大型除菌过滤器在重组干扰素生产中的应用

为适应大规模生产的需要,用Millipore293型滤器取代常用的赛氏滤器对重组干扰素α1b及γ进行除菌过滤,此种大型滤器不仅滤膜面积大,而且单位面积过滤量也有明显增加,因此,过滤速度显著加快,可适应大规模生产的应用,用此二种滤器作除菌过滤对干扰素活性无影响,过滤制品前用2%白蛋白预滤可减少滤膜吸附干扰素作用,Millipore和赛氏滤器除菌过滤后热原质均能达到肌肉注射标准,且大部分能达到静脉注射标准,有个别制品用赛氏滤器过滤后热原质达至不到静脉注射标准者,用Millipore滤器复滤后,可以合格,上述结果表明用Milli-pore293型滤器制备重组干扰素α1b及γ是切实可行的。     

完整性测试在除菌过滤中的应用

为保证和及早预见滤过液中的细菌和其它颗粒全部被拦截,利用压缩空气通入内含亲水性滤芯的过滤器,用完整性测试仪自动监测过滤器的完整性。结果显示人血白蛋白经过完整性测试通过过滤器除菌滤过后无菌试验合格率100％。说明完整性测试方法能保证和预先证明除菌过滤器能够达到除菌效果。     

呼吸机呼气滤器的研制及防护效果评价

为防止呼吸机呼气管道中的含菌气体扩散污染病房空气,引发交叉感染。利用HEPA材料、活性炭、特殊的缓释杀菌滤材,研制成一套呼吸机呼气除菌过滤装置。经参照有关标准用物理模拟气溶胶颗粒(0.28-0.34um)及微生物气溶胶测试,过滤效率>99.995％,微生物气溶胶滤除率达100％。气流阻力<230Pa,完全能满足临床呼气机的过滤除菌使用条件。     

空气净化器除菌和净化空气中颗粒物效果的比较

按《消毒技术规范》(2002年版)进行自然菌除菌实验,和按国家标准GB/T 18801—2015《空气净化器》进行颗粒物净化效果实验,比较不同品牌的空气净化器除菌效果和对颗粒物净化效果。实验结果表明,紫外线空气净化器除菌效果为89. 13%,洁净空气量(CADR)为10. 3 m~3/h;光催化空气净化器除菌效果为93. 23%,CADR为150. 1 m~3/h;过滤式空气净化器除菌效果为62. 47%,CADR为273. 1 m~3/h;负离子净化器除菌效果为91%,CADR为408. 7 m~3/h。在测试的四种空气净化器中,除菌效果依次为光催化空气净化器负离子净化器紫外线空气净化器过滤式空气净化器,颗粒物净化效果依次为负离子净化器过滤式空气净化器光催化空气净化器紫外线空气净化器。在选择空气净化器时,针对不同的污染对象,可选择相应用途的空气净化器。     

破伤风杆菌发酵液澄清过滤试验

目的:考察表面滤器PolysepⅡCGW3和深层滤器Millistak+X0HC用于破伤风杆菌发酵液澄清过滤的效果,选择出满足实际生产要求的滤器。方法:对表面滤器PolysepⅡCGW3采用Vmax试验,对深层滤器Millistak+X0HC采用Pmax试验,通过实验室小规模NFF(常规过滤)试验结果,计算满足实际工艺生产需要的膜面积,并择优进行放大试验。结果:两种滤器均可满足工艺要求,对破伤风毒素吸附甚微。Millistak+X0HC滤器过滤后滤液浊度为2.06NTU,所需最低滤膜面积为1.18m2。PolysepⅡCGW3滤器过滤后滤液浊度为4.76NTU,所需最小滤膜面积为1.29m2。选择PolysepⅡCGW3滤器进行放大试验并与板框滤器进行比较。讨论:根据小量及放大试验结果,综合考虑经济成本、工作时间及操作性,PolysepⅡCGW3滤器较板框滤器更适用于生产。     

培养基灭菌方式对细菌分离效率的影响

自然界蕴含大量未/难培养微生物,分离这些微生物对理论研究和资源开发具有重要意义。本研究使用高压灭菌和过滤除菌方式制备培养基,采用稀释涂布方法,从红树林灰泥样品中分离获得123株细菌,通过16S rRNA基因序列分析对其进行鉴定,进而探究培养基灭菌方式对细菌分离效果的影响。结果表明：过滤除菌培养基生长的单菌落数目（339±82）个显著多于高压灭菌培养基生长的单菌落数目（179±65）个;两种培养基分离细菌的群落结构在门、科和属分类水平上总体相似,但优势类群的数目和少数类群存在差异;过滤除菌培养基分离细菌的Shannon Wiener’s指数、均匀度、新种率、基因多样性均高于高压灭菌培养基,而其与近缘模式菌株相似度的平均值和中位数则低于高压灭菌培养基。因此,过滤除菌培养基分离获得细菌的多样性、均匀性和新颖性均高于高压灭菌培养基。本研究首次探究培养基灭菌方式对细菌分离效果的影响,具有更高分离效率的过滤除菌培养基为未/难培养微生物菌株资源获取提供了借鉴。     

