类群的单孢子株,在PDA上可形成亮褐色至橙黄色的角变,它们典型的产孢结构为瓶梗轮生,分生孢子常聚集成头状的轮枝孢型（Verticillium－type）。在查氏培养基上则相反,拟青霉型的产孢结构占优势。单孢子株Cm-71是这一类群的代表。（3）单孢子株Cm－42是在所观察单孢子株中形态特征独特的菌株。在PDA上菌丝生长纤细,蛛网状,产孢结构轮枝孢型。蛹草拟青霉对氯酸钾（KClO3）不敏感,在浓度为6％（W／V）的KMM培养基上,23～24℃14天菌落的直径仅1～2cm,无气生菌丝生长。各单孢子株形成的不利用硝酸盐突变株（nit突变株）的途径和形态特征,也可分成类似于粉被虫草CordycepspruinosaPeteh不利用硝酸盐突变株（nit突变株）的三种类型。     

中国拟青霉新种及其与虫草的关系

从虫草[Cordyceps sinenisis(Berk.),Sacc.]上分离到中国拟青霉新种(Paecilomyces isnenisisp.nov.),对它进行了培养和形态学研究。中国拟青霉与蛹草[cordyceps militaris(L·)Liak]的无性阶段形态非常类似,但在分生孢子形态,分生孢子和瓶梗的量度上有所不同,且两者的寄主及生境不同,故定为新种。不仅可从长子座的殭虫获得其纯培养物,也可从不长子座而长孢梗束的虫草纯化培养获得。纯培养物的形态和天然虫体的孢梗束完全相同,故认为它可能是虫草的无性阶段。     

细脚拟青霉田间分离菌株间的异核现象

本文报道细脚拟青霉(paecilomyces tenuipes)不同田间分离菌株单孢子后代间的异核现象。用来自荣园、菜地、水稻田三种生境的四个菌株(803、2801、1401和3101)的单孢子培养后代,在加有酵母膏和麦芽糖的改良萨氏培养基上进行配接实验,仅在803与1401两菌株间能形成异核体,其频率为13.5%。在配接实验中两亲和菌落交界处长出白色致密的菌丝簇组成的实线可推测为异核体。从来自菌丝簇组线的每个单菌丝尖端培养物中分离出30个以上的单孢子,井分别移接到 PDA 平板上。将来源于单孢子的菌落与两亲本菌落进行比较,有三个单菌丝尖端培养物(C_3、B_3、F_3)重现了两亲本类型或出现了新的菌落类型,从而异核现象得到证实。