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抑制剂对有机相酶促己酸乙酯合成中固定化脂肪酶影响 总被引：3，自引：0，他引：3
稳定的催化活性和选择性的调节与控制已成为研究有机相酶促反应机制和应用的重要内容。由于选择和优化反应条件的方法具有较大局限性．目前有机介质中酶催化选择性和稳定性的调节与控制的研究除了常用的固定化手段外,更关注通过改变酶分子自身的一些方法上。如蛋白质工程、酶的化学修饰和非共价修饰〔1.2〕。相比之下,其中非共价修饰具有方便、实用的特点。酶的修饰剂大多也是酶的抑制剂。抑制剂已用来研究脂肪酶的结构与代谢特征〔3〕。Russel,Guo等通过其改变酶的构象和界面特征来调节和控制酶稳定的特异性〔4.5〕。我们在对微生物脂肪酶正庚烷中合成短链芳香酯研究基础上〔6.7〕。本文报道用具有两亲特性的表面活性剂、胆汁盐和金属离子这些脂肪酶的抑制剂对庚烷中脂肪酶酶促己酸乙酯酯化反应的影响,以促进酶活性的调节和控制的研究和应用。 相似文献
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漆酶在磁性壳聚糖微球上的固定及其酶学性质研究 总被引：5，自引：0，他引：5
以磁性壳聚糖微球为载体,戊二醛为交联剂,共价结合制备固定化漆酶。探讨了漆酶固定化的影响因素,并对固定化漆酶的性质进行了研究。确定漆酶固定化适宜条件为：50 mg磁性壳聚糖微球,加入10mL 0.8mg/mL 漆酶磷酸盐缓冲液（0.1mol/L,pH 7.0）,在4℃固定2h。固定化酶最适pH为3.0, 最适温度分别为10℃和55℃,均比游离酶降低5℃。在pH 3.0,温度37℃时,固定化酶对ABTS的表观米氏常数为171.1μmol/L。与游离酶相比,该固定化漆酶热稳定性明显提高,并具有良好的操作和存储稳定性。 相似文献
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以对苯二甲酰氯(PPTC)和己二胺(HD)的缩聚物作为固定云芝漆酶的载体,研究了物理吸附和化学偶联两种方法对漆酶固定量、固酶比活力、固定漆酶的热稳定性、重复使用性的影响。此外还进一步研究了不同固定策略对固定漆酶动力学参数的影响。实验结果表明:无论采用物理吸附法或是化学偶联法都具有较高的固酶量和固酶比活力。两种方法的固酶量和固定漆酶的比活力分别为:物理吸附法-126 mg/g,1.65 U/mg;化学偶联法-92 mg/g,0.65 U/mg。通过比较两种不同的固酶策略对固酶热稳定性、重复使用性及酶动力学参数的影响后发现:化学偶联法固定漆酶的热稳定性及重复使用性能均优于物理吸附法,但此种方法固酶的表观催化氧化反应速率常数kcat低于物理吸附法固定漆酶的kcat。综合比较,以对苯二甲酰氯与己二胺缩聚物为固酶基元采用化学偶联法固定漆酶应为固定游离漆酶的一种较好的可行方法。 相似文献
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《生物技术通报》1988,(3)
881269用侧耳菌的一些菌株分解亚麻皮的比较研究〔英〕/Sharma,H.S。5.了Appl.Mierobiol.Bioteehnol一1987,25(6)一542一5d6〔译自CBA,2987,(6),2699] 供试验的四种侧耳菌(尸leurot“s)中,杂种菌株A分解亚麻皮较其它三株菌快,而且比另外三株产生更多的半乳糖醛酸酶、果胶分解酶,纤维素酶和漆酶。漆酶和多糖分解酶的最大活性与重量明显下降、木质素和半纤维素产率降低相关。将亚麻皮的粗提液加到未提取的皮上,增加了所有四株菌原基的产生,但不增加亚麻皮的分解。在亚麻粗提液中测定了类黄酮型化合物,这些化合物可导致蘑菇原基的产生。(田… 相似文献
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“构象记忆”的辣根过氧化物酶的微水相共价固定化 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究利用酶在微水溶剂中的"构象记忆"特性,以壳聚糖微球为载体,以辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)为研究对象,将HRP于活性构象下冻干"固定"后,在二氧六环:水=99:1(V/V)微水介质中与载体进行共价交联,同时与传统水介质中共价交联固定化的HRP进行比较。结果发现,两种介质中固定化HRP的最适温度都提高到60°C,最适pH均为6.5,而微水相中固定的酶活力损失较低,酶活比传统水相中固定的酶高6倍以上;70°C保温30min后,微水相中固定的酶保留75.42%的活力,而水相中固定的HRP仅存15.4%的活力;微水相中固定的HRP具有更好的操作稳定性和热稳定性,60°C下连续操作5次之后,微水相固定的HRP保留77.69%的酶活,而水相固定的HRP仅存16.67%的酶活;微水相中固定的HRP在苯酚的去除中表现得更具优势;微水相中共价交联制备的CS-HRP-SWCNTs/Au酶修饰电极对H2O2的响应信号比水相中共价固定的酶电极强2.5倍,灵敏度更高。本研究表明利用酶的"构象记忆"在微水介质中进行共价交联是固定化酶的一种可行方法,所制备的固定化酶具有更优良的性质。 相似文献
