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1.
RT—PCR检测蓝舌病毒技术的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
蓝舌病毒 (BluetongueVirus,BTV)是呼肠孤病毒科 (Reoviridae)环状病毒属 (Orbivirus)的代表种 ,含10个节段的双链RNA(dsRNA)作基因组。其中 ,L2节段编码BTV型特异性抗原VP2 ,L3节段和S7节段编码群特异性抗原多肽VP3和VP7。其中 ,VP7是BTV粒子的主要结构多肽之一 ,其编码基因序列保守。VP7具有高度的抗原性 ,能刺激被感机体产生强的群特异性免疫反应[1] 。蓝舌病毒的易感宿主是牛、羊及野生反刍动物 ,死亡率高达 6 0 %~ 70 %以上 ,并且至今仍无有效的防治措施 ,对畜牧业… 相似文献
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大花蕙兰的组织培养和快速繁殖 总被引:19,自引:1,他引:18
1植物名称 大花蕙兰 (Cymbidiumfaberi )。2 材料类别 幼芽、幼根。3 培养条件 以VW和 1 2MS为基本培养基。诱导圆球茎培养基 :(1 )VW 6 BA 0 .3mg·L-1(单位下同 ) KT 0 .3 NAA 1 .2 CM 1 5 0ml·L-1 0 .2 %活性炭 ;(2 )VW 6 BA 0 .3 KT 0 .3 NAA 2 .0 0 .3 %CH CM 1 5 0ml·L-1 0 .2 %活性炭。圆球茎增殖培养基 :(3 )VW 6 BA 0 .3 KT 0 .3 NAA 0 .2 0 .2 %活性炭。壮苗生根培养基 :(4) 1 2MS GA1 .0 NAA 0 .1 1 5 %香蕉泥 ;(5 ) 1 2MS… 相似文献
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应用电激法和聚乙二醇法以及脂质体协调的上述两种方法对烟草和青菜原生质体进行烟草花叶病毒TMV-RNA的导入试验,并应用酶标免疫技术、电镜观察、半叶接种和十无烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法对在原生质体中增殖的TMV进行鉴定。实验证明,虽然电激法和聚乙二醇法均能有较地将处源病毒基因导入植物原生质体,但经阳离子脂质体处理后的TMV-RNA,其转染效率可提高10倍以上。TMV在原生质体转染48小时后 相似文献
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1 植物名称 玉叶金花 (Mussaendapubescens)。2 材料类别 嫩茎、幼叶。3 培养条件 以MS为基本培养基。诱导愈伤组织附加 :( 1 )NAA 0 .2mg·L- 1 (单位下同 ) KT0 .2 5 6 BA 0 .1 ;( 2 )NAA 0 .5 KT 0 .2 5 6 BA0 .1 ;( 3)NAA 0 .5 6 BA 0 .1 ;( 4 ) 2 ,4 D 0 .2 KT0 .1。继代培养基附加 :( 5 ) 6 BA 4 KT0 .2 5 IAA 0 .5。不定芽诱导及增殖培养基附加 :( 6)6 BA 4 KT 0 .5 IAA 0 .1。生根培养基 :( 7)1 /2MS IBA 0 .5。上述培养基均含 0 .7%琼脂、3%蔗… 相似文献
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紫叶酢浆草的组织培养 总被引:19,自引:1,他引:18
1 植物名称 紫叶酢浆草 (Oxalisviolacea)。2 材料类别 叶片、叶柄。3 培养条件 培养基有 :( 1 )MS NAA 0 .5mg·L- 1 (单位下同 ) ;( 2 )MS IBA 1 .0 NAA 0 .5 ;( 3)MS IBA 1 .0 NAA 0 .5 KT 1 .0 ;( 4 )MS IBA 0 .5 NAA 0 .5 KT 1 .0。以上培养基含蔗糖 2 5 g·L- 1 、琼脂 0 .5 %,pH 5 .8。培养温度为 2 2~ 2 5℃ ,照光 1 2h·d- 1 ,光照度为 2 0 0 0lx。4 生长与分化情况4.1 叶柄的分化情况 取盆栽紫叶酢浆草叶片与叶柄 ,流水洗净 ,用 70 %酒精浸洗 30s… 相似文献
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人类疱疹病毒6型感染细胞免疫学特性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
采用间接免疫荧光法、APAAP法及MTT法,研究了人类疱疹病毒6型(HHV6)中国南京地方株CN5感染细胞病毒抗原表达的形态学和动力学特征、CD抗原表达阳性细胞百分率的变化及PHA诱导的细胞增殖反应的改变。结果显示,CN5感染脐血单个核细胞(CBMCs)后8~12h即可在细胞内检出病毒抗原,至接种后48h,病毒抗原阳性细胞可达36%;CN5感染CBMCs和成人外周血单个核细胞(PBMCs)后可引起两者CD3阳性细胞减少、CD4阳性细胞增多,而对CD2、CD8、CD45RA阳性细胞百分率未见明显影响;CN5感染细胞裂解液对PHA诱导的PBMCs增殖反应具有抑制作用,这种抑制作用与该裂解液的蛋白浓度之间呈一剂量依赖关系,且可被HHV6抗血清所逆转。 相似文献
7.
