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肿瘤细胞混合肽诱导特异性抗肿瘤免疫应答 总被引:20,自引:0,他引:20
采用细胞冻融、加热沉淀及酸处理等基本生化技术, 从肿瘤细胞中获取混合 肽; 将热休克蛋白70与肽体外结合, 观察热休克蛋白70-肽复合物对小鼠脾淋巴细胞的激活增殖作用以及增殖的淋巴细胞对瘤细胞的特异性杀伤作用, 并运用流式细胞仪分析增殖的淋巴细胞类型; 分别通过对腹腔和腿部肌肉接种了H22肝癌细胞的BALB/c小鼠进行热休克蛋白70-H22抗原肽复合物免疫注射, 观察小鼠肿瘤的抑制和荷瘤小鼠的生存期情况. 另外, 对免疫的小鼠采血进行肝、肾功能检测. 结果显示, 获取的混合肽中含有肿瘤特异的抗原肽, 其经热休克蛋白提呈后, 体外可刺激淋巴细胞活化增殖, 增殖的淋巴细胞为T淋巴细胞, 对肿瘤细胞有特异性细胞毒效应, 体内对腹水型和实体瘤型肿瘤的生长均可产生显著抑制作用, 同时延长荷瘤小鼠的生存期, 并且这种体内免疫对小鼠肝肾功能不产生影响, 不会引发自身免疫反应. 相似文献
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全反式维甲酸抑制肝癌细胞β-连环素的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
全反式维甲酸 (ATRA)是人肝癌细胞株SMMC 772 1的分化诱导剂 ,刺激细胞向正常方向分化 .为了研究ATRA诱导细胞分化的机制是否与 β 连环素 ( β catenin)有关 ,用终浓度为 1 0 μmol LATRA刺激SMMC 772 1 ,发现胞浆内β 连环素明显降低 .进一步实验证实 ,ATRA下调胞浆内β 连环素和诱导β 连环素的mRNA降低有关 .同时 ,ATRA处理基本不会对E 钙粘附素 β 连环素中的β 连环素的量产生影响 ,但能增强细胞凝聚力 .结果提示 ,ATRA对两种形式的 β 连环素的调节机制是不一样的 ,ATRA诱导细胞分化的机制和β 连环素有关 . 相似文献
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BiotechnologyNews 2 0 0 1年第 2 1卷第 5期报道 :用质粒DNA(pDNA)疫苗免疫糖尿病模式小鼠 ,延缓了小鼠胰岛素依赖型糖尿病 (IDDM)病程发展。进行此项研究的美国北卡罗来那大学 (CapelHill,NC)的研究者希望通过实验获得一种方法 ,以便终有一日能够利用免疫法延缓IDDM早期征候人群的病程发展。疫苗包含编码谷氨酸脱羧酶 65(GAD65)和白细胞介素 - 4 (IL - 4 )的DNA片段 ,前者是产胰岛素的 β细胞中的一种蛋白质。疫苗的作用方式是 :GAD65激活识别 β细胞的T细胞 ,IL - 4刺激这类T… 相似文献
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Ⅰ型糖尿病是一种自体免疫疾病,即身体的免疫系统进攻胰脏内生成胰岛素的β细胞。Yoon等人的研究表明,有一种叫GAD的蛋白质能独自引起这种进攻,这个发现在寻找Ⅰ型糖尿病治疗方法上迈出了一大步。他们用糖尿病小鼠模型进行实验,对小鼠进行基因工程改性,制造了一种β细胞不能生成GAD的家系。他们观察到免疫细胞不进攻这些没有GAD的β细胞,意味着如果能阻止人体的β细胞生成GAD的话,该法也许会开启一条治疗Ⅰ型糖尿病的途径。治疗Ⅰ型糖尿病的可能靶标@车笛 相似文献
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p62 dok是新近发现的一种信号分子 ,属酪氨酸激酶下游蛋白 ,在胰岛素和 /或Pervanadate等刺激下可产生酪氨酸磷酸化 ,酪氨酸磷酸化后的p62 dok可与p2 1rasGAP结合 ,因而推测p62 dok可能参与Ras MAP激酶径路的调节 ,在胰岛素信号转导中起着重要作用 ,与糖尿病尤其是Ⅱ型糖尿病的发生、发展有关。目前关于p62 dok的研究仅局限在 3T3 L1,Sf9等少数培养的细胞 ,尚未见p62 dok在整体动物 ,特别是糖尿病动物上表达的直接报道。本文拟通过STZ类I型糖尿病大鼠模型 ,探讨胰岛素的主要靶细胞 脂… 相似文献
