甲酸棉酚使用者的姐妹染色单体互换和微核的检测

对12名正常男子和11名口服甲酸棉酚的男子外周血淋巴细胞培养后进行SCE分析,以及12名正常对照男子和13名口服甲酸棉酚男子的徽核测定表明:(1)试验组SCE平均值为3.56±0.14/细胞,SCE范围为0—14/细胞,对照组SCE平均值为4.26±0.13/细胞,SCE范围为0—13/细胞,两者间差别在统计学上无显著意义(P>0.05);(2)试验组的平均徽核率为0.36‰,与对照组0.24‰比较,两组间未发现有显著差异。表明甲酸棉酚不引起服药者淋巴细胞SCE和微核率的增加。     

紫貂(Martes zibellina)妊娠期血清孕酮水平的变化

用放射免疫法测定受配雌紫貂妊娠期间(9月至翌年2月)的血清孕酮水平。结果表明:其中产仔雌貂在9月至翌年1 月的血清孕酮呈现相对稳定的较高水平(平均1.45±0.23毫微克/毫升),2月下旬急剧升高至本试验的最高值(平均3.72±1.67毫微克/毫升,P<0.01),空怀雌貂在妊娠前期内的血清孕酮水平均为0.70±0.14毫微克/毫升的低水平,与产仔组相比,差异显著或极显著。作者认为血清孕酮水平的变化与日照和胚泡活动密切相关。     

小麦的姐妹染色单体交换

用BrdU-Giemsa法和改良的去壁低渗标本制备法,观察了小麦属5个种根尖细胞的SCE。各物种之间每条染色体的平均SCE是不同的。硬粒小麦为0.76±0.82(±S.E.),拟斯卑尔脱小麦为0.70±0.85,普通小麦为0.57±0.69,野生一粒小麦为0.48±0.60,节节麦为0.24±0.47。由于小麦属的某些种有不同的染色体组,它们的SGE的差别可能反映了不同染色体组的SCE不同,B组高于A组,A组高于D组。文章中讨论了造成这种差异的因素。 本文还研究了苯、乙醇、糖精对普通小麦的染色体畸变和SCE的影响。在本实验条件下,上述化合物能显著增加小麦的SCE,但不影响小麦的后期染色体桥的频率。     

草鱼体内肾细胞姐妹染色单体分化及交换的初步研究

本文确立了一个以草鱼体内肾细胞姐妹染色单体交换频率为指标的检测环境诱变或致癌物质的短期试验系统。采用硫堇-UV-Giemsa染色法,分析了草鱼体内肾细胞的SCD-2(注射BrdU后第二个细胞周期的中期分裂相的SCD)频率和SCE频率。用500微克/克体重BrdU体内标记5天,草鱼肾细胞SCD-2频率为8.58±0.22%;SCE频率为3.05±2.523 SCE_5/细胞。以丝裂霉素C(Mitomycin C,MMC)作为阳性对照,分析了化合物亚硝基胍(N-methyl-N~1-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)和农药叶蝉散(Mipc)诱发SCE的能力。这项工作在评价水质污染方面将起一定的作用。     

化学诱变物诱发小鼠脾脏细胞和大麦根端分生组织细胞姐妹染色单体交换的比较研究

诱变剂诱发SCE的增加在大麦细胞中比在小鼠脾脏细胞中所需浓度较低,说明植物SCE比动物体内SCE敏感。所检测的诱变剂大多均能在小鼠脾脏细胞和大麦细胞中诱发SCE的增加,两者之间的SCE/细胞、SCE/pgDNA、SCE比率、SCE/pgDNA增加等项数值均显示极显著相关性,表明所检测的几种诱变剂在小鼠脾脏细胞和大麦细胞中最终诱发SCE的效应是一致的。     