家用压力锅改装为除菌过滤用耐压容器

细胞及组织培养需要一种专用耐压容器,进行培养基、血清和胰蛋白酶等的除菌过滤。市面出售国产此种不锈钢容器每只数百元。1978年我们将普通家用压力锅(内径24cm,北京产),略加改装,再配上其它部件,经多年使用,效果良好,而所需费用仅数十元。现将此装置介绍于下。一、压力锅的改装加工两个不锈钢流出咀(图1),一个供排气用,一个供滤液流出用。在锅盖上打孔,用剪成的橡胶垫圈安在孔上,将流出咀拧紧在锅盖上。全套装置如图2所示。除滤器下端用一小段乳胶管以外,其余都用普通橡皮管连接。     

家用压力锅改装为除菌过滤用耐压容器

细胞及组织培养需要一种专用耐压容器,进行培养基、血清和胰蛋白酶等的除菌过滤。市面出售国产此种不锈钢容器每只数百元。1978年我们将普通家用压力锅(内径24cm,北京产),略加改装,再配上其它部件,经多年使用,效果良好,而所需费用仅数十元。现将此装置介绍于下。一、压力锅的改装加工两个不锈钢流出咀(图1),一个供排气用,一个供滤液流出用。在锅盖上打孔,用剪成的橡胶垫圈安在孔上,将流出咀拧紧在锅盖上。全套装置如图2所示。除滤器下端用一小段乳胶管以外,其余都用普通橡皮管连接。     

流感裂解疫苗生产中沙门菌和微生物限度的监控研究

通过对2008年流感裂解疫苗生产中的监控,结果显示,流感病毒接种鸡胚尿囊液中未检出沙门菌,除菌过滤前微生物限度均小于10CFU/ml、细菌内毒素均小于25EU/ml,纯化过程去除了99%的杂蛋白。表明生产中使用的健康鸡胚尿囊液是符合生物制品规程的要求,现行生产工艺对微生物限度和细菌内毒素的控制是有效的,现行纯化过程对病毒液的纯化是有效的。     

环境保护上的应用

路易斯安那州立大学与Manvile过滤与矿物公司正在合作建设一座试验工厂以处理诸如氯化烃类和多环芳香物等有毒废物处理,使用的是预先接种了微生物菌株的硅藻土滤器     

环境保护上的应用

<正> 852973一种新型的细胞分离滤器[英]/Brown,D.E.…//Biotechnol.Lett.-1984,6(6).-401～406[译自DBA,1984,3(18),84-08923]介绍了一种用专门设计的多孔不锈钢管过滤介体,在无菌状态下从细胞悬浮液分离出滤液的滤器的性能。用此滤器对在葡糖一无机盐培养基中生长了90小时的里西木霉     

胰蛋白酶的高压灭菌

胰蛋白酶在酸性条件下经过高压灭菌,仍有活力.在细胞培养中,以这种方法对胰蛋白酶消毒比常规的过滤除菌更加简便,经济,安全可靠.     

基于分级过滤的自然水体原核微生物群落分析

自然水体中微生物种类丰富,采集了上海周边的湖水、河水、海(岸)水、井水四类水体各两处样品,设计了含0.1μm终端截留孔径的半自动分级过滤装置分离富集不同粒径的水体微生物,使用原核微生物通用引物对16S rRNA基因V3+V4区扩增,高通量测序获得序列,对四类水体中的微生物群落进行比较分析,关注了能穿透0.22μm常规除菌过滤孔径的超微小微生物。结果显示水体环境主导了微生物的群落差异,河水与湖水中的群落总体接近,不同于海(岸)水和井水;海(岸)水和井水的微生物群落差异较大。0.1μm上截留的优势超微小微生物在河水与湖水样品中均为Proteobacteria门SAR11 clade目的Clade Ⅲ和Actinobacteria门Sporichthyaceae科HgcI clade,海(岸)水中为Proteobacteria门SAR11 clade目的Clade Ia和Nanoarchaeota门Woesearchaeia古菌,井水中为Nanoarchaeota门Woesearchaeia属古菌以及未定域或未分类的微生物。其中未定域的微生物16S rRNA基因在系统发育树上单独成簇,可能是古菌的一个新类型。本研究所使用的分级过滤装置显示了在发掘超微小微生物上的潜力。     

