石杉碱甲的研究进展

本文综述了1984年以来对石杉碱甲的药理作用、构效关系、合成及其天然来源等方面的研究进展;详细罗列了巳确认的石杉碱甲天然来源,以及从中分离出的其它生物碱;探讨了石碱杉甲的结构特征与其抑制乙酰胆碱酯酶活性能力之间的关系。     

石杉碱甲对氧自由基的影响

目的:研究石杉碱甲对氧自由基的影响,探讨石杉碱甲抗老年性痴呆的机制.方法:按50 mg/kg·d给大鼠皮下注射D-半乳糖6周后,按石杉碱甲0.1mg/kg·d、0.2mg/kg·d给药2周,检测血清和脑组织中SOD活力和MDA含量.结果:石杉碱甲能明显提高大鼠血清和脑组织中SOD的活力,同时降低MDA的含量.结论:加快氧自由基的清除、减少自由基损伤是石杉碱甲抗老年性痴呆的机制之一.     

从千层塔中微波协助提取石杉碱甲和石杉碱乙

首先从 8种溶剂中筛选出硫酸作为微波协助提取的浸提溶剂 ,然后用正交试验确立了千层塔生物碱的最佳提取条件。以石杉碱甲和石杉碱乙回收率为指标 ,考察了溶剂倍数、溶剂浓度、微波处理时间等因素。结果表明 ,在室温下微波协助提取的最优条件为 :酸浓度 0.8% (v/v) ,液固比例 2 5∶1 ,微波处理时间 90s。 3次重复实验所得石杉碱甲和石杉碱乙回收率分别是 93.7%和 93.9% ,相对标准偏差分别为 1.79%和 1.5 6% (n =3)。与传统的回流提取工艺相比 ,过程时间从 2h缩短为 90s,回收率提高了 1 0 %以上。     

石杉碱甲提取工艺研究

以蛇足石杉为原料,采用生物碱分离的传统方法,通过盐酸浸提,氯仿萃取来制取、纯化石杉碱甲,选出最佳、最经济的生产工艺配方是:料液比为1:10,浸泡10 h,酸解3次,每次为45 min,酸解pH值为3.0,酸解温度为55℃,碱化pH为9.0;纯化过程中,用相当于石杉碱甲溶液体积15%的活性炭在pH为3.0条件下除杂,石杉碱甲的得率大于79.4%。     

石杉碱庚的结构鉴定

从石杉（Ｈｕｐｅｒｚｉａｓｅｒｒａｔａ（Ｔｈｕｎｂ．）Ｔｒｅｖ．）的正丁醇提取部分分离得到一个新的水溶性石杉类生物碱,通过ＩＲ、ＭＳ、１ＤＮＭＲ和２ＤＮＭＲ确定了其化学结构,命名为石杉碱庚（ｈｕｐｅｒｚｉｎｅＧ）。     

千层塔中产石杉碱甲内生真菌的研究

从千层塔中分离产石杉碱甲内生真菌。采用平板分离法分离千层塔内生真菌,通过抑制乙酰胆碱酯酶活性和抗氧化活性筛选,结合薄层层析和HPLC测定活性菌株中的石杉碱甲含量,通过形态学ITS-rDNA序列分析鉴定内生真菌。共分离得到94株内生真菌,筛选到S29、L44、S94共3株乙酰胆碱酯酶抑制活性和清除DPPH·自由基活性都在50%以上,筛选到一株S29能产石杉碱甲的菌株。摇瓶发酵产量为每克干菌体的石杉碱甲含量为50.64μg。形态学与ITS-rDNA序列分析法鉴定该内生真菌为Podospora sp.属。药用植物千层塔体内Podospora sp.属的内生真菌可产石杉碱甲。     

武夷山脉石杉科植物石杉碱甲含量的研究

石杉植物因所含Hup A为高效、可逆、高选择性的中枢性乙酰胆碱酯酶抑制剂而受关注。实地采集标本并用改进的HPLC法测定了武夷山脉4种石杉科植物及不同居群间的石杉碱甲(Hup A)含量。结果显示石杉碱甲在长柄石杉、四川石杉、有柄马尾杉和华南马尾杉中均有分布,其中以有柄马尾杉中含量最高,达0.1510%;含量最低的是四川石杉,为0.016%。该地区优势种长柄石杉（千层塔）11个居群的石杉碱甲含量测定显示武平县梁野山和三元区中村乡两个居群含量较高,分别为0.0636%和0.0519%。对石松科部分种进行石杉碱甲测定,认为藤石松等不含石杉碱甲。结果表明武夷山脉地区拥有优良的石杉碱甲植物资源。     