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β 1,3 D 葡聚糖可以通过与巨噬细胞和其它白细胞上的受体 (如补体受体 3)结合 ,刺激免疫系统发挥其抗肿瘤和抵抗微生物的效应。最近GordonD等在巨噬细胞上发现了新的 β葡聚糖受体Dectin 1,分子量大约 2 80 0 0Da ,属Ⅱ型细胞膜受体 ,,膜外是类C型凝集素区域 ,胞质内为酪氨酸活性区域 (此特征与其它免疫受体一致 ,可转导感染 )。Dectin 1在肝脏、肺和胸腺表达最广泛 ,能够识别 β 1,3链以及 β 1,6链的葡聚糖。其酪氨酸敏感区可结合酵母多聚糖而转导感染 ,类C型凝集素区域类似于自然杀伤细胞 (NK细胞 )C型凝集… 相似文献
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人硫氧还蛋白在大肠杆菌中的高效表达、纯化及对内毒素血症小鼠的保护作用 总被引:4,自引:0,他引:4
为了对人硫氧还蛋白hTRX功能及其在休克治疗前景进行评价 ,将PCR扩增的hTRX基因连入pKPL 4载体 ,转化大肠杆菌pop2 136 .通过两步离子交换柱分离得到纯化的蛋白 ,进一步观察其稳定性及在体外对NFS 6 0和MCF 7细胞的促增殖活性 .结果发现 ,TRX蛋白可明显促进去细胞因子诱导的NFS 6 0细胞增殖和撤血清后MCF 7细胞的增殖 ,并发现外源性TRX可明显对小鼠内毒素血症起保护作用 . 相似文献
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HSP6 0家族属于热激蛋白 ,存在于所有的原核与真核生物中 ,是细胞最保守的保护机制之一 .当机体受到胁迫时 ,热激蛋白大量合成 ,以恢复变性蛋白或凝聚蛋白的天然构象 .而对病原体的侵入 ,HSP6 0会充当免疫抗原来激活免疫系统 .HSP6 0在细胞生命活动中具有重要的功能 .病原体衍生热激蛋白被认为是细菌或寄生物侵染过程中的一种优势抗原 .HSP能够激活先天存在的免疫系统 .通过儿童用抗白喉、百日咳、破伤风的三价疫苗接种牛痘时产生高效价的优势抗HSP6 0 ,证实HSP6 0在许多侵染过程中是一种免疫优势抗原 .一个病原体的吞噬作用中会经… 相似文献
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李潇 《中国生物化学与分子生物学报》2001,17(3):355-355
医生对肺癌往往诊断过迟 ,使病人丧失及时手术的机会 .现在研究者发现 ,引起 2个抗癌基因畸变的DNA高甲基化可帮助早期诊断肺癌 .研究者在二十世纪 70年代 ,从 2 1个患有鳞状细胞癌的病人取得痰样品进行检查 ,这些病人中有些已诊断为肺癌 ,有些则尚未诊断为肺癌 .所有这些人都是吸烟者 ,大多数人在工作时暴露于镭射气 .所有这 2 1个病人证明是有DNA高甲基化的异常情况 ,这种DNA高甲基化影响编码p1 6和MGMT这 2个抑癌蛋白的 1~ 2个基因 .研究者在 2 0 0 0年 1 1月 1日的CancerResearch上报道 :这 2 1个病人中有… 相似文献
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魔芋葡甘露寡糖的制备、化学结构及对胰岛NO自由基释放量的影响 总被引:6,自引:0,他引:6
魔芋精粉经 β 甘露聚糖酶酶解成寡糖后 ,用活性炭柱进行分离纯化 ,以不同浓度 (5 % ,10 % ,2 0 % )的乙醇洗脱 .研究不同洗脱组分对链脲佐菌素 (STZ)诱导糖尿病模型的胰岛NO自由基释放量的影响 .发现 1mg ml以 5 %乙醇洗脱的寡糖可以使胰岛培养液中的NO自由基释放量平均下降2 5 4 % (P <0 0 5 ) ,0 1mg ml以 5 %乙醇洗脱的寡糖使NO自由基水平下降 2 0 % (P <0 0 5 ) .结果表明 ,5 %乙醇洗脱的魔芋寡糖对保护胰岛免受链脲佐菌素 (STZ)的破坏有一定的作用 .用凝胶色谱、红外光谱、元素分析、核磁共振光谱、质谱等方法初步分析了 5 %乙醇洗脱的魔芋寡糖的化学结构 .发现该糖是一种四糖 ,分子量为 6 6 6 .其推测性结构式为 :β D Man(1→ 4 ) β D Man(1→ 4 ) β D Glc(1→ 4 )α D Man ,β D Man(1→ 4 ) β D Glc(1→ 4 ) β D Man(1→ 4 )α D Man或 β D Glc(1→ 4 ) β D Man(1→4 ) β D Man(1→ 4 )α D Man . 相似文献
