在利用重组植物生产海藻糖方面联手

荷兰植物生物技术企业MOGEN公司和种苗企业D.J.van der Have公司上周签定共同开发合同,即用重组植物生产具有稳定物质特性的双糖海藻糖。目的是使用甜菜和马铃薯确立大量生产廉价海藻糖的技术。通过D.J.van derHave公司,两个公司还保证从芬兰Alko公司接受海藻糖专利许可的选择。两公司打算到1999年上市含植物海藻糖的产品。     

利用植物根溢泌生产重组蛋白

《ＮａｔｕｒｅＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ》１９９９年１７卷５期４６６～４６９页报道：已知利用早期转化和培育可使植物各部分例如叶片、果实、根、块茎和种子等生产异源或重组蛋白。但这些重组蛋白常存在于各种亚细胞腔室例如细胞质和内质网或非原质体腔内。从这些生化复杂的植物组织细胞中提取和纯化重组蛋白既费时又价昂。利用离体无菌培养转基因植物细胞或器官来取得重组蛋白也存在生长慢、不稳定、单产低和代价高等缺点。有鉴于此,美国拉特格斯大学生物技术中心的科学家Ｂｏｒｉｓｊｕｋ等（１９９９）将编码３种不同来源的异源蛋…     

利用谷氨酸生产菌大量生产海藻糖

味之素公司宣布确立了大量生产海藻糖的技术,从93年春开始销售其样品,这种海藻糖是用变异谷氨酸生产菌Brevibacterium,以40克/升以上的高浓度从原料糖蜜中生产的,所以成本低。这几年开发了用于医药品和化妆品、食品等的海藻糖。现有的从酵母中抽提的产品价格很高(1公斤3万日元),仅限于试剂水平使用。国内外企业竞相开发海藻糖的低价生产法并开拓市场。美国Calgene公司使用基因重组技术,开发由葡萄糖生产海藻糖的技术,与英国Quadrant Holdings公司设立了合资企业,打算主要事业化用于食品的海藻糖。味之素公司准备利用氨基酸发酵生产法与其对抗。海藻糖是味之素公司首先事业化的第一种糖制品。     

植物细胞培养生产重组蛋白

用植物细胞培养生产重组蛋白,集合了微生物发酵的快速性、动物细胞培养产物的多样性和完整植株培养系统的安全性,近年来引起了广泛的关注。虽然还未有用植物细胞培养来进行重组蛋白的商业生产,但是它的生产原则较规范,下游处理过程较简单,具有潜在商业生产的可行性。     

AXIS报道利用植物生产HIV疫苗获得了成功

AXIS Genetics Ltd已经公布了利用该公司的专利嵌合病毒粒子(CVP)技术在植物中生产新型HIV疫苗的首批动物试验结果。在Warwick大学已经利用含HIV gp41表面糖蛋白的遗传改良植物病毒进行了上述试验。结果表明通过在植物病毒表面添加一个专性的HIV表位“cocktail”生产预防HIV的疫苗是可行的。Ⅰ期临床试验计划在今年下半年进行。 利用不同剂量的含gp41肽的嵌合病毒粒子(CVP-HIV(gp41))免疫接种二种小鼠品系以进行实验室试验,结果产生高浓度的中和抗体。从这些小鼠体内分离出的血清可以大大降低实验室T-细胞中     

利用基因重组提高海藻糖的含量和酵母的冷冻耐性

农林水产省食品综合研究所酵母研究室主任高野博幸等小组利用面包酵母的基因重组提高海藻糖的含量,同时也提高了冷冻耐性获得成功。日本独自开发的冷冻耐性酵母通过流通冷冻贮藏的面包胚可将烤制的面包送到消费者手中。由于面包市场的多样化和竞争激烈(包括从制面包到流通)还急需高性能的面包     

