蛋白质化学失活的統計力学研究

使用专一性试剂来改变蛋白质侧链基团的化学性质以破坏蛋白质的生物活性是研究蛋白质活性中心的组成的重要方法之一。考虑到(一)能和试剂发生反应的基团并不一定全部都是表现生物活性所必需的;(二)同类基团由于它们在肽链中所占位置不同,因受邻近基团的影响,可能具有与试剂不同的反应性;(三)试剂的专一性不太高,以致能与几类基团都能起反应;本文从统计力学理论出发,推导出了蛋白质的存活率与被破坏的基团总数之间的定量关系,并对几个简单的例子进行了计算。本文还讨论了本文的结果与Koshland动力学理论以及鄒承鲁的理论之间的联系,发现作了一些假定之后,本文的一些公式就可简化为他们文章中的一些公式。     

活与失活的蛔虫卵的鉴别方法

活与失活的蛔虫卵的鉴别方法通过本实验不仅能掌握快速而简便地鉴别蛔虫卵活与失活的方法,而且也可作为粪便或污水处理过程中检查蛔虫卵生活力的一个可靠指标。因为蛔虫卵具有蛋白膜,用一般鉴别细胞活与失活的染料极易使蛋白膜着色,所以不能鉴别卵的死活。若用强碱性氧...     

植物转基因的失活与沉默

植物外源基因转化研究揭示有相当比例的植物转基因表现失活与沉默。这一现象涉及转基因重复拷贝之间的异源配对,基因顺序的甲基化,转录后的衰退调控以及插入位点染色质高级结构的改变,并与外源基因的随机整合有关。克服转基因失活的方法包括单拷贝转基因子代筛选,构建细胞核基质支架附着区栽体以及采用具有特殊功能的启动子与增强子。转基因失活问题的发生提示人们．外源基因的转化与整合存在一些特有的遗传机制。     

植物转基因的失活与沉默

植物外源基因转化研究揭示有相当比例的植物转基因表现失活与沉默。这一现象涉及转基因重复拷贝之间的异源配对,基因顺序的甲基化,转录后的衰退调控以及插入位点染色质高级结构的改变,并与外源基因的随机整合有关。克服转基因失活的方法包括单拷贝转基因子代筛选,构建细胞核基质支架附着区载体以及采用具有特殊功能的启动子与增强子。转基因失活问题的发生提示人们,外源基因的转化与整合存在一些特有的遗传机制。     

紫外线使苏云金芽孢杆菌伴孢晶体失活机理的研究

用电镜、电泳、生物鉴定等方法,研究了紫外线对苏云金芽孢杆菌库斯塔克变种的伴孢晶体的影响。结果表明,紫外线能破坏伴孢晶体的表面结构和形态,降低伴孢晶体在碱性液和蚕胃液中的溶解度,5小时以上的长时间照射,能导致伴孢晶体完全不溶,因而不能降解为具有杀虫活性的毒素蛋白而失活。     

大鼠肾脏内有使内皮素1失活的金属内切肽酶

大鼠肾脏内有使内皮素１失活的金属内切肽酶内皮素（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎｅ,ＥＴ）具有广泛的生物学活性,在许多疾病中都有重要的发病学意义。但其在组织和血液中的代谢失活过程尚未完全阐明,通常认为中性内切肽酶有终止／或调节ＥＴ的作用,可是中性内切肽酶对多种肽...     

酶的抗氧化失活

有些酶对氧十分敏感,由此而引起失活,影响了它们的实际应用。本文简述了一些抗氧化失活的方法以及蓬勃发展的生物工程技术为解决这一问题所展示的诱人前景。     

失活蓝藻的趋光性

将固氮鱼腥藻置于０．５ｍｏｌＫ３ＰＯ４,７％甲醛或３６－３８％甲醛,７０％或９５％乙醇,冰醋酸,或将藻丝悬浮液煮沸或经１５磅１５分高温高压处理之后,藻丝立即变色失活,但仍能向光照方向移动和聚集,此种能力保持１－２周。在１ｍｏｌＮａＯＨ或ＨＣｌ溶液中,此种能力丧失。失活的东湖项圈藻,钝顶螺旋藻和组囊藻也有趋光性。     

微波加热使酶失活——研究脑化学的一种新技术

脑的功能活动可以从各个角度进行研究。从神经化学方而来看,希望所测物质的含量尽可能反映出动物死前瞬间的实际值。这就要求在最短(以毫秒计)时期内使脑内的酶系统停止活动,以避免死后变化,这一直是神经化学研究中的一个难题。由于合成酶和降解酶不一定同时失活,某种神经化学物质的死后变化可以是含量升高也可以是降低。例如大鼠断头后30秒内,脑内环-磷酸腺苷(cAMP)的含量急剧升高,至90秒     

肌酸激酶胍变性与失活的关系

肌酸激酶(CK2.7.3.2)催化磷酸肌酸与ATP相互转化的反应。姚启智等曾对其在盐酸胍中的构象变化与失活动力学进行了比较研究,发现在低浓度变性剂中,失活的速度与程度都远大于构象变化。此酶为球蛋白,由两个可以解离的相同亚基组成,分子量82,600。本文在最适pH附近(pH9.0)测定了不同浓度盐酸胍中酶的沉降系数,对其解聚与构象变化进行了研究,以探讨快失活、慢构象变化与解聚的关系。 兔肌肌酸激酶的提取、活力测定、盐酸胍的纯化方法与文献[1]相同。沉降系数用日立282-型分析超速离心机于20℃左右测定,Schlieren光学系统,标     