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热休克反应对小鼠油酸肺损伤的影响贾松惠,李立文,孙志东,喻召才,李静,王安辉,温光楠(第四军医大学病理生理学教研室西安710032)亚致死剂量的热刺激可以通过热休克蛋白的大量产生而提高细胞的抗损伤能力 ̄〔1〕。本实验旨在通过观察热休克反应后小鼠油酸肺... 相似文献
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HSP70抗原呈递分子的研究进展 总被引:8,自引:0,他引:8
郭建巍 《微生物学免疫学进展》2000,28(3):95-98
热休克蛋白70(HSP70)是广泛存在于原核和真核细胞中的一组高度保守的蛋白质分子家族,其主要功能是促进与维持新生多肽的正确折叠,并且调节细胞的生长、发育、分化、死亡。HSP70还是免疫系统识别的主要抗原,在抗原的加工、处理和呈递以及效应T细胞的激活过程中扮演着重要角色。来自同源肿瘤成份的HSP治疗小鼠肿瘤具有明显的效果,是肿瘤肽的高效传递系统,是CD^+8T细胞激活的佐剂。了解其功能对某些疾病发 相似文献
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利用半定量RT-PCR和免疫组化的方法同时从mRNA水平和蛋白质水平对血管生成素样蛋白2在不同病理阶段的2型糖尿病肾病模型小鼠--db/db小鼠肾脏中的表达情况进行了较为系统的分析.结果发现:a.在糖尿病前的db/db小鼠(4周龄的db/db小鼠),血管生成素样蛋白2与作为正常对照的db/m小鼠相比,差异不是很大,随着肥胖的加剧,高血糖、蛋白尿的出现,血管生成素样蛋白2在db/db小鼠肾脏中的表达无论从mRNA水平还是从蛋白质水平均显著升高.b.从免疫组化的分析结果来看,血管生成素样蛋白2主要分布于小鼠肾脏的肾小球部分,主要是沿毛细血管袢呈线性分布,其位置与足细胞的位置重叠,足细胞是小鼠肾脏中血管生成素样蛋白2的主要分泌细胞.c.小鼠肾脏血管生成素样蛋白2的表达水平似乎还与鼠龄相关:虽然变化幅度不是很大,但在周龄较大的小鼠(如20周龄以上),其表达水平相对较高.上述工作不仅印证了先前对2型糖尿病肾病患者肾小球基因表达谱的分析结果,更加明确了血管生成素样蛋白2与糖尿病肾病的相关性,同时揭示了血管生成素样蛋白2在正常小鼠和糖尿病肾病小鼠肾脏中的表达、分布和变化规律,有利于进一步揭示血管生成素样蛋白2的功能及其在糖尿病肾病发生、发展过程中的可能作用,探讨糖尿病肾病的分子机制. 相似文献
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李潇 《中国生物化学与分子生物学报》2006,22(8):646-646
科学家已找到了一种方法来大量制造胰岛β-细胞,并成功地将此β-细胞移植到Ⅰ型糖尿病患者体中.但是,从供体收集来的这种β-细胞只能少量供应于1%需要移植的患者.建立实验生长的β-细胞系,可克服这种供应不足的缺点.在Ⅰ型糖尿病中,免疫细胞杀灭了β-细胞,从而断绝了体内胰岛素的来源.没有胰岛素,体内组织便不能加工糖类,故而Ⅰ型糖尿病患者依赖胰岛素注射.在2005年10月份的Nature Biotechnology上,研究者报道了一种制造β-细胞的技术,它基本上解决了移植用β-细胞供应短缺的问题.该技术的核心是研究者称之为人β-细胞“可逆性无限增殖化”“reversibly immortalized”细胞系技术.首先,研究者从人尸体收集来的胰脏中抽取β-细胞.由于这些β-细胞在体外趋向于迅速死亡,于是研究者便利用其能保持永久复制能力的基因来做实验.含有这种基因的细胞导致一种危险性,即该细胞可能长出肿瘤来.为了对抗这种危险性,研究者建立了一种关闭这种复制的机制.研究者参入了一种分子标志,可引导一种DNA切割酶到达所增加的基因处.该酶的切割定时发生在制造β-细胞后,而在细胞移植前.下一步,研究者从他们建立的β-细胞系中筛选出271个β-细胞系,再从中找出最适合移植的β-细胞系.