防治血吸虫病药物的研究 ⅩⅩⅩⅡ.锑与磺溴酞钠等经肝排泄的相互抑制

大鼠静脉注射 PAT 15毫克/公斤,一小时内胆汁排锑量为给药量的29±13%,平均锑浓度为399±122微克/毫升,如在给 PAT 前先静脉注射 BSP 50毫克/公斤,则锑排泄率降为2±2%(P<0.001)。抑制程度与 BSP 的剂量及给药时间有关。大鼠静脉注射 BSP 15毫克/公斤,先收集胆汁一小时,再注射 PAT 30毫克/公斤及第二次 BSP15毫克/公斤,又收集胆汁一小时,结果实验组及对照组的 BSP 排泄率:第一次各为给药量的81±11%及75±7%,第二次各为47±14%及95±12%。给 PAT 后BSP 排泄率较对照组及自身对照期显著降低(P 值均<0.01)。上速竞争抑制现象在其他类型锑剂及酸性染料间也能获得证明。静脉注射(月弟)波芬,Sb-58或锑铵,剂量分别为40、20及17毫克/公斤,一小时内胆汁排锑率各为16.5±12.6%,6.45±4.4%及8.4±3.0%。若在给锑剂前先给 BSP 50毫克/公斤,则锑排泄率分别降至1.4±0.5%,1.9±1.2%及1.3±0.2%。大鼠结扎肾动静脉后注射 PAT 15毫克/公斤,一小时内胆汁排锑率为32±6%,若在给 PAT 前分别先注射50毫克/公斤溴甲酚绿或酚红,或100毫克/公斤萤光黄,则锑排泄率分别降至8±6%,17±12%及4±1%。家兔注射 PAT 或(月弟)波芬后,胆汁中锑在纸电泳时系向阳极泳动,且泳动速率变慢,证明锑剂代谢产物仍是阴离子,但已非原来的 PAT 或(月弟)波芬。对上述结果作了讨论,初步认为 PAT 经代谢后形成新的锑络合物,以阴离子形式,经肝—胆汁的酸性物质转运机构,通过特殊转运进入胆汁。     

TPA促进C_3H/10T1/2细胞转化及有关作用的研究

甲基胆蒽(0.1微克/毫升)不能使C_3H/10T2/1细胞发生转化,但经甲基胆蒽(0.1微克/毫升)启动的细胞,以后用TPA(0.1微克/毫升)连续作用则可以转化。说明TPA具有明显的促进细胞转化作用。TPA不能使经甲基胆蒽启动的细胞的姊妹染色单体交换进一步增加。TPA对C_3H/10T2/1细胞的DNA合成,不论是否先经甲基胆蒽启动,都表现为暂时抑制和以后明显的增强。本文对TPA的促进转化作用及其它有关的生物学作用进行了初步讨论。     

柞蚕蛹抗菌肽D对大肠杆菌K_(12)D_(31)的作用

本文报道了不同浓度的柞蚕蛹抗菌肽D,对大肠杆菌K_(12)D_(31)的杀灭作用动力学。在LEG培养液中,抗菌从D的浓度在5微克/毫升时显效。浓度在10微克/毫升以上时,其杀菌速度大于细菌的增殖速度。固定抗菌肽浓度为10微克/毫升,细菌浓度在3×10~7个细菌/毫升,培养在磷酸钾盐缓冲液中,4小时后能全部杀灭。同样浓度细菌在LEG培养液中,4小时后细菌数下降到约为10~2个细菌/毫升,但不能全部杀灭。同时还提供了柞蚕蛹抗菌肽D和B对大肠杆菌K_(12)D_(31)作用不同时间的电镜照片。     

猕猴注射黄曲霉素B和乙型肝炎病毒后丝裂霉素诱发SCE的研究

丝裂霉素C(MMC)是一种抗癌的双功能烷化剂,能诱发染色体畸变和使姐妹染色单体互换率显著增高,本实验以弥猴为实验材料,探讨强烈致癌因子黄曲霉素D(AFB_1),乙型肝炎病毒(HBV)和MMC在诱发SCE时的相互关系。 四只2—3年龄的猕猴(Macaca mulatta),一只雄性猕猴按公斤体重100微克剂量肌肉注射AFB_1(溶剂为二甲亚砜),另一只雄性猕猴静脉注射乙型肝炎患者血清0.2毫升。半个月后再次静脉注射患者的全血0.5毫升。一只雌性猕猴在注射AFB_1后再按上法注射乙型肝炎患者的血清和全血。另一只雄性猕猴为对照。最后一次注射的次日,抽取静脉     

