低温处理对水稻幼穗愈伤组织再生植株的影响

植物名称:粳稻(Oryza sativa var.japonica)品种牡交17和秋光。材料类别:水稻幼穗分化到第4,5期(幼穗长0.5～1.0cm),将幼穗连同叶鞘同时剪下,95％酒精消毒1分钟,用饱和的漂白粉上清液浸泡15～20分钟,再用0.1％的升汞液灭菌15分钟,最后用无菌水冲洗3～4次,在无菌条件下剥去叶鞘,剪取2～     

秋水仙素对草莓离体叶片再生和多倍体诱导的影响

以草莓(Fragaria×ananassa Duch.)栽培品种'雪蜜'(2n=8X=56)的离体叶片为外植体,研究了不同浓度秋水仙素对愈伤组织诱导率、不定芽再生率以及多倍体植株诱导的影响,并采用流式细胞仪对多倍体植株的倍性进行鉴定.结果显示,用质量体积分数0.1%、0.3%、0.5%和0.7%的秋水仙素浸泡2、4和6 d,草莓离体叶片均能诱导出愈伤组织和不定芽,但随秋水仙素浓度的提高和处理时间的延长,愈伤组织诱导率和不定芽再生率均显著下降.用不同浓度秋水仙素处理均能产生多倍体植株,倍性为9X、10X、11X、12X、14X和16X;随秋水仙素浓度的提高,多倍体诱导率呈现先上升后下降的变化趋势.用质量体积分数0.3%秋水仙素浸泡处理4 d是最佳的草莓离体叶片诱导方法,不定芽再生率达到40.5%,多倍体诱导率为100.0%,并且诱导产生出16X的植株.     

小麦组织培养再生系统及农杆菌介导的转基因技术研究

通过对晋麦47、鲁麦14、晋阳345、晋麦31等4个小麦品种的组织培养再生系统研究,结果表明,在MS基本培养基中加入Kao′s有机化合物和T维生素后,小麦幼胚胚性愈伤组织诱导率提高31.4%～42.4%,植株再生能力提高50%～80%.对幼胚愈伤组织进行低温预处理和在农杆菌转化时添加AS处理后,经PPT筛选获得大量正常再生植物,PCR及Southern杂交检测证明其中28株再生植株呈阳性,这些植株明显提高了对basta的抗性.     

苹果原生质体培养及芽分化的诱导

苹果原生质体培养难度较大。目前再生植株的仅有苹果砧木 M9、MM106及斯巴坦。许多研究均停留在愈伤组织阶段,可见诱导愈伤组织的分化,是苹果原生质体再生植株的关键。本文报道了从新红星苹果花蕾胚性愈伤组织建立的悬浮细胞系分离原生质体,经培养获得无根绿苗的结果。4月末,5月初采集大蕾期苹果花蕾,0.1%升汞消毒,接种于含激素的 MS 培养基上,诱导愈伤组织,再建立胚性悬浮细胞系。继代5天左右的悬浮细胞培养物可作为游离原生质体     

藜蒿的组织培养和快速繁殖研究

通过组织培养技术可以诱导藜蒿的幼叶和茎段产生愈伤组织和植株.研究表明,MS NAA 0.5 mg/L 6-BA 0.5 mg/L(蔗糖3%)最适合诱导藜蒿的叶片、茎段形成愈伤组织以及愈伤组织分化成再生植株,而MS NAA 0.5 mg/L最适合外植体诱导生根,1/2MS培养基对幼苗的生根作用十分明显.再生植株水培试验,筛选出了适合于藜蒿工厂化生产的营养液.     

离体条件下用秋水仙素处理小麦-黑麦杂种细胞的研究

在液体培养基上用0.05%的秋水仙素处理小麦-黑麦杂种幼穗愈伤组织,含秋水仙素的培养基采用两种方法灭菌：（1）秋水仙素与培养基成分混合在一起用灭菌锅灭菌。处理愈伤后愈伤组织无伤害迹象,推测可能是灭菌过程中秋水仙素浓度降低所致;再生植株的育性得到有效的恢复,48.1%的穗子结实,5.2%的穗子结实率达到34.8%;（2）秋水仙素经超滤灭菌后,在常温下与灭过菌的培养基成分混和,处理愈伤后愈伤组织伤害严重,几乎不能分化苗。     

