PCR在临床淋球菌检测中的应用

ＰＣＲ多聚霉链反应技术已被广泛的应用于临床医学的多种疾病的检测诊断中,它不仅为检测病原菌提供了特异性好,敏感性强,快速简便的途径,而且还使隐性病症的早期诊断成为可能。本文仅对ＰＣＲ在淋球菌的临床检测的基本特点,应用方法以及临床样品裂解方法的改进,特异性及敏感性试验以及ＰＣＲ检测意义等做一个探讨。     

PCR检测淋球菌的探讨

多聚酶链反应（ＰＣＲ）具有灵敏度高,特异性强,快速高效的特点,在病原微生物检测领域有广阔的前景。本文对４０８例疑似淋病患者的泌尿生殖道分泌物作了ＰＣＲ检测淋球菌的探索,结果１７０例阳性,占４１．７％,而培养阳性（２１．６％）,ＰＣＲ法显著高于培养法（Ｐ＜０．０１）。     

应用单克隆抗体ELISA检测淋球菌

利用抗淋球菌外膜蛋白的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）制备的淋球菌酶免疫试剂（ＧＯＮＯ－ＥＩＡ）检测实验室已知淋球菌的阳性低限值菌数为６．２５×１０~４／ｍｌ。对脑膜炎奈瑟氏菌、微黄色奈瑟氏菌、卡它布兰汉氏球菌、大肠埃希氏菌、绿脓杆菌和乳酸杆菌等无交叉反应。检测临床生殖泌尿系统标本４８４例,以淋球菌培养法对比,ＧＯＮＯ－ＥＩＡ的敏感性为８１．４３％,特异性为９４．９２％,,总符合率为９２．９７％。ＧＯＮＯ－ＥＩＡ方法简便,快速,整个实验不超过１２０分钟,是适用于临床实验诊断的理想方法。     

56例儿童淋球菌检测结果分析

淋病是侵犯泌尿生殖系统为主的性病 ,除急性外 ,还呈慢性经过 ,甚至有无症状感染者 ,这种无症状感染者因不被注意 ,具有流行病学上的重要意义。因此 ,快速、准确的淋菌检测结果 ,为临床提供重要的诊治依据 ,为此我们对 5 6例患儿的不同标本进行相同的系统检测 ,现报道如下。1　材料与方法1 1　病例选择　随机选择拟似淋病患儿 5 6例 ,其中男 2 1例 ,女 35例 ,年龄最小出生后 3d ,最大 14岁 ,父母均患淋病者 35例 ,单方患淋病者 15例。人均取材 3次者 2 1例 ,取材2次者 2 5例 ,取材 1次者 11例 ,合计取材 12 1份次。1 2　方法　 (1)眼分泌物…     

PCR技术在支原体检测中的应用

一、前言 支原体(Mycoplasma)是界于细菌和病毒之间的原核微生物,分类学上是一个独立的纲——柔膜体纲( Mollicute)。 1989年Nocard与Roux从牛的胸膜肺炎病灶中首先分离到,以后又从病人、家畜标本中查出。迄今发现的支原体有100多种,确定对人致病的有五种。肺炎支原体(M.pneu-moniae)能引起人的原发性非典型性肺炎;解脲脲原体( Ureaplasma urealyticum)能引起非淋菌性尿道炎、绒毛膜羊膜炎、早产及低体重新生儿,人型支原体(M.hominis)主要引起肾孟肾     

三种方法检测淋球菌的结果分析

用革兰染色、淋球菌培养、PCR检测三种方法同时对135例泌尿生殖道患者进行淋球菌检测.革兰染色阳性53例,检出率39.26%,淋球菌培养68例,检出率50.37%,PCR阳性78例,检出率57.78%.上述结果经统计学处理x2=9.39,P＜0.05.革兰染色与淋球菌培养和PCR检测有差异,淋球菌培养与PCR检测P＞0.05,二种方法差异无显著性,其中,用PCR法测淋球菌敏感、特异、快速.提示临床上在革兰染色、淋球菌培养均阴性而症状又符合淋球菌感染者考虑可用PCR方法检测.这对淋病患者进行准确地早期发现,早期诊断和防治及因淋球菌漏检而引起的淋病传播起到重要作用.     