用绒毛组织微核评价母亲因素对人胚的致突变性

对507对欲作人工流产的夫妇进行断面调查及绒毛组织微核的测定,以探讨父母吸烟、饮酒及采取避孕措施等因素对子代的致突变性。结果显示:微核的发生率与母亲年龄、孕次、孕龄、既往流产史等自身的因素无关;各种避孕措施及少量饮酒均不具有诱发绒毛微核细胞率增加的作用。然而,男方吸烟、女方被动吸烟其微核细胞率为0.7645±0.0561‰高于饮酒组(0.5667±0.2004‰)和非吸烟对照组(05522±0.0616‰),与对照组有显著性统计学意义(P<0.05)。男方配偶吸烟兼饮酒者其微核发生率最高(0.7944±0.0754‰),说明吸烟与饮酒对诱发绒毛微核的产生有协同作用的趋势。本文并对男方吸烟和/或女方被动吸烟可诱发胚胎绒毛组织细胞DNA和/或纺锤体装置的损伤,进行了探讨,提出应引起人们的高度重视,并建议利用人类绒毛组织微核测定法作为监测环境致突变因子对人类下一代影响的方法。     

一氧化氮供体对过氧化氢引起的心肌细胞损伤的保护作用

关于一氧化氮(NO)对心肌细胞是否具有保护作用目前尚存在争议,为探讨NO对过氧化氢(H2O2)引起的心肌细胞损伤是否具有保护作用及其可能的机制,实验将体外培养的新生大鼠心肌细胞分为3组(1)阴性对照组(Normal组);(2)H2O2组H2O2(0.1mmol/L)与心肌细胞共育4h;(3)S-亚硝基-N-乙酰青霉胺(SNAP)+H2O2组NO供体SNAP(0.5mmol/L)处理心肌细胞10min后,加入H2O2与心肌细胞共育4 h.用流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,心肌细胞损伤程度以心肌细胞存活率和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性来表示,同时检测心肌细胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.通过激光共聚焦显微术检测在不同处理条件下心肌细胞胞内钙的变化.结果表明,正常心肌细胞LDH活性和细胞存活率分别为631.4±75.6 U/L和93.1±6.2%,细胞凋亡率为0;H2O2处理细胞后可使细胞LDH活性显著增高(1580.5±186.7 U/L,P＜0.01),细胞存活率明显下降(58.3±7.6%,P＜0.01),流式细胞仪检测到大量心肌细胞凋亡,凋亡率为26.4±5.7%;SOD活性较正常细胞19.67±0.85 NU/ml显著下降,为14.73±1.68 NU/m(P＜0.01),MDA含量较正常细胞6.95±0.83μmol/L显著增高,为15.35±3.49μmol/L(P＜0.01).SNAP预处理细胞可显著提高心肌细胞存活率(79.7±9.3%,P＜0.01),降低LDH活性和细胞凋亡率(分别为957.8±110.9 U/L和9.1±3.3%,P＜0.01);并提高细胞抗氧化能力,表现为较H2O2处理组的SOD活性增高(21.36±3.11 NU/ml,P＜0.01),MDA含量下降(9.12±1.47 μmol/L,P＜0.01).激光共聚焦显微镜检测结果表明,H2O2可升高细胞内钙,而SNAP则可降低细胞内钙,SNAP预处理细胞后可取消H2O2升高细胞内钙的作用.上述结果提示,NO供体SNAP可对抗H2O2对心肌细胞的损伤,其机制与提高心肌细胞抗氧化损伤能力和对抗H2O2引起的细胞内钙超载有关.     