用植物细胞生产重组蛋白

京都大学水学部植物病理学教授古泽(?)男等小组利用一种花叶病毒(BMV),在植物细胞大量生产重组γ干扰素(IFNγ)(全蛋白量的10%)成功。用再现的植物体追试这项结果,可开发在大田生产重组蛋白的分子农业。该氏估算完成这项技术制造重组蛋白每1克约2～3日元。分子农业是比利时 PlantGenetic System 公司提倡的技术,1989年该公司利用油菜籽白蛋白基因,生产低分子的脑内肽获得成功。麒麟啤酒公司与帝京大学共同以烟草花叶病毒为载体用烟草生产脑啡肽。用这种方法只能生产5个氨     

利用重组大肠杆菌生产双乙酰

大肠杆菌自身代谢特征具有发酵生产双乙酰的天然优势。利用PCR技术,以广泛用于双乙酰生产的Lactococcus lactis基因组DNA为模板,克隆得到α-乙酰乳酸合成酶基因α-als,将其构建在表达载体pET-30 a上。与能够高效表达3种大肠杆菌来源HSP 70家族分子伴侣的pKJE 7质粒共同转化E.coli BL21(DE3)。利用目的蛋白质分子伴侣共表达的方法,首次获得了能够高效表达具有酶活力的α-乙酰乳酸合成酶的重组大肠杆菌。在静置培养条件下,能够在该菌株的培养基中检测到双乙酰的生成。融合蛋白酶在温度为30-40℃和pH在6-7之间时具有较高的酶活,以丙酮酸为底物,该酶最适pH为6.8,最适温度为39℃。     

生产重组蛋白的植物表达系统

作为高附加值重组蛋白生产平台,由于在成本和安全性方面的优势,植物已成为继微生物、哺乳动物等表达系统之后,获得广泛认同的极具潜力的蛋白表达系统。植物表达系统主要包括转基因植株,叶绿体转化植物,瞬时表达系统,细胞悬浮培养。综述了这些表达系统生产重组蛋白的产量和质量,尤其是各种表达系统的优缺点。     

大量生产天仙子碱的重组植物

京都大学农学部教授山田康之、助手桥本隆、尹大珍等用基因工程方法强化了植物参与天仙子碱生物合成酶活性,提高了生物碱的合成效率。这项研究的详细情况在7月21日名古屋召开的植物组织培养学会讨论会上有介绍。天仙子碱是天仙子胺在天仙子胺6β羟化酶(H6H)的作用下形成的。目前的研究表明天仙子碱的形成速率取决于H6H酶。因此山田等克隆了茄科植物H6H酶的cDNA。H6H酶分子量为38000,由344个氯基酸构成。在Ti质粒中的花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子下端接上H6H的cDNA导入Atropa     

用重组植物生产治疗用抗体

美国W.R.Grace公司(佛罗里达州Boca Raton)的子公司美国Agracetus公司(维斯康星州Middleton)受美国Bristol-Myers Squibb公司(纽约州New York)的委托,并与之签订了开发生产单克隆抗体的转基因植物的合同。生产Bristol Myers Squibb公司作为治疗用抗体正在开发BR96。目前使BR96与抗癌剂的一种——阿霉素结合的产品正在进行Ⅰ期临床试验,是为了调查用于固形癌治疗时的安全性。Agracetus公司为了方便回收产生的抗体,打算培育在种子内生产抗体的重组玉米和重组大     

转基因植物生产重组药物蛋白的研究进展

转基因植物作为一种新型生物反应器,可以安全、经济、有效的生产各种重组蛋白,以此作为大规模的重组药物生产平台备受瞩目。但是表达量低、下游处理复杂、糖基化结构改变是植物反应器中经常遇到的困难,这些困难限制了植物表达重组药物蛋白的商业化发展。针对这些问题,人们分别采用不同的生物技术策略加以解决,对此做一简要综述。     