小麦×天兰冰草杂种体细胞愈伤组织诱导及无性系建立

从普通小麦×天兰冰草杂种F_1的叶、茎、节、幼穗诱导出愈伤组织,建立了体细胞无性系,获得了大量试管苗并移栽成活。 愈伤组织诱导率及分化率以幼穗最高,茎、节、叶较低。完全展开的叶片不能形成愈伤组织,未伸展的幼叶能诱导出愈伤组织,分化程度越低的幼叶部位越容易脱分化。幼叶基部切段的愈伤组织诱导率可达90％以上。改良MS附加4mg/l 2,4-D、0.1mg/l KT、0.5mg/l NAA为最佳愈伤组织诱导培养基。最适宜的分化培养基为改良MS附加0.25mg/l KT、0.5 mg/l NAA、150 mg/l腺嘌呤核苷。杂种的愈伤组织诱导率及分化率高于两个亲本。杂种的愈伤组织长势旺盛,适应性强等都表现了小冰麦杂种在组织培养中的杂种优势,而且这种再生能力杂种优势可以通过无性系得到保持。     

枇杷叶荚蒾的愈伤组织诱导及植株再生

以枇杷叶荚蒾幼叶为外植体,MS为基本培养基,研究不同种类和浓度的植物生长调节物质对愈伤组织诱导、分化及生根的影响,建立了枇杷叶荚蒾再生体系。结果表明:枇杷叶荚蒾最佳灭菌组合为75%酒精预处理20s,再用0.1%HgC12浸泡12min;最佳愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.25mg·L-1+2,4-D1.0mg·L-1,诱导率最高达92%;最适芽分化培养基为MS+6-BA1.5mg·L-1+NAA0.2mg·L-1,分化率达87.25%;适宜的生根培养基为1/2MS+NAA1.0mg·L-1,生根率达85%。     

冬凌草离体培养体系的建立及主要次生代谢产物的测定

以冬凌草叶片为外植体,研究不同浓度激素组合对冬凌草愈伤组织诱导及植株再生的影响,并对不同外植体(茎、叶)诱导愈伤、芽的分化能力及再生植株内主要次生代谢产物的含量进行了比较研究。结果表明:在MS 2.0 mg/L 6-BA 1.0 mg/L NAA培养基上诱导愈伤组织效果较好;在MS 2.0 mg/L 6-BA的培养基上诱导芽的效果较好;叶片和茎段在愈伤诱导培养基上均能产生大量的愈伤组织,但其再分化能力以茎段最好;再生苗生根培养基以0.3 mg/L IBA最好;以叶为外植体诱导的再生植株中冬凌草甲素、迷迭香酸的含量均高于以茎为外植体诱导的再生植株。     

芝麻愈伤组织诱导与植株再生体系的建立

以芝麻栽培种(Sesamum indicum, 2n=26)、野生种(S. radiatum, 2n=64; S. schinzianum, 2n=64)及其远源杂交后代(S. schinzianum × S. indicum)为材料, 研究了不同基因型、外植体类型、激素种类及其浓度对芝麻愈伤组织诱导及植株再生的影响, 建立了芝麻愈伤组织诱导及高频植株再生的技术体系。结果表明, 6-BA/NAA激素组合有利于绿色紧密型愈伤组织的形成及分化; 最佳愈伤组织诱导及分化培养基为MS+ 0.1 mg·L^–1NAA + 2.0 mg·L^–16-BA+ 30 g·L^–1蔗糖。在该培养条件下, 野生种下胚轴愈伤组织的诱导率最高为97.50%, 分化率为94.02%; 栽培种下胚轴愈伤组织的诱导率最高为40.60%, 分化率为8.16%; 远缘杂交后代幼胚外植体愈伤组织的诱导率最高为46.67%, 分化率为89.29%。该研究结果为芝麻转基因技术体系的建立及新种质创制奠定了基础。     