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《生物技术通报》1992,(4)
/Perez一Mateos,M.…/J.Sei.Food.Ag-r ie一2991,55(2)一229~240〔译自DBA,1991,10(18),91一10559〕 研究了通风时间、缓冲类型、酶一土比率和酶浓度对固定于黑色石灰土胶体粒子上的碱性磷酸酶(AP)固定化的影响。典型的情况下,土壤(109干重)与Zoml AP溶液(225声g/ml)混合,40℃下振摇5小时。离心后洗涤固定酶小粒以除去未固定的AP。固定与溶解AP的Krn值分别为6.72和1.76mM。土壤和固定化AP的最适pH为10.2~11。灭菌或自然土壤样品固定的AP不如本地土壤酶稳定。于22℃下的土壤中贮存50夭后,65%的本地AP和25%的无菌土固定酶保持活性… 相似文献
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真菌漆酶在绿色化学中的研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
漆酶主要是由真菌分泌的一类胞外多铜氧化酶,因其具备多功能特性而被广泛地应用于绿色环境化学。漆酶能够以分子氧作为电子接受体,催化氧化多种酚类和非酚类底物形成自由基中间体,随后这些自由基中间体涉及到氧化耦合或键断裂,最终导致底物发生氧化、分解或聚合反应。目前,主要采用包埋、吸附、共价绑定和交联结合等方法制备固定化漆酶,以增强漆酶在实际环境中的催化活性、稳定性和循环再利用功效。概述了真菌漆酶的分子组成、结构特性及其催化氧化不同底物的作用机理,系统地比较了漆酶的固定化技术及其利弊,重点阐述了漆酶在有机污染物去除、合成染料脱色、造纸废水、食品加工、生物传感器和环境质量指示器等领域的研究进展,旨在为拓展和开发真菌漆酶在绿色环境化学中的多功能应用提供新的理论依据和指导思想。 相似文献
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《生物技术通报》1989,(3)
吕30774利用细菌产生酶学活性的真核过氧化物歧化酶的方法〔专,英叮H盯tman,R.…/US Patent US 4742004.Pub.阅.05.88.APPI.US 644105,filed 27.08.84〔译自CBA:1988,(8),3234〕 在含锌及含铜(非生一资抑制量2 ppm以上)的生产培养基中,通过培养转化细菌可以产生人体铜锌过氧化物歧化酶的酶活多肤类似物。(吴南君)890775凝乳酶组分的分离方法〔专,英〕/Birsehbaeh,P./US Patent US 4745063.Pub。17.05.88。field 27.08.87.〔译‘自CBA,1988,(8),3238〕 通过把混合物的pH和电导率分别降低到3.8~5.2和2 X 10“一19 x 20”微欧姆及… 相似文献
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RNA原位杂交技术及其在植物基因表达研究中的应用 总被引：9，自引：0，他引：9
原位杂交 ( In situ Hybridization)是一种在细胞水平上研究基因表达调控的最直接有效的分子生物学技术。这一技术最初应用于动物染色体上的基因物理定位 〔1〕和特定 m RNA在组织中的空间定位〔2〕,后来又作为诊断工具检测感染病毒的细胞 〔3〕。到 80年代后期 ,原位杂交技术开始应用于植物基因表达调控的研究 〔4～ 6〕。植物基因的时空表达研究是探讨植物生长发育机制的重要手段。由于 RNA原位杂交技术能够精确确定基因表达的时空分布 ,而得到了越来越广泛的应用 ;从营养器官生长发育〔7～ 9〕、生殖器官生长发育〔10～ 13〕、自交不… 相似文献
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《生物技术通报》1985,(6)
852421一个编码核酮糖一1,5一二磷酸狡化酶小亚基的豌豆核基因组织特异性和光调节表达〔英〕/Coruzzi,G.…了EMBOJ一1984,3(8)一1671一1679〔译自DBA,1984,3(20),84一09731〕 研究了在豌豆不同组织中编码核酮糖-1,5一二磷酸梭化酶小亚基(rbcs)的多基因族的一个成员表达。豌豆(品种Progressg号)基因组DNA用Bglll消化并连接到IO59DNA上。用““P标记cDNA克隆P5515的插人筛选了重组噬菌体,分离出6个编码的rbcs。将克隆的汇PS一3D的一个EcoRI片段继续克隆到pPR::6上,称为pPS一4.0;把这个含有rb。S基因的E。oRI一Clal片段再克隆… 相似文献