从蛇足石杉中超声提取石杉碱甲和石杉碱乙

用正交试验确立了超声提取蛇足石杉生物碱的最佳条件。以石杉碱甲和石杉碱乙回收率为指标,考察了溶剂倍数、溶剂浓度、超声时间、超声功率等因素的影响。结果表明,在室温下超声提取的最优条件为：酸浓度O．8％(v／v),液固比例20：1,超声功率600W,超声15min。三次重复实验所得石杉碱甲和石杉碱乙回收率分别是9r7．3％和93．5％,相对标准偏差分别为1．31％和1．40％(n=3)。与传统的回流提取工艺相比,过程时间从2h缩短为15min,回收率提高了10％以上。     

千层塔内生真菌SHB发酵产石杉碱甲条件的研究

为提高千层塔产黄青霉属内生真菌SHB液体发酵产石杉碱甲的产量,通过单因子和正交试验研究了真菌SHB液体发酵的条件。结果表明,千层塔内生真菌SHB液体发酵产石杉碱甲的适宜条件：温度为28℃,起始pH为6．4,接种量为12％,种龄为48h,转速为160r／min,发酵时间为8d。在此条件下,石杉碱甲的产量可达4．761μg／mL。     

产石杉碱甲内生真菌的复壮及产量提高研究

【目的】千层塔中分离得到的内生真菌胶孢炭疽Cg01可合成石杉碱甲(huperzine A, HupA),但产量较低,且随着继代的增加,产量下降,菌株退化严重。研究表明,表观遗传修饰与次生代谢产物的合成密切相关。本研究旨在提高HupA的产量,改善退化菌株的品质,并从表观遗传修饰的角度探讨次生代谢产物合成的机理。【方法】通过改变培养基碳源、添加生物诱导子,根据胶孢炭疽Cg01的菌落形态、菌丝生长速度、生物量及HupA产量等筛选复壮培养基;添加不同浓度的组蛋白甲基化转移酶抑制剂,检测HupA的产量,筛选提高HupA产量的小分子抑制剂;检测相关表观遗传修饰基因的表达。【结果】添加同源刺激物千层塔茎叶汁,对胶孢炭疽Cg01的菌落形态、生长速度、形态特征及生物量无显著影响,但可提高HupA的产量,传代至第5代时为对照组的1.67倍(125.7 μg/L)。添加千层塔茎叶汁能显著降低组蛋白甲基化转移酶Cg12377、组蛋白去乙酰化酶Cg15620、DNA甲基化转移酶Cg02440基因的表达,提高组蛋白去乙酰化酶Cg02312基因的表达。UNC0224对内生真菌胶孢炭疽菌的HupA产量无显著影响;2‒15 μmol/L BRD4770能显著提高HupA的产量(169.57‒152.10 μg/L)。BRD4770组处理后,相关表观遗传基因Cg12377、Cg02440、Cg02312和Cg15620的表达量都显著下降。【结论】添加千层塔茎叶汁培养胶孢炭疽Cg01可维持其合成次生代谢产物的能力;添加组蛋白甲基化转移酶抑制剂BRD4770可提高HupA的产量。本研究为解决内生真菌大规模生产过程中的菌株退化问题提供了参考,并为组蛋白甲基化影响次生代谢产物的合成提供了依据。     

Research Progress on the Structural Modification of Magnolol and Honokiol and the Biological Activities of Their Derivatives

Magnolol and Honokiol are the primary active components that have been identified and extracted from Magnolia officinalis, and several investigations have demonstrated that they have significant pharmacological effects. Despite their therapeutic benefits for a wide range of illnesses, research on and the implementation of these compounds have been hindered by their poor water solubility and low bioavailability. Researchers are continually using chemical methods to alter their structures to make them more effective in treating and preventing diseases. Researchers are also continuously developing derivative drugs with high efficacy and few adverse effects. This article summarizes and analyzes derivatives with significant biological activities reported in recent research obtained by structural modification. The modification sites have mainly focused on the phenolic hydroxy groups, benzene rings, and diene bonds. Changes to the allyl bisphenol structure will result in unexpected benefits, including high activity, low toxicity, and good bioavailability. Furthermore, alongside earlier experimental research in our laboratory, the structure-activity relationships of magnolol and honokiol were preliminarily summarized, providing experimental evidence for improving their development and utilization.     

Structural Identification of Huperzine G

A new lycopodium alkaloid, huperzine G was isolated from the n-butanol fraction of Huperzia serrata (Thunb.) Trev. The structure of this alkaloid was determined through IR, MS, ID-and 2D-NMR spectral analyses.     