高密度发酵重组大肠杆菌产海藻糖合成酶

酶法催化是目前生产海藻糖的主要手段。本文中,笔者通过高密度发酵重组大肠杆菌产海藻糖合成酶,进而以麦芽糖为底物,催化生产海藻糖。首先根据大肠杆菌高密度发酵条件要求,在揺瓶中对基因工程菌进行了培养基、发酵条件和诱导条件的逐一优化;然后在5 L和50 L发酵罐中进行批次补料发酵的放大实验;最后采用变指数-恒pH法的策略发酵重组大肠杆菌,结果OD_(600)达到97,海藻糖合成酶酶活达到(24 000±350) U/mL,实现了海藻糖合成酶的重组大肠杆菌高密度发酵生产,极大提高了海藻糖的生产效率。     

植物海藻糖代谢及海藻糖-6-磷酸信号研究进展

海藻糖代谢和海藻糖-6-磷酸（T6P）信号途径在植物生长和发育过程中具有重要的调控作用。T6P是海藻糖的代谢前体,是植物响应碳元素可用性、调控生长发育的关键信号分子。植物体中除了自身的海藻糖合成途径外,由病原菌产生的海藻糖或T6P能够导致植物代谢和发育的重新编程。植物不同阶段的生长发育,包括胚胎发育、幼苗生长、成花诱导及叶片衰老等,都受T6P的调控。T6P信号的一个关键互作因子是蔗糖非发酵相关激酶1（SnRKl）,T6P能够抑制SnRK1的催化活性,进而调控植物的生长和发育过程。     

利用植物系统表达重组蛋白的的研究进展

植物是可以生产不同生物药剂品的成本低廉的生物反应器,综述了稳定转化系统、瞬时表达系统以及叶绿体基因组转化方法,这三种不同的植物表达系统的特点和研究现状,并对其存在的问题及未来的前景进行了分析。     

海藻糖介导的信号转导与植物抗逆性

海藻糖是一种非还原性二糖,它广泛存在于细菌、真菌、酵母、昆虫、无脊椎动物和植物等生物体内。海藻糖不仅作为碳水化合物的储备,而且还是一个多功能分子。海藻糖作为一种信号分子,启动信号转导级联反应,改变基因表达和酶的活性,与激素也有一定的关系。采用基因工程和通过外源施加的方法增加海藻糖在植物体内的积累可以提高植物的抗逆性,这为提高农作物的抗逆性提供了新的策略。     

利用转基因植物生产药用蛋白

本文简单介绍了国内外在利用转基因植物或植物病毒表达载体生产药物蛋白的研究和产业化现状及其发展趋势,并对２１世纪特别是前１０～１５年我国在该生物技术领域的研究方向、产业化重点以及产业化应注意的问题提出了相关建议。     

利用重组Pichia pastoris生产腺苷甲硫氨酸

为改造甲醇利用型酵母Pichia pastoris来生产腺苷甲硫氨酸（SAM,S－adenosyl-L-methionine),我们将一个带有SAM合成酶基因的胞内表达质粒转化入Pichia pastoris菌株GS115,经过G418抗性筛选得到一株有两个基因拷贝的转化子。该菌在含有甲醇和甲硫氨酸的培养基中生长5d后,其细胞内的SAM的产量比原始菌株提高了30余倍。对该菌生产SAM的培养基中的碳源与氮源进行了优化,结果显示碳源的控制对该菌SAM产量的影响很大。在试管水平,该菌在含有0．75％的L-methionine并且碳源和有机氮源经过一定程度优化的培养基中,生长6d后SAM产量达到1．58g/L。     

美利用基因工程植物生产塑料

美国密执安州立大学和詹姆斯·梦迪逊大学的科学家从可以制造塑料聚羟基丁酸酯的土壤细菌 Acali-genes eutrophus 分离出一种基因,将其导入植物拟南芥菜(Arabidopsis thaliana),然后又从土壤细菌 A.entrophus 中分