垂丝海棠组培再生体系建立的研究

目的:通过对垂丝海棠(Malus halliana koehne)进行组织培养研究为木本观赏海棠提供技术支持。方法:采用常规组培手段及正交设计试验对外植体消毒时间、快繁培养、叶片愈伤诱导、再生、生根等进行研究。结果:外植体最佳消毒时间:75%酒精30s 0.1%升汞10min;最适增殖培养基为:MS 6-BA0.7mg/L NAA0.3mg/L,增殖系数可达7;正交设计结果显示激素对叶片愈伤组织诱导影响的因素大小为:2,4-D>6-BA>NAA;再生最佳配方为6-BA6.0mg/L NAA0.5mg/L再生效率达91.8%;最适生根培养基为:1/2MS IBA0.3mg/L 蔗糖20g/L。结论:对垂丝海棠组培再生研究取得初步成功。     

棉花大田植株叶柄组织培养体系的建立

以早熟棉花品种'中棉所24'为材料,通过对大田棉花植株叶柄灭菌条件、叶柄愈伤组织诱导与分化、胚状体的萌发及植株再生所需的培养基等进行研究,以建立棉花大田植株叶柄组织培养体系.结果表明:棉花植株叶柄经0.1%HgCl2灭菌4～5 min后,横切成0.8 cm左右的小段,在MSB+0.05 mg·L-1IAA+0.05 mg·L-1KT+0.05 mg·L-12,4-D+25 g·L-1葡萄糖+2 g·L-1Gel(pH 5.8)培养基上培养,易获得分化的愈伤组织;愈伤组织在添加有KT/IAA(MSB+0.08 mg·L-1IAA+0.08 mg·L-1KT+25 g·L-1葡萄糖+2 g·L-1Gel,pH6.5)或ZT/IBA(MSB+0.1 mg·L-1ZT+0.1 mg·L-1IBA+25 g·L-1葡萄糖+2 g·L-1Gel,pH 6.5)的分化培养基中,均可以获得胚性愈伤组织.胚性愈伤组织在MSB+0.05 mg·L-16-BA+0.05 mg·L-1IAA+25 g·L-1蔗糖+2 g·L-1Gel(pH 6.5)培养基上,形成胚状体、生长发育成再生植株.     

以根为外植体建立大蒜的组织培养体系

以国内4个大蒜栽培品种为材料,建立了以根为外植体的再生体系。将蒜瓣去皮后灭菌消毒,萌发后选取苗龄为5~7 d的无菌苗的根接种到含不同激素配比的培养基中进行愈伤组织诱导,发现MS+2,4-D 1 mg/L+2ip 0.1 mg/L组合愈伤诱导效率最高,平均为56.06%;愈伤组织经过2~3次继代培养,选取胚性愈伤组织置于不同分化培养基上进行培养,2~3个月后可见小芽产生,分化培养基为MS+KT 1 mg/L时,植株再生效率最高,平均达到35.01 %。本研究建立了一种以根为外植体的高效的大蒜愈伤诱导和再生体系,为大蒜遗传转化体系的建立打下良好基础。     

植物生长物质对大花红景天愈伤组织诱导及苗再生的影响

以大花红景天植物的茎、叶、芽、种子为材料,采用DPS软件正交设计法,通过添加不同植物生长物质,考察其对大花红景天愈伤组织形成及苗再生的影响,为低海拔条件下建立大花红景天植株再生体系提供数据基础。结果表明：种子和芽是诱导愈伤组织最适宜的外植体;植物生长物质对愈伤组织形成的影响大小为6-BA〉KT〉2,4-D〉NAA〉IAA,愈伤组织形成的最佳培养基为MS＋6-BA 4.0 mg.L-1＋KT 0.1 mg.L-1＋NAA 0.1 mg.L-1＋IAA 0.2 mg.L-1;不定芽分化的最佳培养基为MS＋TDZ 0.5 mg.L-1＋NAA 0.5 mg.L-1,诱导率达63.14%,不定芽数平均为11.4。本试验获得的最佳培养基配方,适宜在低海拔条件下进行快速诱导大花红景天的愈伤组织和植株再生。     

罗布麻愈伤组织诱导及植株再生

以罗布麻(Apocynum venetum L.)当年的成熟种子和5周龄的幼苗叶片为外植体,研究了不同激素组合、暗培养对愈伤组织及植株再生的影响.结果表明,幼苗作外植体诱导愈伤的最佳培养基为添加1.0 mg/L 6-BA 0.2 mg/L IBA的MS培养基;继代培养中1.0 mg/L 6-BA与0.2 mg/L IBA组合愈伤致密而生长迅速,长时间培养硬化的愈伤组织可用添加0.5 mg/L 6-BA和0.1 mg/L IBA培养基和初期暗培养获得大量质地疏松、增殖迅速的愈伤组织;再生苗诱导以0.5 mg/L 6-BA 0.2 mg/L IBA组合为佳;1/2MS附加NAA 0.6 mg/L为适宜的生根培养基,初步建立了罗布麻离体再生体系.     