水飞蓟宾及其类似物的化学修饰研究进展

以天然黄酮类化合物为活性先导物,研究其化学结构与生物活性的关系,进而进行化学修饰研究,是目前创新药物的一条重要思路。药用植物水飞蓟用来治疗肝胆疾病已有2000多年的历史,水飞蓟宾作为水飞蓟素的主要活性成分具有保肝、抗炎和抗癌等活性而备受人们关注,但由于水飞蓟宾极低的溶解性极大地限制了其生物利用度。为此,国内外学者通过化学和物理等方法对其进行修饰和改造,并取得了一定的成果。本文就近10年来水飞蓟宾及其类似物的化学修饰研究进行综述。     

利奈唑胺C 环结构改造研究进展

首个唑烷酮类抗菌药利奈唑胺自2000 年上市以来,其耐药性问题日趋严重,开发新型唑烷酮类抗菌药物成为研究热点之一。综述了近年来对利奈唑胺C 环进行的结构改造及相关衍生物的研究进展,旨在为唑烷酮类抗菌药的深入研发提供参考。     

结构修饰提高酶稳定性、活性

酶因其特异性和可持续性而成为广泛应用的绿色催化剂，其稳定性和催化活性是决定酶适用性的关键因素。为满足实际应用需求，通过蛋白质结构修饰赋予其所需的催化特性是当前的研究热点。提高热稳定性的策略有：引入非共价/共价相互作用（疏水相互作用、氢键、盐桥、芳香环相互作用、二硫键）、环截短、C端和N端工程，及增加脯氨酸/减少甘氨酸的数目等；获得具有高效性和多样性的生物催化剂的策略有：降低空间位阻、拓宽催化口袋、增加底物亲和力及调节活性位点灵活性等。然而，在稳定性或催化功能改造的过程中，新突变的引入会削弱其他功能，致使进化过程中稳定性和催化活性相互制约。因此，采用基于理性计算优选突变热点、基于多重蛋白质稳定性或活性改造策略的共进化，以及基于高度稳定的蛋白质骨架创造或/和优化蛋白质功能等多种策略克服酶稳定性-活性之间的权衡。本综述重点阐述了结构修饰方法在提高酶稳定性或/和催化活性方面的应用，并展望了该领域的未来发展前景。     

生物转化对天然药物进行结构修饰的研究进展

利用生物转化对天然药物进行结构修饰,是筛选活性化合物的有效途径之一。本文根据生物体系中酶的多样性和特异性以及生物转化具有副产物少、选择性和专一性强等特点,系统性的综述了近几年来在天然药物资源开发利用研究中生物转化进行结构修饰的常见反应类型:羟基化、糖基化、水解和环氧化反应等,并简述了生物转化法在开发具有活性的新药物和改变天然药物活性如改变细胞毒性、增强抗耐药性、减小毒副作用或提高生物利用率等方面的实际应用。     

Biotransformation of Huperzine B by a Fungal Endophyte of Huperzia serrata

The biotransformation of huperzine B (hupB), one of the characteristic bioactive constituents of the medicinal plant Huperzia serrata, by a fungal endophyte of the host plant was studied. One new compound, 8α,15α‐epoxyhuperzine B ( 1 ), along with two known oxygenated hupB analogs, 16‐hydroxyhuperzine B ( 2 ) and carinatumin B ( 3 ), was isolated and identified. The structures of all the isolates were deduced by spectroscopic methods including NMR, MS, IR, and UV spectra. The known compounds 2 and 3 were obtained from a microbial source for the first time. To the best of our knowledge, it is the first report on the microbial transformation of hupB and would facilitate further structural modification of hupB by chemo‐enzymatic method. In the LPS‐induced neuro‐inflammation injury assay, 8α,15α‐epoxyhuperzine B ( 1 ) exhibited moderate neuroprotective activity by increasing the viability of U251 cell lines with an EC₅₀ of 40.1 nm .     

蛇足石杉产石杉碱甲内生真菌的分离鉴定

从9月份采集的野生药用植物蛇足石杉(Huperzia serrata)的茎、叶中分离纯化得到15株内生真菌,将上述内生真菌进行液体培养后,通过薄层层析法(TLC)和高效液相法(HPLC)对其代谢产物进行检测,结果表明菌株WX13产石杉碱甲(Huperzine A,HupA)。运用形态和培养特性观察,初步确定菌株WX13属于镰刀菌属(Fu-sarium sp.)。     

柠檬苦素类似物的生物活性和 构效关系研究进展

柠檬苦素类似物;生物活性;构效关系;结构修饰