使肥胖与糖尿病联系的蛋白质resistin

美国费城宾夕法尼亚大学研究者在 2 0 0 1年 1月 18日Ｎａｔｕｒｅ上报道 ,他们在小鼠研究中鉴定了一种激素 ,称为ｒｅｓｉｓｔｉｎ ,其由脂肪细胞分泌 ,在Ⅱ型糖尿病中似乎起着直接的作用。健康的小鼠在接受额外的ｒｅｓｉｓ ｔｉｎ两天后便发生胰岛素抗性 .过度肥胖的小鼠天然产生大量ｒｅｓｉｓｔｉｎ ,当用药物抑制其ｒｅｓｉｓｔｉｎ作用后 ,它们便更为有效地加工葡萄糖 .研究者已鉴定了人的编码ｒｅｓｉｓｔｉｎ的基因 ,但他们尚末测定人体内ｒｅｓｉｓｔｉｎ的作用。在同一期Ｎａｔｕｒｅ上 ,另有研究者报道 ,粗略地估计Ⅱ型糖尿病的…     

苦瓜的核糖体失活蛋白

核糖体失活蛋白是一类专一修饰核糖体的大亚基rRNA从而抑制蛋白质生物合成的蛋白毒素,可分为Ⅰ-型和Ⅱ-型两种类型。苦瓜中含有多种Ⅰ-型核糖体失活蛋白,如α-苦瓜素,β-苦瓜素和MAP30等,这些蛋白成分具有抗肿瘤、抗病毒和抗艾滋病等功能,因而近年来引起人们广泛的关注。对苦瓜核糖体失活蛋白的研究进展和应用前景进行了综述。     

蛋白质工程(续)

<正> 三、蛋白质工程的应用迄今通过蛋白质工程已完成了20多种蛋白质分子的结构改造,全面总结它的成就可能还为时尚早,但已显示了这一新技术广阔的发展前景。     

丝瓜核糖体失活蛋白的分离与纯化

采用一种改进的方法,简便快速地从丝瓜(Luffa cylindrica)籽中得到丝瓜蛋白α和β.它们在SDS-PAGE上均呈一区带,其分子量分别为28000和29000.等电聚焦测定等电点均为10.它们对无细胞体系蛋白质合成都有强烈的抑制活性,其ID₅₀分别为10μg/L和50μg/L,是目前发现的单链核糖体失活蛋白中活性最高的.     

鸭肝脂肪酸合成酶的胍变性与失活

报道了鸭肝脂肪酸俣成酶在胍变性过程中构变性过程中构象变化和活性变化的关系,首次验证了邹承鲁提出的酶活性部位构象的理论适用于多功能复合酶,同时该酶变性及复性均可测定出多个阶段,且证明有无活性稳态酶存在,在低浓度盐酸胍溶液中该酶的全反应活性和其中两个还原部位单独活性被同步可逆抑制,随着胍浓度增高,出现不可逆失活且程度和速度均迅速提高,在０．５４ｍｏｌ／Ｌ胍中该酶全反应活性在１．５分种内已有一半不可逆失     

核糖体失活蛋白的结构功能与分布

核糖体失活蛋白是一类在植物中较广泛存在的毒蛋白。植物核糖体失活蛋白具有RNAN-糖苷酶活力,可作用于核糖体RNA,使核糖体失去蛋白质合成的功能。根据一级结构,核糖体失活蛋白可分为两种类型。Ⅰ型核糖体失活蛋白由一条链组成,分子量在25—30 kDa之间。Ⅱ型核糖体失活蛋白由两条以二硫键相连的链(A、B链)组成,分子量在60 kDa左右。B链可以与细胞表面含半乳糖的受体结合,有助于A链进入细胞,作用于核糖体。目前至少已从9个科31种植物中分离纯化了Ⅰ型RIP。Ⅱ型RIP较少,仅在6科8种植物中发现。除了具有RNA N-糖苷酶活性,还发现一些核糖体失活蛋白可以切割超螺旋双链DNA,产生缺口环状和线状DNA。此外,一种Ⅰ型RIP,克木毒蛋白还具有超氧化物歧化酶活性。     

分子伴侣(MolecularChaperones)与蛋白质的折叠

尽管几百种蛋白质的三维结构已研究得非常清楚,但这些蛋白质折叠成其天然构象的机制与途径仍有待于进一步的研究。有关于蛋白质折叠的一些体外实验确定,决定一个蛋白质三维结构的信息存在于蛋白质的多肽链之中。在体外,一定条件下,在没有任何其他蛋白质存更多还原在下,一些酶和蛋白质可以自我装配成天然构象[1,2].     

大鼠肝癌细胞中失活的肿瘤相关基因的克隆和筛选

本文描述了运用减式杂交技术筛选只在大鼠正常肝细胞中特异性表达,而在肝癌细胞中失活的肿瘤相关基因的实验。实验中用肝癌细胞mRNA杂交筛减正常肝细胞cDNA得到探针A,用正常肝细胞mRNA杂交筛减肝癌细胞cDNA得到探针B。文章描述了用这两种探针对2500个重组子点杂交筛选得到的与探针A杂交强的cDNA克隆中的6个:TR1-6,并主要分析了其中两个在正常肝细胞中特异性表达的情况。实验中还建立了cDNA库,以用于体外转录mRNA及今后的全长cDNA筛选。     

蘑菇核糖体失活蛋白的研究进展

着重对近年蘑菇的核糖体失活蛋白研究的进展予以综述,在叙述每种核糖体失活蛋白的分离、纯化方法的同时,讨论了它们的生理生化性质、作用机制及可能的应用等。