淋球菌的生物诊断法

淋球菌的生物诊断法李新玉，邹碧珍，韩美丽，敬德仲，王淑华，曲杰（黑龙江省科学院应用微生物研究所，哈尔滨）淋球菌（Ｇｏｎｏｃａｃｕｓ）是引起淋球菌性尿道炎的病原菌，淋病是一种性传括性疾病，据报导，淋病的发病率占性传播性疾病的８０％。建国后淋病在我国基本...     

荧光定量PCR检测性病病原体的临床价值

目的荧光定量PCR检测性病病原体的临床意义.方法用荧光定量PCR(FQ-PCR)方法,对淋球菌(NGH)、沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(Uu)3种性病病原体进行定量测定,其结果与定性PCR相比较.结果2种方法对3种病原体检测结果的符合率分别为NGH95.7%,CT96.9%,Uu95.2%,阳性率差异分别为4.3%,3.1%4.8%.两种方法阳性率差异无显著性(P＞0.05),阳性标本定量平均拷贝数分别为NGH 4.9×106,CT3.9×106,Uu 4.7×106.结论FQ-PCR操作更简便、快速,并且能准确定量,对于性病的诊断,病性的发展和愈后监测,疗效评价,指导临床用药具有很高的临床实用价值.     

三种方法检测淋球菌的结果分析

淋病奈瑟氏菌(N.gonoyyhoeac简称淋球菌),淋病快速纸片法和涂片革兰染色镜检操作简便、快速、价廉。从定性反应和形态上观察疑诊淋病,要确诊尚需细菌培养。本文就疑诊淋病患者标本在纸片法,涂片镜检的同时进行细菌培养,现报道如下。1　材料与方法1.1　病例选择　随机选择?..     

PCR技术检测性病病原体在男性泌尿生殖系感染中的意义

用ＰＣＲ技术对我院５８８例男性生殖泌尿系感染患者进行淋病Ｋ球菌（ＮＧＦ）沙眼衣原体（ＣＴ）及解脲支原体（ＵＵ）检测,结果淋球菌感染者７５例（１２．７６％）;沙眼衣原体感染者８４例（１４．２９％）;解脲支原体感染者５１例（８．６７％）。淋球菌与沙眼衣原体混和感染者２５例（４．２５％）;淋球菌与解脲支原体混合感染者９例（１．５３％）;沙眼支原体与解脲支原体混合感染者１２例（２．０４％）;未发现有三种病原体同时感染者,并对ＰＣＲ检测性病病原体的意义及性病病原体传播趋势进行讨论。     

用PCR检测临床血标本中人类细小病毒B19 DNA

用ＰＣＲ检测临床血标本中人类细小病毒Ｂ１９　ＤＮＡ杨洪江,张桦,林书祥,牛艾茹（天津市儿童医院儿研所,天津３０００７４）关键词聚合酶链反应（ＰＣＲ）,人类细小病毒Ｂ１９几种人类细小病毒中,只有Ｂ１９病毒是人类的病原体。由于该病毒不能在体外繁殖,获得该...     

应用PCR技术检测结核分枝杆菌的临床分析

采用聚合酶链反应（Ｐｏｌｙｍｅｒａｎｓｅ Ｃｈｉａｎ Ｒｅａｔｉｏｎ,即ＰＣＲ）技术检测结核分枝杆菌Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ,一年多来共检测了１００例结核（肺、肾结核）患者的痰和尿液标本,结果ＰＣＲ检出阳性率为８１％,对照用储菌涂片抗酸染色法,阳性率为５８％,用常规培养法阳性率为２０％。而对５０例非结核患者的痰和尿液标本的检测,ＰＣＲ法仍有６％的阳性率,而用涂片或常规培     