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《生物技术通报》1989,(3)
890690制备棒状病毒表达载体的方法〔专,英〕/Smith,G.E.…/US Patent US4745051.Pub。17.05.88.ApPI.US498s5a,filed 27.05.83〔译自CBA,1955, (8),3152〕 酶切棒状病毒DNA,产生一个含多角体蛋白启动子以及充足的两翼序列(以利于同源重组)的棒状DNA。将此片段插人到一种克隆载体中,并将一外源基因置子该启动子的下游,形成重组穿梭载体。(主璋瑜)890691链霉菌分泌载体仁专,英〕/USPatent US 4745056,.Pob.17.05.38,Appl.US 66384母,f呈lod 23一0.84〔译自CBA,1988,(8),3153〕 能在链霉菌(s考呷户加呷馏。中产生所需蛋白的DN… 相似文献
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白腐菌在两种固体基质上的漆酶产量及同工酶活性比较研究 总被引：1，自引：0，他引：1
一株新分离的白腐菌Z1可在两种农业废弃物(麸皮和稻草秸杆)基质上生长并分泌漆酶,其中在麸皮基质上的漆酶产量比在稻草秸杆基质上的漆酶产量高出10倍左右,同时活性电泳显示Z1菌在麸皮基质上可产生3条漆酶同工酶,比在稻草秸杆基质上多1条,其活性也比在稻草秸杆基质中的漆酶活性高。 相似文献
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硬毛夏枯草的新三萜——夏枯草酸 总被引：3，自引：1，他引：2
硬毛夏枯草(Prunella hispida Benth.)系唇形科夏枯草属植物。该植物具清肝,散结等功效,在民间广泛作为夏枯草的代用品,其化学成分未见报道。本文报道从大理州采集的硬毛夏枯草的乙醚提取物中分离到的四个化学成分:β-谷甾酸〔Ⅱ〕,白桦酯酸〔Ⅲ〕,熊果酸〔Ⅳ〕和夏枯草酸〔Ⅰ〕。经光谱分析和化学方法证明,〔Ⅰ〕的结构为1,2-2α-dihydroxy ursolic acid,系一新的三萜化合物。 相似文献
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《生物技术通报》1993,(6)
核酸及蛋白质合成、提取、纯化931888ONA侧序反应纯化的固相方法〔英〕/Tong,X.…/Anal。Chem一1992,6魂(22)。一2672~2677〔译自DBA,1993,12(i),。3一00002〕 在酶促延伸反应中采用了5尸末端用吕:P标记、中间位置含生物素类的引物寡核昔酸,形成的产物与抗生蛋白链菌素包被的磁性珠拉结合。通过变性并洗涤珠粒除去模板链和其它反应污染物,通过在EDTA/甲酞胺混和物中加热,洗脱残留的纯单链片段。将珠粒固定于具固定磁铁的样品管之后,洗涤珠粒以除去各种污染物(如蛋白、盐类、模板DNA及未掺入或降解的三礴酸脱氧和双脱氧核昔。通过在9… 相似文献
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《生物技术通报》1988,(1)
880466使酚溶液去毒的生物学方法〔英〕/未署名了Chem.Eng.News一1986,64 (51)一16【译自CBA,1957,(4),1547〕 美国Manville Filtration&M玉nerals公司的研究人员研究了一种用于处理含酚废料的系统,该系统是以R一630为载体,以固定在硅藻土上的恶臭假单胞菌(Pseudom。-nas putida)为基础的。只要投人酚的浓度和流率没有同时明显的增加,该系统就能以令人满意的方式运行。(郝慧斌)88046了对用细菌处理废料的研究〔英〕/未署名了Bioteeh News。一1987,6(1)一6[译自CBA,1957,(4),1842〕 美国路易斯安那Sea Grant公司的研究人员研究了细菌… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(4)
921209噬菌体T7第10基因翻译增强子(TREN)的化学-酶促合成及其构件的功能〔俄〕/Gureyich,A.1.…1 Bioorg.khim一1991,17(5)一e47~652〔译自DBA,1991,10(18),91一10247〕 为了这种分析,通过化学一酶促合成法制备了TREN完整序列及其近端和远端序列。用Bam Hl和E。。Rl二种限制酶将合成序列克隆到多拷贝质粒pFPC10中。获得的新质粒用千检测TREN近端区增强翻译的能力。编码人白细胞介素一3的人工基因(克隆于pFPC10中,不含TREN的一部分)在大肠杆菌中的表达很低。引入完整的TREN序列,使人白细胞介素一3的产量大大升高。取代pTE3 … 相似文献