采用异硫氰酸胍(GuSCN)和硅藻从B95-8细胞中快速抽摸板DNA。根据EB病毒(EBV)B95-8株DNA全序列及编码EBV胸苷激酶(TK)的开放读框BXLF1的结构,设计合成一对引物,并在引物的5′一端分别引入EcoRI和PstI切点,用PCR技术扩增出一含完整的EBVTK基因的1.843KbDNA片段,NcoI酶切分析鉴定,EcoRI/PstI双酶切PCR产物和载体,使目的基因定向克隆至选 相似文献
8.
广东两株人免疫缺陷病毒的分离和鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
从我省两名经性途径感染艾滋病的病人中采血,分离外周血单核细胞(PBMCs),将其与正常人PBMCs共培养分离人免疫缺陷病毒(HIV),3周后检测上清HIV-1p24抗原(ELISA法)超过阈值。将共培养第四周细胞和上清分别感染H9细胞(T细胞淋巴瘤传代细胞),一周后检测HIV-1 p24怕,证明有病毒生长。用HIV-1 ENV基因引物的套式聚合酶链反应(Nested PCR)证实,两株新分离的病毒 相似文献
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蒟蒻薯的组织培养及植株再生 总被引:1,自引:0,他引:1
1 植物名称 薯 (Taccachantrieri) ,又名箭根薯、老虎须、黑蝴蝶等。2 材料类别 种子或茎尖。3 培养条件 种子萌发培养基 :( 1 ) 1 /2MS ;( 2 )MS。芽诱导及增殖培养基 :( 3)MS + 6 BA 3.0~5 .0mg·L- 1 (单位下同 ) +NAA 0 .3~ 0 .0 5 ;( 4 )MS+ 6 BA 2 .0~ 1 .0 +KT 2 .0~ 1 .0 +NAA 0 .0 5。生根培养基 :( 5 )MS + 6 BA 0 .5 +IBA 0 .3;( 6)1 /2MS +IBA 0 .5。以上培养基均附加 0 .7%琼脂 ,pH 5 .4~ 5 .6。培养基 ( 1 )、( 2 )、( 6)的糖用量为 2 0g·L- 1 ;培养… 相似文献
11.
在新疆番茄斑驳病株上分离出一种球状病毒,回接到番茄上产生斑驳症状。病毒粒体为20面体,平均直径25nm。经汁液摩擦接种可感染昆诺阿藜、苋色藜、蚕豆、番茄等18种植物,不感染菜豆、豇豆、豌豆、六叶茄、黄瓜等。可由桃蚜传毒。在琼脂双扩散试验中,能与蚕豆萎蔫病毒(BBWV)抗血清产生明显的沉淀线,与豇豆花叶病毒(CpMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)抗血清均不发生反应。纯化病毒紫外扫描呈典型的核蛋白吸收叫线,病毒衣壳蛋白由两种蛋白亚基构成,其分子量分别为45900和20400道尔顿,由18种氨基酸约255个氨基酸残基组成。病毒核酸是双组份的,它们的分子量为1320000和2340000道尔顿。根据上述结果认为该病毒是蚕豆萎蔫病毒侵染番茄的一个株系。 相似文献
12.
苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)大立方形多角体突变株的分子生物学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
利用空斑技术,从既能形成多角体又含TK酶基因的苜蓿丫纹夜蛾重组核型多角体病毒AcMNPV-TK中,纯化了一株形成大立方形多角体的病毒突变株AcMNPV-TKmt513。用EcoRI、PstⅠ、BglⅡ及KpnⅠ等限制性内切酶对它做了酶切分析,并克隆了多角体蛋白全基因及其侧翼部分的片段。对所克隆的部分全序列测定结果,发现在多角体蛋白基因读码框内只出现了一个碱基的突变,导致了第25位的氨基酸密码子由GGT变为GAT,该位氨基酸由甘氨酸(Gly)变为天冬氨酸(Aspq)还利用PCR技术扩增出突变了的多角体蛋白基因部分片段,并将它克隆入转移载体质粒pEV55,与不形成多角体的重组病毒TnNPV-HBsD4DNA共转染Sf9细胞,结果产生同样的大立方形多角体病毒。 相似文献
13.
Sasaki等在ProcNatlAcadSciUSA 2 0 0 0年第 4期上报道了一种不依赖甲硫氨酸的翻译起始方式[1] 。PSIV (Plautiastaliintestinevirus)是一种昆虫RNA病毒 ,属蟋蟀麻痹样病毒组 (Cricketparalysis likeviruses) ,为正链RNA病毒。属于该组的还有DCV、RhPV、HiPV等。该组病毒的理化性质与哺乳动物的小RNA病毒 (picornavirus)相似 ,但基因图 1 (A)PSIV基因组结构 ;(B)预测的外壳蛋白编码区上游的茎环结构组织不同。… 相似文献
14.
王汉中 《Virologica Sinica》1995,10(4):351-355
用NestedPCR检测牛白血病病毒的前病毒形式。从牛白血病病毒基因gp51上选择两对引物进行NestedPCR体外扩增,产物经2%agarose凝胶电泳和用生物素标记的探针鉴定,证实其特异性。结果表明该方法能从两个BAT-BLV细胞内检测出BLV的前病毒DNA形式。 相似文献
15.
双生病毒 (Geminivirus)是一种具有孪生颗粒形态的单链环状DNA植物病毒[1] 。根据基因组结构特征及传播介体 ,双生病毒可分为三个亚组[1] :亚组Ⅰ双生病毒全部为叶蝉传播的单组份基因组病毒 ,基因组大小在 2 .6~ 2 .8kb之间 ,其代表病毒是玉米条纹病毒 (MSV) ;亚组Ⅱ双生病毒是单组份基因组病毒 ,基因组大小在 2 .7~ 3.0kb之间 ;亚组Ⅲ双生病毒全部为粉虱 (Bemisiatabaci)传播 ,基因组大小为 2 .5~ 2 .8kb ,除番茄曲叶病毒TLCV AUS[2 ] 等几个病毒为单组份基因组外 ,大多数亚组Ⅲ双生病病毒… 相似文献
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核桃的组织培养和快速繁殖 总被引:12,自引:0,他引:12
植物名称 薄壳香核桃 (Juglansregiacv .“bokexiang”)。2 材料类别 3~ 4年生嫁接苗。。3 培养条件 培养基 :( 1 ) 1 /2DKW BA1~ 2mg·L-1(单位下同 ) IBA 0 .0 1 Vc2~ 5 ;( 2 )DKW BA2 NAA0 .5 GA0 .5 ;(3)DKW BA 1~ 2 IBA 0 .0 1 ;( 4 ) 1 / 2DKW IBA 2 NAA 2 ;( 5 )蛭石培养基。蔗糖浓度为 3.0 % ,琼脂浓度为 0 .6 %~ 0 .8% ,pH 5 .8,培养温度 ( 2 5± 2 )℃ ,每天光照1 2h ,光照度 1 5 0 0~ 2 0 0 0lx。4 生长与分化情况4.1 芽的诱导… 相似文献