淋球菌多重耐药性机制的研究进展

淋病是性传播疾病的主要病种之一。近年来,淋球菌的耐药菌株增多,造成了多种药物的治疗失败。本文概述了淋球菌产生多重耐药性机制的研究进展,指出染色基因特异位点的突变对淋球菌膜蛋白传递耐药系统的影响是该菌产生对多种抗生素耐药的主要原因;青霉素结合蛋白及质粒耐药可同时起作用。     

新型MGB探针在沙眼衣原体实时PCR检测中的应用

为建立基于TaqMan-MGB探针的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测方法,探讨其临床应用价值,用 PCR法扩增沙眼衣原体隐蔽质粒pLVG440 2 464～2 980 nt段,并克隆入pMD18-T载体用作参比模板,设计一对引物和一个TaqMan-MGB探针,优化反应条件,建立沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统,并运用该系统同时应用连接酶链式反应(LCR)法对临床标本进行检测.结果显示所建立的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统,最低检测限度为1 DNA拷贝每反应;在10⁰～10⁹ DNA拷贝每反应范围内,C_t值(每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数）和DNA拷贝数呈线性关系（r＞0.990）;对临床标本检测结果同LCR分析结果吻合率为100%.以上结果表明,所建立的基于TaqMan-MGB探针的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统具有敏感性高、特异性强和线性检测范围广等特点,适用于对沙眼衣原体进行大规模筛选.     

PCR技术在检测鼠金黄色葡萄球菌中的应用研究

目的　建立实验大小鼠金黄色葡萄球菌的快速检测方法———PCR法。方法　根据已公布的金黄色葡萄球菌耐热核酸酶nuc基因的序列 ,设计并合成一对特异性的引物 ,利用PCR技术扩增nuc基因片段。对金黄色葡萄球菌和其他非金黄色葡萄球菌菌株抽提的DNA进行扩增。结果　金黄色葡萄球菌PCR产物出现 6 6 8bp的特异性DNA扩增片段 ,而其他非金黄色葡萄球菌未出现扩增片段 ,证实了合成的引物对金黄色葡萄球菌具有特异性。将抽提的金黄色葡萄球菌DNA进行系列稀释 ,测定此PCR体系的敏感性 ,结果显示 ,该PCR体系能检出 3pg金黄色葡萄球菌DNA ,且从抽提DNA到PCR扩增及电泳结束仅需 4h。结论　本研究所建立的扩增耐热核酸酶nuc基因检测鼠金黄色葡萄球菌的PCR方法 ,具有快速、可靠、敏感和特异的特点 ,可用于临床样品和金黄色葡萄球菌感染时的检测 ,适合应用于实验大小鼠的监测。     

PCR法快速检测临床标本中结核杆菌DNA

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）快速检测临床标本（脑脊液、胸水、腹水、血、痰液）中的结核杆菌ＤＮＡ,特异性扩增片段１２３ｂｐ,为结核杆菌的特异性重复序列ＩＳ６１１０部分基因。ＰＣＲ检测人型结核杆菌的敏感性达１０ｆｇＤＮＡ。临床标本的ＰＣＲ检测阳性率（２３．３％）明显高于抗酸染色涂片（２．９％）和细菌培养（５．７％）的阳性率（Ｐ〈０．０５）。通过设立对照系统及对扩增产物酶切分析,表明该法无假阴性结果（特异     

Nested PCR在检测牛白血病病毒前病毒中的应用

用ＮｅｓｔｅｄＰＣＲ检测牛白血病病毒的前病毒形式。从牛白血病病毒基因ｇｐ５１上选择两对引物进行ＮｅｓｔｅｄＰＣＲ体外扩增,产物经２％ａｇａｒｏｓｅ凝胶电泳和用生物素标记的探针鉴定,证实其特异性。结果表明该方法能从两个ＢＡＴ－ＢＬＶ细胞内检测出ＢＬＶ的前病毒ＤＮＡ形式。