定量聚合酶链反应评估去白细胞滤器去除血液成分中巨细胞病毒的效果

为了评估目前常用的去白细胞滤器去除血液成分中人巨细胞病毒( HCMV) 的效果, 我们在献血员中筛选获得HCMV-IgG、pp65 皆阴性的血液, 分离外周血单个核细胞( PBMC) , 将HCMV 感染的人成纤维细胞与PBMC 共培养, 感染HCMV 的PBMC 经抗人成纤维抗体和抗CD45 磁珠2 次分选纯化后, 将CD45 + 单核细胞加回原全血中, 建立HCMV 潜伏感染的模型, 再用去白细胞滤器过滤。用实时聚合酶链反应( PCR) 定量测定过滤前、后血液样本中的病毒载量, 残留成纤维细胞所含的HCMV 通过定量反转录PCR( RT - PCR) 扩增脯-4-羟化酶exon12a mRNA 来校正。结果显示, 使用去白细胞滤器后, 每单位( 200 ml) 全血血液中, 白细胞的去除率为99. 98% 。全血中平均HCMV 病毒载量从3 742 拷贝/ μl 降至22. 57 拷贝/ μl, 降低2. 50 log10 , 说明去白细胞滤器虽然可明显减少全血中HCMV 病毒的载量, 但并不能完全去除病毒。     

关于肾小球选择性通透性的近代见解

近年来认识到,肾小球既是区别分子大小的滤器,又是区别分子电荷的滤器。在肾小球受到某种中毒性损伤时,肾小球壁固定负电荷丧失,影响对电荷的选择性过滤,可发生蛋白尿和足突起融合等病理改变。     

甲烷氧化混合菌的保藏方法研究

【目的】甲烷氧化混合菌是自然界中吸收甲烷的关键微生物,在甲烷氧化混合菌的研究和应用中,首先要解决其长期稳定保藏的问题,保藏方法应能有效保持菌群结构和功能的完整性、稳定性。【方法】以从煤矿土壤富集得到的两种结构稳定的甲烷氧化混合菌为实验体系,研究对比了冷藏法、低温冷冻法、石蜡油冷冻法、甘油冷冻法4种保藏方法,考察保藏前后混合菌的生长状况、MMO活性、菌群结构等。【结果】保藏6个月后,除甘油冷冻法以外,经其它3种方法保藏的混合菌,都具有与保藏前相当的细胞密度、甲烷氧化能力、MMO酶活以及传代稳定性,且DGGE图谱显示保藏前后的菌群结构变化不大。【结论】这3种保藏方法都可以有效的保持甲烷氧化混合菌功能和菌群结构的稳定性。     

酶和发酵工程

891们一;从酵母中制取(蔗糖)转化酶[专今艺]/丁交i;一J:,5 chkin,0.…/Ul又Patent,Appi。(资工}2198731。Pub.22.06.88.、、ppl。(全工1 8726655,filed 20.11.86〔译自CBA,1988,(9),3778〕 解母总浮细胞在纺锤形研磨器中,在微小的玻璃珠的作用下,将它们不断地破碎,制得含有转化酶的溶液用片状滤器过滤,得到澄清的滤液、再使用超滤器(微滤器联合装置)使溶液首先通过超滤分离器再经过微滤器。这样制得的含有转化酶的溶液中再加入甘油以使其稳定。(王颖)891112促进水相中脂类小球的形成以及改善其稳定性、包容比和分散作用的方法〔专,英〕/…     

基于ATP的微菌含量样品快速检测方法的研究

本实验分别采用ATP生物发光法和营养琼脂平板培养法对血透用水中微量细菌总数进行检测,针对ATP检测方法在微菌含量样品检测中的应用限制,设计并实现了新的集菌方式和进样方式。首先将被测样品中的微量细菌浓缩到集菌膜上,再原位使其充分裂解,然后取微量液体进行测试,这样解决了现有ATP生物发光监测仪微量进样测试要求的弊端。通过这种改进,成功实现了利用ATP发光法快速检测微量浓度菌液。利用该检测装置和测试方法,我们尝试了检测0-100CFU/mL的被测样品,并用平板培养法进行定标,实验结果表明:在2—100CFU/mL被测范围内,其线性度和灵敏度较好,相关系数达到0.99887。这就为微菌含量样品快检领域提供了新的可尝试的实验方法和机遇。     

培养基除菌过滤在百日咳菌苗生产中的应用

经一系列试验证实百日咳菌大罐培养浓度的下降与培养基中不耐热营养因子不足有关,将培养基的高压灭菌方式改为除菌过滤,保留热不稳定营养因子,可以提高百日咳菌大罐培养浓度;优化酸沉淀条件后,提高了菌苗回收率,从而节省了大量培养基,缩短了生产时间,获得了良好的经济效益。     

纺织基人造血管几何特征表征的实验研究

人造血管的壁厚和松弛内径是其主要的几何特征参数。本文中首先依据国际标准ISO 7198的要求设计了测试人造血管松弛内径的测试定规,并对人造血管样品进行了测试。然后对人造血管壁厚的测试方法进行了初步探讨。