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条纹十二卷的组织培养与快速繁殖 总被引:8,自引:2,他引:6
1 植物名称 条纹十二卷 (Haworthiafasciata) ,大型和小型植株各 1种。2 材料类别 花葶。3 培养条件 启动脱分化培养基 :( 1 )改良MS KT 2mg·L- 1 (单位下同 ) NAA 1 IBA 0 .5 2 0 %椰子液体胚乳 ;不定芽诱导及增殖培养基 :( 2 )改良MS 6 BA 1 KT 2 IBA 0 .4 2 0 %椰乳 ;长期继代增殖培养基 :( 3)改良MS 6 BA 1 NAA0 1或 ( 4 )改良MS KT 2 IBA 0 2 ,省去椰乳 ;诱导生根培养基 :( 5) 1 /2MS(大量元素减半 ,微量元素免用 ) IBA 0 3。上述培养基均加 3%白… 相似文献
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星花绣线菊的组织培养及快速繁殖 总被引:11,自引:3,他引:8
1 植物名称 星花绣线菊 (Spiraeajaponicavar.stelleris)。2 材料类别 茎尖、茎段、叶片、叶柄。3 培养条件 ( 1 )愈伤组织诱导培养基 :MS 2 ,4 D 2 .0mg·L- 1 (单位下同 ) KT 0 .3;( 2 )愈伤组织继代培养基 :6,7 V 2 ,4 D 2 .0 KT 0 .2 5 NAA 1 .0 LH 2 0 0 0 ;( 3)芽诱导培养基 :MS 6 BA 2 .0 NAA 0 .1 ;( 4 )芽增殖培养基 :MS 6 BA0 .2 5 NAA 0 .1 ;( 5 )生根培养基 :1 /2MS 6 BA0 .2 5 NAA 0 .5。上述培养基的蔗糖含量为 3% ,琼脂为 0 .7% ,… 相似文献
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蔗糖密度梯度离心法提纯斜纹夜蛾核多角体病毒($Spodoptera litura multinucleocapsid nucleopolyhdrovirus, SpltMNPV)包埋型病毒粒子(polyhedra-derived virus,PDV),以此病毒粒子作抗原,免疫家兔获得抗血清;用SDS裂解缓冲液提取斜纹夜蛾幼虫中肠组织细胞总蛋白。采用病毒铺覆蛋白印迹技术(VOPBA),利用抗PVD抗血清对病毒受体进行检测,结果表明斜纹夜蛾中肠细胞总蛋白中40kD、73kD、85kD的三种蛋白能够结合PDV。 相似文献
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侵染新疆甜菜的两种病毒分离物的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
在新疆甜菜的根部和叶片分离到两个球状病毒分离物。从病毒形态、生物学及物化性质等研究结果证明这两个分离物实是一种病毒。病毒粒体力20面体,直径约28nm,回接到甜菜上产生环斑和沿脉线纹最后形成坏死斑。此外还侵染苋色藜,昆诺阿黎,番杏,菠菜等,引起局部坏死斑。在普通烟,心叶烟,菜豆,黄瓜,蕃茄上无症状侵染,病毒致死温度为70℃,10分钟。体外存括期13天以上,冻干病叶7年后仍有侵染力。通过PEG沉淀、差速离心、琼脂糖柱层析及蔗糖梯度离心,可得到较高浓度的纯化病毒,病毒的紫外吸收最低值在245nm,最高值在260nm。经SDS-PAGE测定,病毒外壳蛋白的分子量为2.7×10 ̄4道尔顿,病毒基因组核酸为三个组份,分子量分别为3.08kb,1.28kb和0.85kb。在琼脂双扩散实验中,能与番茄黑环病毒(TBRV)抗血清产生较弱的沉淀线,与黄瓜花叶病毒(CWV)、烟草环斑病毒(TRSV)、烟草坏死病毒(TNV)、香石竹环斑病毒(CaRSV)的抗血清不发生反应。 相似文献