6-BA、NAA和2,4-D不同配比对荠菜愈伤组织诱导、生长及植株再生的影响

以野生荠菜[Capsella bursa-pastoris （L.） Medic]无菌苗为试材,选取下胚轴、子叶、真叶和叶柄作为外植体,研究了不同外植体的出愈情况,不同植物生长调节剂及配比对愈伤组织诱导、继代及植株再生的影响。结果表明：（1）下胚轴作为外植体出愈情况最好,继代后生长快;（2）下胚轴愈伤组织的最适植株再生培养基为MS＋2～3mg·L-16-BA＋0.2~0.6mg·L-1NAA;（3）愈伤组织培养阶段的2,4-D浓度对其植株再生能力有影响。     

小果卫矛愈伤组织诱导及植株再生体系的建立

以小果卫矛嫩茎为外植体，采用L₉（3⁴）正交设计法，研究了不同灭菌组合、不同基本培养基、不同浓度6-BA、2，4-D、NAA配比对小果卫矛愈伤组织诱导、再分化及生根的影响。结果表明：小果卫矛嫩茎最适的灭菌组合为75%酒精消毒30 s+0.1%升汞消毒15 min，愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+3.0 mg·L^-1 6-BA+1.0 mg·L^-1 2，4-D，诱导率为79%；再分化的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1，再分化率为78.83%，1/2 MS+NAA 1.2 mg·L^-1适用于生根培养，生根率达到83.23%。     

芍药花药愈伤组织诱导及体细胞胚发生

以芍药(Paeonia lactiflora)品种粉玉奴花药为外植体,研究不同浓度2,4-D对愈伤组织诱导、体胚发生及植株再生的影响,采用组织细胞学方法观察愈伤组织以及体细胞胚发育过程,采用根尖染色体法鉴定再生植株倍性。结果表明,芍药花药愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1 mg·L–1 2,4-D+1 mg·L–1 N...     

Influence of genotype and culture medium on microspore callus induction and green plant regeneration in anthers of Oryza sativa

Attempts to identify nutritional requirements of anthers of eight indica rice cultvars ( Oryza sativa L. spp. Indica ) for callus induction in vitro and green plant regeneration were made. The requirements varied with the genotype. Some cultivars, however, possessed a wide range of adaptability to diverse nutritional conditions. Indica rice is highly sensitive to the presence of NH+4, and MgSO4 in the medium. High sucrose concentration (11%) was deleterious for callus induction and green plant regeneration. Sucrose at 3 to 5% was optimal for growth. Auxins at high concentrations promoted regeneration of albino plants. The presence of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (9.0 μM) supplemented with picloram (0,3 μM) and zcatin (0.5 μM) was effective for callus induction. A combined pretreatment of 35°C for 5 min followed by 10°C for 7 days was most suitable for callus induction and green plant regeneration.     

四倍体稗草的组织培养与快速繁殖

以筛选得到的四倍体稗草成熟胚作为外植体,进行了组织培养与快速繁殖技术的研究。结果表明:最佳外植体消毒方式为70%乙醇浸泡30 s+0.1%(w/v)的升汞消毒15 min。最佳诱导培养基为MS盐、DL维生素+2.5 mg/L 2,4-D+300 mg/L谷氨酰胺+500 mg/L脯氨酸+3%麦芽糖。将愈伤组织转入分化培养基(MS+50 mg/L肌醇+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L KT+0.5 mg/L NAA+0.25 mg/L IAA+3%麦芽糖)上,培养20 d后超过70%的愈伤组织分化成苗。将3-5 cm长的分化苗转入1/2 MS生根培养基进行生根培养。炼苗后,移入营养土与珍珠岩(2∶1)的基质中,移栽成活率高达90%以上。该体系的建立为稗草抗除草剂基因的功能验证提供了前提条件。