他们切除了制造肿瘤的β-细胞系,而不管切除的是否是保持永久复制能力的基因;此外,他们切除了不制造胰岛素的β-细胞或其他β-细胞蛋白质的细胞素.最终,只有1个细胞系通过这两个试验.研究者利用筛选出来的β-细胞系,培养出足够的细胞,引入10个缺乏免疫活性的糖尿病小鼠,每个小鼠引入3百万个细胞.研究者报道,这些小鼠保持正常的血糖浓度达30星期之久.实验室里生长的β 细胞制造的胰岛素仅为正常人体β-细胞制造的40%.于是,人移植所需的β-细胞要多于10亿个细胞.这个巨大的数量明确要求大规模的细胞生长,为此大规模地培养细胞,难免引起发生肿瘤的突变.研究者现在的目标是大量生产可逆性无限增殖化细胞,其安全性与疗效能通过FDA美国食品与药物管理局批准而用于临床.研究者指出,他们所制造的β-细胞在移植于人时,仍有受到免疫攻击的危险性.研究者的目的是最终开发出能抵抗免疫攻击的β-细胞系. (李潇摘译自K.Greene:Science News,October 1,2005,Vol.168,p.212) 相似文献
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幽门螺杆菌热休克蛋白A基因的克隆、表达及免疫原性研究 总被引:3,自引:0,他引:3
幽门螺杆菌的感染可诱发人体产生胃炎和消化性溃疡,其组成成分热休克蛋白A(HspA)可刺激机体产生保护性的免疫反应。用PCR方法从幽门螺杆菌的染色体DNA上扩增出HspA基因片段,将其插入原核表达载体pET22b(+)中,并在BL21(DE3)大肠杆菌表达。经测序HspA基因片段有354bp组成,可编码118个氨基酸残基的多肽。SDSPAGE和免疫印迹分析检测发现,HspA基因表达的蛋白质分子量约为15kD,并证实该重组蛋白质可以被幽门螺杆菌感染阳性患者的血清所识别,同时将其免疫小鼠可刺激机体产生抗该重组蛋白质的抗体。HspA有可能作为一种有效的蛋白质疫苗用于幽门螺杆菌感染的预防和治疗。 相似文献
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重组人apoE基因表达活性和转基因小鼠研究 总被引:8,自引:0,他引:8
人apoE基因组DNA,去除其自身妄动仓,代之以小鼠金属硫蛋白启动子,重组质粒经脂质体介异转入小鼠NIH/3T3细胞后,以人apoE基因组DNA/EcoRⅠ片段为探针检测mRNA表达,可见apoE mRNA杂交信号很强,经重金属诱导后杂交信息更强,表明MT启动子功能良好,pME表达正常。 相似文献
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Asia Ⅰ口蹄疫vp2蛋白单克隆抗体的制备及单抗竞争ELISA方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
制备Asia Ⅰ口蹄疫病毒vp2单克隆抗体(mAb)并建立了单抗竞争ELISA方法.用纯化的Asia Ⅰ型口蹄疫病毒vp2重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合,采用间接ELISA和有限稀释法筛选杂交瘤细胞.分别用ELISA、Western blotting检测mAb腹水的效价及其特异性.筛选到杂交瘤细胞2株,腹水效价均在100×2<'9>以上:以纯化后的AsiaⅠ型口蹄疫病毒vp2重组蛋白作为抗原,利用Asia Ⅰ型口蹄疫病毒vp2单抗酶标物建立了竞争ELISA方法用来检测Asia Ⅰ型口蹄疫抗体.临床应用表明,该方法与UBI公司的口蹄疫全病毒抗体检测试剂盒总符合率达89.0%,和荷兰赛迪公司的口蹄疫病毒LPB-ELISA抗体检测试剂盒总符合率达86.5%. 相似文献
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谷氨酸对嗜铬细胞瘤细胞热休克蛋白70 mRNA的诱导分析 总被引:2,自引:0,他引:2
热休克反应普遍存在于从细菌到人的整个生物界。除热外,多种应激原都可引起热休克蛋白的诱导。至于神经递质是否能够诱导热休克蛋白的表达,目前并不清楚。本文以诱导型热休克蛋白(hsp)70的cDNA为探针,运用Northern blot的方法,在嗜铬细胞瘤细胞(PC12)上,分析了谷氨酸和乙酰胆碱对hsp70 mRNA的诱导作用。在此基础上又初步分析了起作用的递质受体。结果表明:在一定的浓度(50 ̄500 相似文献