尿中儿茶酚胺的螢光测定

本文根据三羟吲哚法原理,按Pitkanen(1956)和Euler(1955)等萤光测定法加以改良,可借助一般仪器设备较迅速正确地测定尿中总儿茶酚胺的含量;改进了吸附与洗脱过程;对尿中某些干扰物质的去除作了初步探讨。去甲肾上腺素的平均回收率为86.5±S.E.3.47(％)。正常青年男女102名24小时尿中总儿茶酚胺的含量为: 男(67名):85.6±S.D.9.3微克(43.7—151.6微克) 女(36名):87.8±S.D.19.4微克(40.5—136.6微克)     

小鼠体内脾脏,骨髓及精原细胞姐妹染色单体交换的比较研究

本文对几种化学诱变剂诱发小鼠体内脾脏、骨髓和精原细胞的SCE进行了比较研究,同时分析了几类常见化合物在小鼠脾脏细胞中诱发SCE的活力。结果显示诱变剂在脾脏细胞中诱发SCE比骨髓和精原细胞敏感。几类化合物都能显著地诱发小鼠脾脏SCE的增加,与对照相比差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01),说明利用小鼠脾脏细胞检测环境诱变物是相当灵敏的。     

实验12 cDNA文库的简易构建法

一、合成cDNA单链 1.按照实验3的操作程序,从哺乳类细胞中抽提poly(A)~+mRNA。 2.建立合成cDNA单链的反应系统:50mM Tris·HCI pH8.3(42℃时测定pH值);10mM MgCl_2;10mM DTT;4mM焦磷酸钠;1.25mM dGTP;1.25mM dATP;1.25mM TTP;0.5mM dCTP;15—20μCi α-~32P-dCTP(3000 Ci/mmol);100微克/毫升oligo(dT_12-18);150微克/毫升 Poly(A)~+mRNA;3000单位/毫升反转录酶,用水调节至最终体积为20或40微升。43℃保温30分钟。     

仿刺参体腔细胞和血细胞类型及体腔细胞数量研究

本文应用光镜、电镜技术研究了仿刺参(Apostichopus japonicus)体腔细胞和血窦中血细胞的形态、结构、周年体腔细胞总数及主要类型的细胞数量。研究结果表明,仿刺参体腔细胞和血细胞形态结构相同,作者将体腔细胞分为淋巴样细胞、球形细胞、变形细胞、透明细胞、纺锤细胞和结晶细胞,其中球形细胞又分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型。血窦中血细胞除未见结晶细胞外,其余与体腔细胞相同。体腔细胞和血细胞均以淋巴样细胞、变形细胞、球形细胞为主,透明细胞、纺锤细胞次之,结晶细胞数量最少。从形态和结构分析,作者认为仿刺参体腔细胞和血细胞来源可能相同。周年平均的体腔细胞总数为(3.85±0.21)×106个/mL,淋巴样细胞为(1.58±0.11)×106个/mL,占细胞总数的(41±1.47)%;球形细胞为(1.16±0.13)×106个/mL, 占细胞总数的(30±0.89)%;变形细胞为(0.99±0.07)×106个/mL,占总细胞数的(25±0.98)%,三种主要类型细胞占细胞总数的(96±1.53)%。     

树舌液体深层发酵浸膏多糖在粘附中的作用

采用Sw1116细胞进行粘附试验,研究树舌液体深层发酵浸膏多糖(GAP)能否影响细菌对细胞的粘附。结果表明:GAP质量浓度为300μg/mL时,对大肠杆菌、沙门菌的细胞粘附抑制最为明显,粘附率分别降至(22.8±1.2)、(31.2±1.6)个细菌/细胞,对乳酸杆菌粘附有明显的促进作用,粘附率达(40.0±1.3)。说明树舌液体深层发酵浸膏多糖对大肠杆菌、沙门氏菌的细胞粘附具有抑制作用,对于乳酸杆菌的粘附有促进作用,提示该GAP具有调节肠道微生态的潜在应用价值。     

IB-RS-2细胞的微细胞的形成过程及其超微结构的研究

IB-RS-2细胞经秋水仙素(2微克/毫升)处理24—48小时,约75％的细胞形成微核,同时在细胞表面形成许多大小不一的原生质突起。微核化的细胞进一步用松胞素B(10微克/毫升)处理,在Ficoll不连续梯度(12.5％、16％、25％)中进行离心去核、形成许多微细胞。扫描电镜观察表明,微细胞是微核化细胞的原生质突起脱落而形成的。微细胞是一个不均一的群体,无论在大小与表面形态,还是在微细胞内部的成分与结构上都存在很大差异。     

蝎毒耐热蛋白对大鼠急性分离海马神经元兴奋性的影响

应用全细胞膜片钳记录技术在电流钳模式下观察经持续高温等特殊处理后分离纯化的30～50 kDa蝎毒耐热蛋白(scorpion venom heat resistant protein,SVHRP)(国家发明专利,专利号ZL01 106166.92)对急性分离大鼠海马神经元兴奋性的影响.结果发现SVHRP可致海马神经元兴奋性降低.神经元经1×10-2 μg/mL SVHRP处理后动作电位发放模式改变,发放频率减少.在52个受检细胞中,有45个细胞产生位相放电(占86.54%);7个细胞产生重复放电(占13.46%).在产生位相放电的45个细胞中,有8个细胞在SVHRP处理后仍可以诱发出位相放电(占17.78%);37个细胞在SVHRP处理后无法诱导出位相放电(占82.22%),SVHRP处理后动作电位的产生与处理前相比,有显著差异(P＜0.01,n=45);在产生重复放电的7个细胞中,在1×10-2μg/mL SVHRP作用后均不能再次诱发出重复放电,而是产生一个动作电位或不再产生动作电位,药物处理前产生的动作电位个数为14.57±1.00,SVHRP处理后产生动作电位的个数为0.57±0.20,二者之间有显著性差异(P＜0.01,n=7).1×10-4 μg/mLSVHRP处理后,诱发动作电位产生的基强度由(75.10±8.99)pA增加到(119.85±12.73)pA(P＜0.01,n=8);阈电位由(-41.17±2.15)mV升至(-32.40±1.48)mV(P＜0.01,n=8);动作电位峰值由(68.49±2.33)mV下降至(54.71±0.81)mV(P＜0.01,n=8).由于神经元超兴奋性被认为是癫痫发作的基本机制之一,因此上述结果表明SVHRP有可能通过降低海马神经元兴奋性发挥其抗癫痫作用,这为蝎毒药物的进一步开发提供理论依据.     

人体白细胞转移因子和“免疫”核糖核酸的联合抽提法——Ⅰ.转移因子

本文介绍一种制备转移因子(TF)的改进方法。白细胞于冷40%乙醇溶液中被打碎,白细胞匀浆冷冻离心,上清液除去乙醇后再通过超滤薄膜,滤液即为TFu 制剂。此法操作简便,条件严格,可避免细胞内成分的自溶及细菌或热原的污染,又可综合抽提白细胞内的“免疫”核糖核酸,适合于大规模制备TF。每单位TFu 相当于0.5克或4.45±1.35×10~8白细胞的超滤物,含固体6.86±0.72毫克,核糖183.24±26.0微克,多肽797.22±197.07微克,环化腺嘌呤核苷酸58.45±10.70毫微克。E_(250毫微米)=7.86±0.98,E_(260)/E_(280)=2.62±0.12。具有特征性葡聚糖G-25凝胶过滤洗脱图谱。动物实验证明此制剂无毒性、热原、过敏性和抗原性。注射于病人能提高其迟发型皮肤变态反应及细胞免疫反应。讨论了由透析法及本法制备的TF 理化性质差别的原因。     

大蒜对环磷酰胺诱发的小鼠骨髓细胞微核和姊妹染色单体交换的保护作用

本文以小鼠骨髓嗜多染红细胞的微核率和小鼠骨髓细胞姊妹染色单体交换(SCE)率两个指标,测定大蒜匀浆滤液(GJ)对环磷酰胺(CP)诱变作用的影响。结果表明,用GJ灌胃处理小鼠能降低CP(30mg/kg)诱发的微核率,差异极显著(P<0.01)。用GJ处理小鼠,除了CP高剂量(30mg/kg)外,CP中和低剂量(3mg/kg和0.3mg/kg)所诱发的SCE率均受到抑制,有显著性差异(P<0.05)。表明大蒜有较强的抗诱变能力,具修复染色体损伤和DNA错误复制的功能。